食品安全地方标准 乳粉中酪蛋白磷酸肽的测定_第1页
食品安全地方标准 乳粉中酪蛋白磷酸肽的测定_第2页
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PAGE3婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽的测定高效液相色谱法1范围本标准适用于婴幼儿配方乳粉中酪蛋白磷酸肽高效液相色谱法的含量测定。本标准方法检出限为0.1mg/kg。2规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注明日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理乳粉用常温去离子水溶解，以乙腈和0.1％醋酸溶液为流动相，在030min内，乙腈由0％100％梯度洗脱，经ZORBAXSBC18柱色谱柱分离，高效液相色谱紫外检测器280nm检测，保留时间定性，外标法测定试样中乳粉中酪蛋白磷酸肽的含量。4试剂和材料除非另有规定，仅使用分析纯试剂、蒸馏水或去离子水，满足GB/T6682要求。4.1乙腈：色谱纯。4.2冰醋酸。4.3滤膜：0.45m。4.4酪蛋白磷酸肽标品：分析纯，含量≥95.00%。4.5酪蛋白磷酸肽标准储备液：精密称取酪蛋白磷酸肽标准品100.00mg，用去离子水溶解并定容于25mL容量瓶中，用0.45m滤膜过滤后，备用。于4℃的冰箱避光保存，保质期7天。5仪器5.1天平（精度0.01g和0.0001g）。5.2高效液相色谱仪（带紫外检测器，二元泵）。6分析方法6.1试样处理称取乳粉试样3g5g（精确至0.01g）于50mL容量瓶中，常温去离子水溶解，定容至刻度，摇匀。0.45m过滤，供高效液相色谱分析。6.2酪蛋白磷酸肽标准工作液准确吸取酪蛋白磷酸肽标准溶液0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。制成浓度依次为l0g/mL、20g/mL、40g/mL、100g/mL、200g/mL的标准工作溶液，供高效液相色谱分析使用。标准工作溶液现用现配。6.3色谱参考条件色谱柱：ZORBAXSBC18柱（4.6mm×250mm×5m）或等效柱。紫外检测波长：280nm。流动相：乙腈和0.1％醋酸溶液，在030min内，乙腈由0％100％梯度洗脱。流速：1.0mL/min。柱温：25℃。进样量：20L。6.4测定精密吸取试样和标准样品溶液，按规定色谱条件分别进样20µL，按照6.3项条件进行检测，以保留时间定性，外标法定量。谱图见附录。6.5结果计算按外标法计算试样中酪蛋白磷酸肽的含量。见下式：式中：X—试样中酪蛋白磷酸肽的含量，mg/kg；A—从标准曲线上求出的试样液中酪蛋白磷酸肽的质量，g；f—试样的稀释倍数；m—试样的取样量，g；计算结果保留两位有效数字。6.6精密度在重复性条

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