胚胎工程的应用及前景教学文稿

胚胎工程(gōngchéng)的应用及前景第一页，共37页。如何将这种优质(yōuzhì)的牛进行快速、大量的繁殖呢？日本(rìběn)神户牛肉（雪花牛肉）第二页，共37页。1.胚胎移植(yízhí)概念将雌性动物体内的早期胚胎(pēitāi),或者通过体外受精及通过其他方式得到的胚胎(pēitāi),移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。供体：受体：实际上：提供胚胎(pēitāi)的个体。

接受胚胎的个体。生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程胚胎移植是胚胎工程其他技术的最后一道工序第三页，共37页。.第四页，共37页。请阅读课本P75、图3-17“胚胎(pēitāi)移植的现状和意义”，优势：可充分发挥雌性优良个体(gètǐ)的繁殖潜力第五页，共37页。3.胚胎移植(yízhí)的生理学基础请认真阅读课本P76，思考讨论（P76）：胚胎(pēitāi)移植的生理学基础的四点内容是什么？第六页，共37页。生理学基础意义同种动物(dòngwù)的供体和受体排卵后，生殖器官的是相同的。生理(shēnglǐ)变化为供体的胚胎移入受体提供(tígōng)相同的。生理环境早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于

状态。为胚胎的收集提供了可能游离受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生

。免疫排斥反应供体胚胎可与受体子宫建立正常的

和

联系，但其

不受影响。生理组织遗传特性为胚胎在受体内的存活提供了可能为移植后的胚胎继续发育提供了营养等方面的保障胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状况有关第七页，共37页。讨论（P76）:1、在胚胎移植操作中，怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致？例如，供、受体的发情时间要一致吗？供体胚胎移入受体子宫的位置，应与在供体内(tǐnèi)的位置相同或相似吗？应对供体和受体母畜进行同期发情处理，使它们(tāmen)的生理条件达到同步后一致，这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件，这是胚胎移植成功与否的关键。因此，必须做到供、受体母畜的发情时间一致。同时还要做到移入受体子宫胚胎的位置应该与其在供体内的位置相同或相似，移入胚胎一侧的受体子宫对应的卵巢必须有黄体存在。第八页，共37页。2、胚胎移植实质你认为这样(zhèyàng)的概括正确吗？是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置(wèizhi)的转移。正确(zhèngquè)。第九页，共37页。请认真阅读课本P77，图3-19，思考讨论：（1）胚胎移植的基本(jīběn)程序包括哪些？（2）每一步技术是如何进行操作的？（3）思考：为什么要进行这些操作？胚胎(pēitāi)移植的基本程序第十页，共37页。选择及同期发情(fāqíng)处理超数排卵处理(chǔlǐ)配种(pèizhǒng)或人工授精胚胎收集胚胎检查胚胎保存胚胎移植妊娠检查分娩胚胎移植的基本程序第十一页，共37页。（1）对供体、受体进行选择(xuǎnzé)及处理供体：遗传性能和生产性能优秀的个体；受体：健康和正常繁殖能力的个体处理：同期发情(fāqíng)具体做法：用相关激素处理。第十二页，共37页。（2）超数排卵处理(chǔlǐ)具体做法：注射促性腺激素第十三页，共37页。（3）配种(pèizhǒng)或人工授精精子来源：同种优良(yōuliáng)的雄性动物。第十四页，共37页。（4）胚胎(pēitāi)的收集在配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(chūlái)。冲卵是把母牛的卵子冲出来(chūlái)吗？第十五页，共37页。（5）对胚胎(pēitāi)进行质量检查你知道检查的目的吗？此时胚胎处于(chǔyú)什么时期？检查胚胎(pēitāi)的发育状况，处于桑椹胚或囊胚第十六页，共37页。（6）胚胎(pēitāi)的保存胚胎(pēitāi)保存的条件是什么？—196℃的液氮中保存(bǎocún)液氮罐第十七页，共37页。（7）胚胎(pēitāi)的移植方法一：手术法具体做法：引出受体子宫和卵巢，将胚胎注入(zhùrù)子宫角，缝合创口。方法二：非手术法将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应部位，注入(zhùrù)胚胎。第十八页，共37页。（8）妊娠(rènshēn)检查第十九页，共37页。（9）受体母牛产下胚胎移植(yízhí)的犊牛第二十页，共37页。完成(wánchéng)流程图第二十一页，共37页。例1：下列有关动物胚胎移植的叙述(xùshù)中，不正确的是（）A．从受孕母畜体内取出的受精卵或胚胎均能移植B．受体母畜必须处于与供体母畜同步发情状态C．超数排卵技术要使用一定的激素D．试管婴儿技术只有受精及早期卵裂过程在体外进行A第二十二页，共37页。二、胚胎分割阅读课本，找出并掌握以下问题：（1）胚胎分割的概念（2）胚胎分割所得后代的特点(tèdiǎn)（3）胚胎分割的理论基础（4）胚胎分割所需的主要仪器（5）胚胎分割操作过程（6）胚胎分割的缺陷第二十三页，共37页。1.概念:采用机械(jīxiè)方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。第二十四页，共37页。2.特点：后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。3、理论基础动物胚胎细胞(xìbāo)的全能性。所以胚胎分割的时期为：囊胚或桑椹胚。第二十五页，共37页。4、使用的主要仪器：实体显微镜和显微操作仪。5、具体操作选择发育良好(liánghǎo)形态正常的桑椹胚或囊胚，将其移入盛有操作液的培养皿中，用分割针进行分割。用分割针或分割刀片将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的空透明带中，或直接将裸半胚移植给受体。第二十六页，共37页。.切几份,之间关系,有什么方法,目前主要是2份,原因(yuányīn)概念.切什么(shénme)时期胚胎分割移植的显微(xiǎnwēi)操作图3-23第二十七页，共37页。..性别(xìngbié)鉴定2第二十八页，共37页。操作注意事项：①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割。原因(yuányīn)：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。第二十九页，共37页。②胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低。早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的。分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复(huīfù)和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低。第三十页，共37页。6、胚胎分割技术的缺陷（1）刚出生动物的体重偏低，毛色和斑纹还存在差异；（2）采用胚胎分割技术产生同卵多胎(duōtāi)的可能性是有限的。常见的是同卵双胎第三十一页，共37页。专能干细胞多能(duōnénɡ)干细胞全能(quánnéng)干细胞特点(tèdiǎn)只能分化成一种类型或功能密切相关的两种类型的细胞能分化成多种细胞或组织，但不能发育成完整个体能形成机体的所有组织器官，发育成完整个体举例上皮组织基底层的干细胞，神经干细胞造血干细胞胚胎干细胞受精卵干细胞分类第三十二页，共37页。1、概念：简称(jiǎnchēng)ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。2、特点：（1）形态：体积小，细胞核大，核仁明显。（2）功能：具有发育的全能性。可分化为成年动物体内任何一种组织细胞.（3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。第三十三页，共37页。全能细胞囊胚胎儿内细胞团细胞生殖腺细胞受精胚胎干细胞分离培养分离(fēnlí)内细胞团胰蛋白酶(yídànbáiméi)处理转入(zhuǎnrù)培养皿中培养不加饲养层细胞培养细胞分化饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞，因为胚胎成纤维细胞可以分泌一些能抑制细胞分化的物质，满足促进干细胞生长的同时抑制干细胞分化的条件。EK细胞加饲养层细胞

培养ES