银杏叶总黄酮对糖尿病大鼠的降糖作用研究

银杏叶总黄酮对糖尿病大鼠的降糖作用研究2020年8月1日《亚太传统医药》2020年第8期摘要：目的：考察银杏叶总黄酮对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病大鼠的医治作用。方式:采纳注射高剂量链脲佐菌素成立大鼠1型糖尿病模型，给予银杏叶总黄酮医治，观看总黄酮对糖尿病大鼠血糖和血脂的改善作用及对与葡萄糖吸收相关酶Akt活性的阻碍。结果：银杏叶总黄酮可降低糖尿病大鼠的血糖，对糖尿病大鼠的血脂代谢有显著的改善作用，与模型组比较，HDL明显升高(p〈，而甘油三酯、胆固醇、LDL显著降低(p〈，增加Akt的酶活性。结论：银杏叶总黄酮有改善糖尿病大鼠血糖和血脂的作用。关键词：银杏叶总黄酮；糖尿病；血糖；血脂中图分类号：文献标识码：A文章编号：1673-2197(2020)07-000-00糖尿病是一种常见的代谢内分泌病，高血糖是其重要特性。随着世界人口的老龄化，糖尿病已成为一种常见病、多发病，而且发病率呈上升趋势。由于高血糖引发糖代谢紊乱，继发引发脂肪、蛋白质代谢障碍，并由此致使心血管病变、肾功能衰竭、视网膜病变和神经系统障碍性病变，严峻阻碍患者的生活质量［1］。因此研究和开发防治糖尿病及其并发症的药物日趋受到人们的重视。最近几年来，中草药的开发在医治糖尿病及其并发症的研究中已取得了超级大的进展，分离出许多药效成效良好的活性成份［2］。银杏为银杏科植物，银杏叶中富含黄酮类化合物与银杏内酯，其提取物是一类作用普遍、不良反映较少的天然药物来源。大量研究证明黄酮类化合物具有调剂血脂、清除自由基及爱惜心肌和血管内皮细胞等功能［3,4］；有研究说明银杏叶提取物对小鼠胰岛B细胞有爱惜功能［5,6］。本研究旨在探讨银杏叶总黄酮对STZ致糖尿病大鼠的医治作用。1材料与方式实验材料雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(南京青龙山动物中心)，体重200±20g；银杏叶总黄酮、二甲双胍(南京市青泽医药科技)；STZ(Sigma)；血糖试、甘油、胆固醇三酯剂盒(长春迪瑞实业)；其他试剂均为国产分析纯。糖尿病大鼠模型的成立取健康雄性SD80只，随机分出10只为正常组，其余大鼠在禁食6h后，尾静脉注射新配制的STZ(60mg/Kg)，正常组在禁食6h后，于尾静脉注射等体积生理盐水，自由饮食3d后，再禁食8h,尾静脉取血测定血糖值。银杏叶总黄酮对糖尿病大鼠的医治取空肚血糖值(fastingbloodglucose，FBG)大于L的大鼠为实验组，随机分为五组，即模型组，阳性药(二甲双胍，500mg/Kg)对照组，按银杏叶总黄酮低(125mg/Kg)、中(250mg/Kg)、高剂量(500mg)分成3组，每组8只。给药组和阳性药对照组别离通过灌胃给予银杏叶总黄酮及二甲双胍，天天1次，持续给药15d,正常组和模型组灌胃给予等体积的生理盐水。实验终止，禁食12h，各组动脉插管取血测定血糖、血脂。血糖和血脂的测定按试剂盒说明书要求别离测定大鼠血糖及血清血脂含量。Akt活性检测取肝脏组织，加入5mL预冷的裂解缓冲液(20mmol/LTris-HCl，150mmol/LNaCl,1mmol/LEDTA,1mmol/LEGDA,1mmol/L原矶酸钠，1mmol/LPMSF,1%TritonXT00,L焦磷酸钠，10ug/mL亮肽素、抑肽酶和大豆胰蛋白酶抑制剂，40mmol/LB-甘油磷酸)，于冰水上匀浆裂解，吸取裂解液，4°C,12000g离心20min。上清液以避免疫印迹实验检测Akt活性。统计学处置实验数据以土s表示，组间数据比较采纳t查验。2结果总黄酮对STZ所致糖尿病大鼠血糖的阻碍与正常组比较，STZ致糖尿病大鼠（模型组及灌胃前的阳性药和给药组）的血糖值显著升高，不同有统计学意义（P〈，表1）,说明STZ诱导大鼠致糖尿病模型成功；糖尿病大鼠经不同银杏叶总黄酮及二甲双胍医治后，各剂量组及阳性药组大鼠的的血糖水平较模型组明显降低（p<,提示银杏叶总黄酮对STZ致糖尿病大鼠有明显的降血糖作用（表1所示）。