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文档简介
会计学1布洛芬在体内的分布改进课前准备取小鼠2只,称重,编号。2号用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g。3号用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g。计时第1页/共13页实验目的掌握测定药物分布的方法和临床意义。了解药物在体内的分布动力学规律。第2页/共13页相关知识——药物分布药物分布的概念:药物从血液向组织、细胞间液和细胞内液转运的过程。药物分布影响因素:血浆蛋白结合率器官血流量组织细胞结合体液pH和药物解离度体内屏障血脑屏障、胎盘屏障和血眼屏障第3页/共13页小鼠灌胃给予同等剂量的布洛芬溶液后,在不同时间点测量血液、脑、肾、肝中布洛芬的浓度,绘出不同时点的布洛芬的组织分布图。测量血液、肝中布洛芬浓度采用比色法。实验原理第4页/共13页实验步骤1标准管的制备:0.00125%布洛芬溶液第5页/共13页取小鼠3只(已禁食12h),称重,编号。1号用生理盐水灌胃0.1ml/10g,立即断头取血摇匀。2号用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g,30min断头取血摇匀。3号用20%布洛芬灌胃0.1ml/10g,60min断头取血摇匀。取离心管3支编号,分别于1管(对照)、2管(给药30min)和3管(给药60min)内加肝素0.1ml,断头取血,立即摇匀。分别从3支管中取抗凝血各0.5ml加入已预加无水乙醇4.5ml试管中,摇匀。称取各小鼠300mg肝组织,分别置于研磨器中,加无水乙醇(0.4ml/100mg)研碎后再加入无水乙醇(0.5ml/100mg)摇匀,制成匀浆后全部倾入试管中。实验步骤2第6页/共13页实验步骤3编号采样时间离心管内容物1-1立即取血0.5ml+无水乙醇4.5ml1-2立即取肝300mg+无水乙醇(0.9ml/100mg)2-130min后血0.5ml+无水乙醇4.5ml2-230min后肝300mg+无水乙醇(0.9ml/100mg)3-160min后血0.5ml+无水乙醇4.5ml3-260min后肝300mg+无水乙醇(0.9ml/100mg)第7页/共13页实验步骤4将对照鼠和各给药鼠的血及组织匀浆离心5min(3500转/分),分别取上清液3.0ml放入比色杯中(稀释)如果液体太浓,可用蒸馏水按比例稀释,得到的光密度值乘以稀释倍数即实际光密度值。第8页/共13页实验步骤5用分光光度计在222nm波长下以对照鼠样品管作空白管,测定各用药样品管的光密度值,代入到公式换算出血药浓度(μg/ml)和组织药物浓度(μg/g)。
血药浓度(μg/ml)=样品管浓度×稀释倍数(10)组织内浓度(μg/g)=样品管浓度×稀释倍数(10)第9页/共13页实验后处理利用计算机绘制给药后血液和肝脏组织中的药物分布图。第10页/共13页注意事项取血:每次的取血量要准确血样加至无水乙醇试管应该立即摇匀匀浆:匀浆器上的数字应对应组织匀浆后应立即离心匀浆器应清洗干净离心:离心前一定要用水配平,离心管不要弄混离心后将转速和时间归零
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