第5章黄酮类化合物

第五章黄酮类化合物主讲：陈欲云

*2第一节概述第二节黄酮类化合物的理化性质及显色反应第三节黄酮类化合物的提取和分离第四节黄酮类化合物的检识与结构鉴定*3（一）基本结构

1952年以前，黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮的一系列化合物。色原酮2-苯基色原酮（黄酮）一、基本结构和分类第一节概述*4现在的黄酮类化合物则泛指两个苯环（A与B环）通过中央三碳链相互连接而成的一类化合物。

C6-C3-C6第一节概述BA*5

黄酮类化合物的苷元的结构类型根据三碳链氧化程度、B环（苯基）连接位置（2-位或3-位）以及三碳链是否构成环状分为下列类型：第一节概述*6１．黄酮类（flavones）

木犀草素（luteolin），存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，具有抗菌作用。luteolin第一节概述*7luteolin第一节概述*8

黄芩为清热解毒类中药，抗菌成分主要有黄芩苷(baicalin)、次黄芩素(wogonin)等。第一节概述*9第一节概述*10２．黄酮醇类（flavonols）

槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用。芦丁(rutin)是槲皮素的３－O芸香糖苷。用于治疗毛细管脆弱引起的出血病，并用作高血压的辅助治疗剂。quercetinrutin第一节概述*11

豆科植物槐米中含有芦丁和槲皮素。第一节概述*12３．二氢黄酮类(flavanones)

橙皮苷（hesperidin），具有Vp样作用第一节概述*13甘草苷（liquiritin）具有溃疡抑制作用第一节概述*14

柚皮素（Naringenin）：来源于芸香科植物柚(CitrusparadisiMacfadyen)的果实；分子式C15H12O；分子量272.25

结构式：

第一节概述*154．二氢黄酮醇类(flavanonols)

水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成的黄酮木脂素类成分。具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎及肝硬化，代谢中毒性肝损伤。水飞蓟素（silybin）第一节概述*165．查尔酮类（chalcones）

查尔酮为苯甲醛缩苯乙酮类化合物，其邻羟基衍生物可视为二氢黄酮的异构体，二者可相互转化。查耳酮第一节概述*17

二氢黄酮的吡酮环芳香性低，在碱的作用下易开环生成6’-羟基查耳酮，由无色转为深黄色，后者经酸化又能转化为原来的二氢黄酮。邻羟基查耳酮二氢黄酮第一节概述*18

红花所含的色素红花苷是第一个发现的查耳酮类植物成分。

红花在开花初期，花冠呈淡黄色；开花中期，花冠呈深黄色；开花后期或采收干燥过程中由于酶的作用，氧化成红色。第一节概述*19菊科植物红花。第一节概述*206．异黄酮类(isoflavones)

主要存在于豆科、鸢尾科等植物中。如葛根主要含有下列几种异黄酮类成分。葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解高血压患者的头痛等症状第一节概述*21豆科植物葛。第一节概述*227．二氢异黄酮类

第一节概述*238．双黄酮类

由二分子黄酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。银杏中含有多种双黄酮，如银杏素。银杏黄酮（ginkgetin）第一节概述*24银杏科植物银杏*259．花色苷类(anthocyanidins)

是使花、叶、果、茎等呈现蓝、紫、红等颜色的色素。以苷的形式存在于细胞液中，经水解可生成苷元——花色素及糖。第一节概述*2610．黄烷-3-醇(flavan-3-ols)及黄烷-3，4-二醇(flavan-3,4-diols)类

第一节概述*2711．苯骈色酮(xanthanes)

石韦中的异芒果素具有止咳祛痰的功效。

第一节概述*28

水龙骨科植物石韦第一节概述*2912．橙酮类化合物硫磺菊素(sulphuretin)第一节概述*30二、黄酮类化合物的生物合成途径

第一节概述*31三、黄酮类化合物的生物活性

1.对心血管系统的作用

Vp样作用：芦丁、橙皮苷等有Vp样作用，能降低血管脆性及异常通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。扩冠作用：芦丁、槲皮素、葛根素、人工合成的力可定。降血脂及胆固醇：木樨草素第一节概述*32芦丁片

芦丁是从中国所独有的国槐的花蕾中提取的植物药，也称维生素P，具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心脑血管保护药，国内用于心脑血管药品制剂的主要成分，国外还大量用于食品添加剂和化妆品。鉴别：

(1)取本品的细粉少许，加氢氧化钠试液5mL，溶液显橘黄色。

(2)取本品的细粉少许，加乙醇15mL，微热使芦丁溶解，溶液分成二份：一份中加盐酸1mL与金属镁或金属锌数小粒，渐显红色；另一份中加三氯化铁试液1滴，显棕绿色。第一节概述*332.抗肝脏毒作用从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。（+）-儿茶素(catergen)也可抗肝脏毒作用，治疗脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝损伤。第一节概述*34水飞蓟第一节概述*35水飞蓟片

本品为菊科植物水飞蓟（紫花）[Silybummarianum(L)Gacntm的果实，经提取精制所得的淡黄色粉末，或结晶性粉末。无味、无臭、易溶于丙酮、模酸乙酯、乙醇及由醇、难溶于氯仿，不溶于水，主要化学成份为水飞蓟宾（Silybin)C25H22O10及其异物等黄酮类物质。

