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第第10页第五章血型和输血抗原抗体系统的遗传特征。血型争论的应用:治疗输血、器官移植、骨髓移植、法医鉴定、考古争论等。第一节AB0本节考点:ABOABOABO穿插配血法ABOABO〔一〕AB02352血型系统指由一个或数个基因所编码的数个相关联抗原的组成。目前,国际输血协会对红细胞血型系统的命26001001AB0ARH1RhDAB0AB0抗原的遗传:AB0血型系统的产生及定位:由3个分别位点的基因所掌握,即AB0、Hh、Sese基因。基因Hh和Sese严密相连在第9对染色体上。现在一般承受“三复等位基因”学说:认为在打算AB0血型遗传的基因座上,有A、B、OAB0934AB对于0基因而言为显性基因,0基由于隐性基因。父母双方如各遗传给子代一个基因.则可组成6个基因型;O0、AA、A0、BB、BO、AB;4A、B、O、AB。ABHA、B1820%。此外,ABH血型特异物质存在于唾液〔含量最丰富〕、尿、泪液、胃液、胆汁、羊水、血清、精液、汗液、乳汁等体液中,但不存在于脑脊液。这些可溶性抗原又被称为“血型物质”。凡体液中有血型物质者为分泌型〔可以中和或抑制抗体与具有相应抗原的红细胞发生凝集〕,无血型物质者为非分泌型。AB0AB0AB0自然抗体与免疫性抗体:自然抗体是在没有可觉察的抗原刺激下而产生的抗体,以IgM为主,又称完全抗体或盐水抗体;也可能是由一种无觉察的免疫刺激产生而得。免疫性抗体:有IgM、IgG、IgA,但主要IgGABIgMIgG,IgM、IgG、IgA的混合物,但主要是IgM,0IgG自然抗体和免疫抗体的主要区分;见表1-5-1。A、B:OABA、BAB细胞都能凝集,但当用A或B型红细胞分别吸取时,不能将其分为特异的抗A和抗B。它与两种红细胞反响的活性不能通过特异吸取来分别。即使用A和B型红细胞反复吸取,它仍保持与A和B型红细胞都发生反响ABABOABAB〔二〕AB0亚型是指属同一血型抗原,但抗原构造和性能或抗原位点数有肯定差异。AB0血型系统中以A亚型最多见,AA和AA99.9%,A〔AAA〕AB01 2 3 X MOAB〔BBB〕A