总黄酮对STZ所致糖尿病大鼠血脂的阻碍与正常组比较，STZ致糖尿病大鼠血清甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）、LDL显著提高，而HDL显著降低（p<，说明银杏叶总黄酮对STZ糖尿病大鼠血脂代谢有较好的改善作用（表2所示）。总黄酮对Akt酶活性的阻碍丝氨酸/苏氨酸激酶Akt是糖转运进程中重要的酶，被激活后，进一步伐剂下游酶的活性，增进葡萄糖吸收、GLUT4的移位及糖原的合成。因此蛇毒蛋白可否激活Akt的酶活性对糖吸收、转运及糖原的合成都具有超级重要的作用。ControlMETTF图1银杏叶总黄酮对Akt活性的阻碍与对照组比较，黄酮组及二甲双胍组磷酸化的Akt均明显提高，即Akt的酶活性有显著的提高（图1所示）。3讨论黄酮类物质作为银杏叶活性成份中的重要组分，具有调剂血脂、排除自由基、抗氧化、抗病毒等广谱的生理活性。研究说明自由基代谢参与了糖尿病的发生和进展进程，自由基的代谢调剂，有助于对糖尿病血糖的改善［7，8］，因此推测银杏叶总黄酮可能具有降血糖的功效，并对糖尿病血脂具有调剂作用。本研究对银杏叶总黄酮对STZ致糖尿病大鼠的血糖及血脂的作用进行了初步的研究。本实验的研究结果说明，银杏叶总黄酮可提高Akt的磷酸化程度，Akt是调剂葡萄糖吸收进程中的重要的酶，Akt经磷酸化而被激活，激活的Akt增加细胞内GLUT1的表达水平，并可增进GLUT4从细胞质移位到细胞膜上，进而增进葡萄糖的转运和吸收，与本研究中银杏叶总黄酮可降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖相一致，并对糖尿病大鼠的血脂具有必然的改善作用。糖尿病是全世界发病率最高的疾病之一，严峻危害着人类的健康，因此糖尿病医治药物的研究与开发具有重要的意义。本研究说明，银杏叶总黄酮对血糖和血脂具有较好的调剂作用，其详细的作用机制，尚待进一步研究。参考文献：SandalMaleate/Meforminnewformulationtherapyfortype2diabetes[J].DrugsofToday，2004，40(7)：633~643.刘霞，冯长根•酶抑制剂在抗糖尿病药物中的应用研究[J].中国药学杂志，2003,38(2)：89~91.ChangWC，SeiCK，SoonS，etactivityandfreeradicalscavengingcapacitybetweenKoreanmedicalplantsandflavonoidsbyassay-guidedcomparison[J].PlantScience，2002，163(8)：1161~1165.戴伟，陈学智，王小莉，等.银杏叶提取物及银杏黄酮调剂大鼠血脂的成效研究[J].上海预防医学杂志，2003，15(6)：262~264.VasseurM，JeanT，DeFeudisFV，ofrepeatedtreatmentswithanextractofGinkgobiloba(Egb761)，bilobalideandginkgolideBontheelectricalactivityofpancreaticbetacellsofnormaloralloxan-diabeticmice：anexvivostudywithintracellularmicroelecrodes[J].GenPharmacol，1994，25(1)：31~37.PunktK，AdamsV，LinkeA，etcorrelationofcytophotomericallyandbiochemicallymeasuredenzymeactivities，changesinthemyocardiumofdiabeticandhypoxicdiabetesrats，withandwithoutGinkgobilobaextracttreatment[J].ActaHistochem，199