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3.3胚胎工程的应用及前景日本神户牛肉(雪花牛肉)这就是和牛(又称日本神户牛),是当今世界公认的品质最优秀的良种肉牛,国内市场每公斤能售出2000多元人民币的天价。如何将这种优质的牛进行快速、大量的繁殖呢?1.掌握胚胎移植的生理学基础、基本程序和应用,胚胎移植的重要地位和作用。2.掌握胚胎干细胞的概念和分离途径及研究意义。胚胎移植1.概念:将雌性动物的早期胚胎,或通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。胚胎移植供体:在胚胎移植中提供胚胎的个体。主要职能为:只产生具有优良遗传特性的胚胎。受体:在胚胎移植中接受胚胎的个体。主要职能为:繁重而漫长的妊娠和育仔。2、胚胎移植的现状及意义1)现状:我国部分地区已进入生产应用阶段2)意义:A、充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力B、加速育种工作和品种改良C、大量节省购买种畜的费用D、人为生产双胎或多胎E、保存品种资源和濒危物种3、胚胎移植的生理学基础(1)同种动物的供体与受体在排卵后具有相同的生理环境。(2)早期胚胎的游离状态为胚胎收集提供了可能。(3)受体对外来胚胎不发生免疫排斥反应。(4)胚胎在受体中孕育遗传特性不变优良供体超数排卵发情配种收集胚胎受体母牛正常繁殖或两三个月后做另一次移植同期发情发情胚胎移植妊娠有价值的后裔优良公牛什么方法?促性腺激素怎样做到?注射相关激素同步发情:又称同期发情,利用某些激素制剂人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程,使之在预定时间内集中发情。优良供体超数排卵发情配种收集胚胎受体母牛正常繁殖或两三个月后做另一次移植同期发情发情胚胎移植妊娠有价值的后裔优良公牛用具有什么特点的牛作为供体牛?遗传性能和生产性能优秀的个体用具有什么特点的牛作为受体牛?健康并能正常繁殖的个体如何收集?在配种或输精后第7天,用特制的冲卵装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来。母牛非手术冲卵示意图冲卵后,对胚胎进行质量检查。这时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。将收集的胚胎直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存液氮罐方法一:手术法具体做法:引出受体子宫和卵巢,将胚胎注入子宫角,缝合创口。方法二:非手术法将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应部位,注入胚胎。对受体母牛进行是否妊娠的检查受体母牛产下胚胎移植的犊牛供体后代还是受体后代?胚胎分割1.概念:采用机械方法(显微手术)将早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,经体内或体外培养后植入受体,以得到同卵双胎或同卵多胎的技术。2.特点:后代具有相同的遗传物质,因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。3、理论基础动物胚胎细胞的全能性。所以胚胎分割的时期为:囊胚或桑椹胚。为什么选择这样的胚胎发育时期?成倍增加胚胎数量4、选择的胚胎:发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。5、使用的主要仪器:实体显微镜和显微操作仪。6、具体操作用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的空透明带中,或直接将裸半胚移植给受体。7、操作注意事项:①对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要将内细胞团均等分割。少部分发育受阻或发育不良,甚至不能发育等问题。②胚胎分割的份数越多,操作的难度会越大,移植的成功率也越低。受精卵卵裂
早期胚胎胚胎分割基本过程植入植入代孕母牛分割胚胎干细胞1.概念:简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。全能细胞囊胚胎儿内细胞团细胞生殖腺细胞受精胚胎干细胞分离培养分离内细胞团胰蛋白酶处理转入培养皿中培养不加饲养层细胞培养细胞分化饲养层的细胞一般是胚胎成纤维细胞,因为胚胎成纤维细胞可以分泌一些能抑制细胞分化的物质,满足促进干细胞生长的同时抑制干细胞分化的条件。EK细胞ES细胞2.特点:1)形态:体积小,细胞核大,核仁明显。2)功能:具有发育的全能性。可分化为成年动物体内任何一种组织细胞,体外培养可增殖不分化。3)对体外培养的胚胎干细胞可以进行冷冻保存,也可以进行遗传改造。1)治疗人类的某些顽症。2)培育出人造组织器官,用于器官移植。3)ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。3.主要用途1.下列有关动物胚胎移植叙述中,错误是()A.受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植B.受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态C.超数排卵技术要使用一定的激素D.试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行A2.下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是()A.供体母牛必须是同一物种的良种B.受体母牛必须是同一物种的良种C.供体公牛必须是同一物种的良种D
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