亚型根本特征

3 M X1 2AAAB;A1 1

亚型的红细胞上只有A抗原,其血清中

抗体。在直接凝集反响中,AAAAA1 1 2 1 2AA亚型,在B0AA1 2 1BA试剂。12.AA亚型的鉴定方法1

2AA

血清,方法是:①可从BA

试剂,B型血清有抗A、抗A,其中1 l 2 1 1AAAAA,就只剩下抗AAA亚型,凡与抗Al 2 1 1 2 1ABABAAAB

1亚型鉴定的意义

1 1 2 21 2AABAAB1%,A2 2O0AOO者的抗A抗体就可能与输入的弱A亚型的红细胞起反响,引起血管内溶血性输血反响。因此,应避开将弱的A亚型定为0,如:AxB〔A〕00ABAAB00〔内含抗ABAB〕,Ax0。1.原理常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的状况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞消灭凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。ABO1-5-2。鉴定方法效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法:由于离心作用可加速凝集反响,故反响时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触严密,促进凝集作用,适于急诊检查。红细胞亚型抗原性弱,如抗A抗B标准血清效价低时,易造成漏检或误定。如加用0型〔抗A、B〕血清和反向定型,可避开此类错误。玻片法凝集结果推断:红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱推断标准:①呈一片或几片凝块,仅有少数单个游离红细胞为〔++++〕。②呈数个大颗粒状凝块,有少数单个1/2〔++〕。④肉眼5~8〔+〕。⑤可见数个红细胞凝集在一起,四周有很多的游离红细胞〔±〕。⑥可见极少数红细胞凝集,而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。⑦镜下未见细胞凝集,红细胞均匀分布为〔-〕。单克隆抗体,参加试剂、标本,用专用离心机离心后可直接用肉眼观看结果或用血型仪分析。此法操作标准化,定量加样,确保结果准确性。ABAB准血清均采自安康人,并应符合下述条件:①特异性:只能与相应的红细胞抗原发生凝集,无非特异性AAB1 2 2发生反响开头消灭凝集的时间分别是15s、30s和45s;抗B对B型红细胞开头消灭凝集的时间为15s。凝集1mm21:44.血型鉴定操作时留意事项一般留意事项:①所用器材必需枯燥清洁、防止溶血,凝集和溶血的意义一样。为避开穿插污染,建议使用一次材。标准血清从冰箱取出后,应待其平衡至室温后再用,用毕后应尽快放回冰箱保存。②加试剂挨次:一般先加血清,然后再加红细胞悬液,以便核实是否漏加血清。③虽然IgM抗A和抗B与相应红细胞的反响温度以4℃最强,但为了防止冷凝集现象干扰,一般在室温20℃~24℃内进展试验,而37℃条件,可使反响减弱。④幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱,最好承受试管法鉴定血型。⑤玻片10min,否则较弱凝集不能消灭,造成假阴性。⑥正、反定型结果全都才可发报告。⑦反定型法:先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制,血型抗体可减弱或消逝;血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白特别均可造成反定型困难;生儿体内可存在母亲输送的血型抗体,且自身血型抗体效价又低,因而诞生6个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水A〔或〕B〔四〕穿插配血法最重要的是AB0血型协作。必需在AB0血型一样,且穿插配血无凝集时才能输血。1.目的:检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的状况。原则:主侧加受血者血清与供血者红细胞;次侧加受血者红细胞与供血者血清,观看两者是否消灭凝集。方法盐水配血法:简便快速。主要缺点是只能检出不相协作的完全抗体,而不能检出不完全抗体。白法配血法是最早用于检查不完全抗体的方法。Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。本法虽较灵敏,但也有肯定限度,且操作简单,不利于急诊检查和血库的大批量工作。C3IgG3:IgGD5%RhD5%红细胞生理盐水悬液。留意事项:①标本采集后应马上进展试验,延迟试验或中途停顿可使抗体从细胞上丧失。②抗人球蛋白血清应按说明书最适稀释度使用,否则可产生前带或后带现象而误为阴性结果。③阴性比照凝集:可能是抗人球蛋白血清处理不当,仍有残存的种属抗体,或被细菌污染,应更换血清重做试验。核实阴性结果方法:在该试管中加1滴IgG致敏红细胞,如结果为阳性,则表示试管内的抗球蛋白血清未被消耗,阴性结果牢靠。DIgGIgMC3聚凝胺法配血法:可以检出IgM与IgG两种性质的抗体,能觉察可引起溶血性输血反响的几乎全部规章与不规章抗体,故本法已渐渐推广使用。配血原理:聚凝胶分子是带有高价阳离子多聚季镀盐,溶解后Zeta位,可进一步增加抗原抗体间的吸引力。当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时,与红细胞发生严密结合,此时参加枸橼酸盐解聚液以消退聚凝胶的正电荷,使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生凝集不会散开。如IgMIgG〔板〕凝胶抗球蛋白试验,此法在凝胶中进展,保持了传统抗球蛋白试验的准确、具有简便、牢靠的特点,全自动血型进展穿插配血,也是利用凝胶配血。其他可检出不完全抗体的方法有蛋白酶法、胶体介质法等。4.质量掌握的血液。选用方法:用试管法做穿插配血。溶血现象:配血管消灭溶血现象,为配血不合。1.分型血清方面的缘由自制分型血清抗体:效价太低、亲和力不强,造成定型不准确。。生儿脐血中含有华顿胶或操作中使用了质量差的玻璃管〔瓶〕,误认其脱下的胶状硅酸盐为串钱状凝集。患者输入了高分子血浆代用品或静脉注射造影剂等药物:可引起红细胞聚拢,易误认为凝集。血清中可能存在的不规章抗体:如A

ABAA

红细胞。此外还有2 2 1 1抗Ⅰ抗体等。有些癌症患者〔如胃癌、胰腺癌等〕血中含有大量可溶性A或B物质,这些物质可中和抗血清的抗体,从而抑制反响。造成假性不凝集。抑制的方法是红细胞先洗涤后再试验。婴儿尚未产生自己的抗体或有从母亲获得的血型抗体:生儿不宜用血清作反定型。及有些用了免疫抑制剂的患者,由于免疫球蛋白下降,血型抗体也下降甚至缺如。可消灭反向定型错误。红细胞方面的缘由用近期内输过血的患者血液做比照红细胞:此时,患者血液红细胞为混合型细胞。于高浓度蛋白的介质中,红细胞都会自发地发生凝集。红细胞膜有遗传性或获得性特别。〔假阴性〕,BAN-ABABAB较青壮年为弱。不再与红细胞抗原起反响。TTIgM98%O型红细胞,2%BA操作方面的缘由:是最常见缘由。操作器材:玻璃器皿不洁或使用了严峻污染的血清、红细胞,可消灭假阳性。试管污染洗涤剂会造成假阴性。红细胞与血清比例和离心:红细胞与血清比例不当、过度离心或离心缺乏可引起假阳性或假阴性。溶血现象:误认为溶血现象为阴性结果。试验温度:温度过高会造成假阴性。AB0血型系统的IgM抗体最适温度为4℃~22℃,如达37℃凝集力即下降。冠李戴最易造成错误。〔六〕AB0输血:是治疗与抢救生命的重要措施。输血前必需检查血型,选择血型一样的供血者,进展穿插配血,结果完全相合才能输血。生儿溶血病:母婴AB0血型不合引起的生儿溶血病〔常为第1胎溶血〕,主要依靠血型血清学检查作出诊断。器官移植:受者与供者必需AB0血型相符才能移植其次节Rh本节考点:RhRh的抗原与抗体Rh系统血型鉴定穿插配血法质量掌握RhRhAB0〔一〕Rh起源:1940,LandsteinerWiener85%白种人RhLevineLevineRh至今。因此,把LandsteinerLW体,而不用免疫动物得到的抗体。RhFisher-Race、Wiener、Rosenfield3Fish-er-Race1,Rh3每一位点有一对等位基因〔Dd,Cc、Ee〕,338CDe、cDE、cDe、CDE、Cde、cdE、cdeCdE,836种遗传型。RhC、D、E、c、d、e,虽从未觉察过dd“d”,符号,以相对于D。因此,Rh5518RhDRhRhDRhDcde/cde。1.RhRh40Rh5D、E、C、c、e5D性最强,对临床更为重要。DU〔D〕:DDUDRhDURhDDURhDU型受血者归入RhDUDDCcEeD2.RhCWRhIgG,IgMDAB0DDDRhDEc多见。抗CwRh〔三〕RhRhDCcEeRhC、c、抗E、抗eRhIgG,不能在盐水介质中与红细胞发生凝集,因此必需承受以下几种鉴定方法:低离子强度盐水试验:可提高抗D抗体与D阳性红细胞结合率,并提高其灵敏度。酶介质法IgGIgM,故有利于检出不完全抗体。阴性红细胞生理盐水悬液。留意事项:①Rh血型系统的抗体多由获得性免疫产生,血清中很少有自然抗体,故不需要做反定酶活性过强消灭假阳性结果,因而要设立阴性比照,以排解假阳性。只有在阳性比照管消灭凝集而阴性比照管不凝集的状况下,才说明被检管的结果是牢靠的。③结果阴性:说明被检红细胞上无相应抗原,但由于DUDU的可能。〔四〕穿插配血法选用酶介质法、抗球蛋白法或聚凝胺法等。〔五〕质量掌握严格设定试剂和抗原阳性和阴性比照系统。严格掌握反响条件:试验介质、浓度、温度、离心、反响时间等条件。受检者红细胞必需洗涤干净,以免血清蛋白中和抗球蛋白,消灭假阴性。〔六〕RhRh〔DRh2~53受血者或孕妇血浆中含有Rh〔2〕。Rh第三节生儿溶血病检查本节考点:生儿溶血病的发病机制与临床表现生儿溶血病试验室检查及诊断依据生儿溶血病的发病机制与临床表现1.发病机制生儿溶血病〔HDN〕主要缘由为母婴血型不合,孕母体内IgG类血型抗体通过胎盘进入胎儿体内,胎儿红细胞被母亲的同种抗体包被,这种抗体是针对胎儿红细胞上父源性的抗原。被包被的红细胞在分娩前后加速破坏,发生溶血,造成胎儿发生以溶血为主要损害的一种被动免疫性疾病。2.临床表现180~220g/L,l80g/L,甚255μmol/L~340μmol/L,超器官组织缺氧,导致代偿性肝脾肿大。④组织水肿。⑤肌张力减低,各器官功能障碍等。A、B,DDRh其他抗体、AB0〔二〕生儿溶血病试验室检查及诊断依据疗试验室诊断都是格外重要的。1.确诊患婴的依据本试验为直接证据。从红细胞上释放了具有血型特异性的抗体:①用热释放法检查AB0A,抗B,抗A、BAB0RhDCE2.关心诊断依据/L〔60mg/L〕,且以未结合胆红素为主。3.产前试验HDNAB0RhDIgGIgM,并应进一步做抗体鉴定分析,以确定是否会引起HDN。由于抗体的存在并HDN。450nm第四节自动化血型本节考点:原理主要用途检测特点质量掌握〔一〕原理中,未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部。通过微柱间的缝隙到达微柱的底部。〔二〕主要用途AB0Rh〔三〕检测特点清楚、易于保存。④数据可电脑治理。〔四〕质量掌握标本:应准时检测,否则应贮存于2℃~8℃,并在规定的时间内检测。标本溶血消灭假阴性。标本存在纤维蛋白或凝块、蛋白量特别或有自身抗体消灭假阳性。试剂:应保存于2℃~25℃,不能冷冻。微柱裂开和产生气泡消灭假阳性。操作:器材污染可消灭假阳性。加样必需准确,使用3%~5%红细胞悬液。第五节人类白细胞抗原检查本节考点:HLAHLAHLA胞抗原〔HLA〕。〔一〕HLA编码,这些基因称为组织相容性复合物〔MHC〕,也称为HLA664HLA-A,HLA-B,HLA-CHLA-D。HLA-DHLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP亚区。HLA-A、HLA-B、HLA-C基因编码的抗原称Ⅰ类抗原。HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP基因编码的抗原称Ⅱ类抗原。HLAHLA关疾病及人类遗传学的争论,也有助于提高成分输血的疗效及防止输血反响。HLAIgGIgM。〔二〕HLAHLAHLA〔>20%为阳性反响。TB混合淋巴细胞培育试验:多用于组织相容性方面的争论,临床上主要用于器官移植。分子生物学技术:一类是PCR为根底的基因分型,一类是以测序为根底的基因分型。〔三〕HLA器官移植:HLADRDRDRAB0输血:成分输血疗法时,如HLAHLA体引起,尤其是屡次输血的患者,HLAHLA70%HLA物质所致。可先将白细胞过滤后再输血。HLA义。91%B27B276.6%HLA第六节血小板血型系统检查本节考点:血小板抗原血小板抗体检测方法临床意义〔一〕血小板抗原2AB0HLA510〕、HPA-3、HPA-4、HPA-5。〔二〕血小板抗体IgGIgG〔三〕检测方法主要有:血清学法,操作简洁,重复性和特异性较高。分子生物学法,常用PCR技术。〔四〕临床意义提高血小板输注疗效:选择与患者血小板和HLA相配的供血者,可提高输注浓缩血小板效果。诊断生儿同种免疫血小板削减性紫癜。诊断原发性血小板削减性紫癜。第七节血液保存液本节考点:血液保存液的主要成分与作用贮存温度和时间血液保存液的主要成分与作用1.血液保存液常用种类配方可分为:ACD〔A,枸橼酸;C,枸橼酸三钠;D,葡萄糖〕CPD〔C,枸橼酸三钠;P,磷酸〕CPDCPDA-1。2.血液保存液主要成分阻挡溶血的发生。枸橼酸:避开保存液中的葡萄糖在消毒中焦化。机磷的消逝,防止红细胞储存损伤。腺嘌呤:可促进红细胞ATP合成,延长红细胞的保存期〔达35天〕,并增加红细胞放氧功能。ACDpH21天,且放氧力量快速下降。CPD〔二〕贮存温度和时间血液制品的保存温度和时间见表1-5-3。表1-5-3 贮存温度和时间第八节输血与输血反响本节考点:输血适应证、输血种类与选择输血不良反响输血传播性疾病及预防血,以利于安全和经济。〔一〕输血适应证、输血种类与选择输血适应证主要有:①出血;②严峻贫血;③低蛋白血症;④严峻感染;⑤凝血障碍。输血种类与选择4±2℃的全血。5ACD全血或10CPD112h内的全血。〔手术、创伤等〕血病换血。人,特别是老人或儿童,易引起循环超负荷。目前,全血输注已渐渐削减,而代之以成分输血。血引起各种不良的抗原抗体的免疫反响。③合理用血液成分:将全血分别制成不同的细胞及血浆蛋白成分,供不同目的应用。④经济:既可节约贵重的血液,又可减低患者的医疗费用。成分输血主要种类涤红细胞。⑥其他:冰冻红细胞、年青红细胞、照耀红细胞等。主要用于需要输注红细胞的患者,适用于:①任何缘由的慢性贫血均可输注浓缩红细胞,因对血容量影响较少而不会引起心功能不全或肺水肿。②急性复发热的非溶血性输血反响时,可输少白细胞的红细胞。:当患者白细胞少于0.5×109/L、有严峻细菌感染而经抗生素治疗24~48h无效时。②用于预防:当治疗白血病或骨髓移植后引起粒细胞缺乏症时,输白细胞可能减低合并严峻感染的危急,但引起副作用的弊病可能更大。③生儿败血症,可明显减低其死亡率。输粒细胞时必需用与患者AB0Rh同型的血液,假设HLA血型相配则更为有益。病等。造血干细胞用于自体骨髓移植、肿瘤化疗后等。削减:一般血小板数<20×109/L

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