功能与主治：本品具有保肝及降血脂作用，用于治疗慢性肝炎，早期肝硬变、代谢中毒性肝损伤及高血脂症。

第一节概述*36

3.抗炎芦丁及其衍生物羟乙基芦丁、二氢槲皮素等具抗炎作用。

4.抗菌及抗病毒作用如木樨草素、黄芩苷、黄芩素

5.解痉作用异甘草素、大豆素：解除平滑肌痉挛；大豆苷、葛根素及葛根总黄酮可缓解高血压患者的头痛等症状；杜鹃素、川陈皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羟基芫花素：止咳祛痰。第一节概述*376.雌性激素样作用大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激素样作用，可能与它们与己烯雌酚结构类似。第一节概述*387.清除人体自由基作用

黄酮类化合物多具有酚羟基，易氧化成醌类而提供氢离子，故有显著的抗氧特点。

另外还有降血脂、血糖，抗动脉粥样硬化及抗癌抗突变等作用。第一节概述*398.抗肿瘤作用

抗癌新药Flavopiridol的发现与研Flavopiridol是一种源于植物（CDYSOXYLUMBINECTARIFERUM）的黄酮类化合物。目前正被用于十几项一期和二期的癌症临床试验。最近，不同的研究者证实其对艾滋病也有异于其他药物的疗效。它的早期发现得益于工业界对自然产物的研究兴趣。在从树皮中提取出纯化合物后，前HOECHST公司又进行了结构与人工合成的研究。由此建立了一系列同型物，包括Flavopiridol的专利。

第一节概述*40

在NIH大规模抗癌物筛选中，Flavopiridol脱颖而出，成为一种新的低毒性的研究药物。它的治癌机理被认为是作用于激酶，从而阻断细胞循环。这一解释间接地为CDK2-Flavopiridol的复合晶体结构所证实。跨学科外向的合作以及现代技术的应用是加速Flavopiridol和其他后续药物的研究与开发所不可缺少的。第一节概述*41第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

一、性状

1.多为结晶性固体，少为（如黄酮苷类）无定形粉末。

2.旋光性：游离苷元中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷、黄烷醇及双黄酮有旋光外，其余无旋光性。苷类由于结构中引入糖的分子，均有旋光性，且多为左旋。*42

3.颜色：①分子中是否存在交叉共轭体系②助色团的数目③取代基的位置有关。色原酮部分原本无色，但在2位引入苯环后，即形成交叉共轭体系，且通过电子的转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜色。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*43

黄酮、黄酮醇及苷类灰黄-黄色查耳酮黄-橙黄色二氢黄酮、二氢黄酮醇无色异黄酮微黄色其中，黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮等因分子中存在交叉共轭体系，在7,4’位引入-OH,OCH3等供电子基团则促进电子移位、重排，使化合物颜色加深。花色苷及其苷元的颜色随pH的不同而改变：呈现红（pH<7），紫（pH8.5）、兰（pH>8.5）第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*44二、溶解度1.游离苷元难溶或不溶于水，易溶于MeOH,EtOH,EtOAc,Et2O

黄酮、黄酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌紧密，分子间引力较大，更难溶于水。二氢黄酮、二氢黄酮醇是非平面型分子，分子排列不紧密，分子间引力降低，对水的溶解度较大。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*45

花色苷元（花青素）类虽系平面型分子，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，水溶度较大。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*46

黄酮苷元引入羟基越多，水溶性越强，羟基甲基化后，则增加在有机溶剂中的溶解度。如一般黄酮类化合物不溶于石油醚中，可与脂溶性杂质分开，但川陈皮素（5,6,7,8,3’,4’-六甲氧基黄酮）却可溶于石油醚。

第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*472.黄酮类化合物的羟基苷化后，水溶性相应增大，而在有机溶剂中的溶解度相应减小。黄酮苷一般易溶于H2O,MeOH,EtOH等，难溶或不溶于苯，氯仿等。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*48三、酸碱性

1.酸性黄酮类化合物多具有酚羟基而呈酸性，可溶于碱性水液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性强弱顺序：7,4’-二羟基>7,或4’羟基>一般酚羟基>5-羟基>3-羟基此性质可用于提取、分离及鉴定工作。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应

*492.碱性

-吡喃酮上的1-位氧原子上有未共用电子对，表性微弱的碱性，可与强无机酸如浓硫酸，盐酸生成yang盐，但极不稳定，加水即可分解。

黄酮类化合物溶于浓硫酸中生成的yang盐常表性特殊的颜色，可用于鉴别。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*50四、显色反应(一)还原反应

1.盐酸-镁粉（盐酸-锌粉）反应

黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类在盐酸-镁粉作用下，易被氢化还原，迅速生成红-紫红（个别有绿-兰色）。将样品溶于甲醇或乙醇，加少量镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2分钟内（必要时微热）即可出现颜色。多显橙红-紫红色，少数兰-紫色，B环有-OH或OCH3取代时，颜色随之加深，查耳酮、橙酮、儿茶素类则不反应。花色素及部分查耳酮、橙酮等在浓盐酸酸性条件下也会发生色变，故须先做一对照。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*512.四氢硼钠反应与二氢黄酮类化合物产生红-紫色。取样品10mg溶于甲醇，加NaBH410mg，再滴加1%浓盐酸或浓硫酸，呈红-紫色。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*52（二）金属盐类试剂的络合反应

黄酮类化合物分子结构中多有3-OH,4=O;5-OH,4=O;邻二酚羟基，常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐等试剂生成有色络合物。

1.铝盐

1%AlCl3或Al(NO3)3：生成络合物为黄色(max=415nm)，并有荧光。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*532.铅盐

1%PbAc2或碱式醋酸铅水液。生成黄-红色沉淀。醋酸铅可沉淀具有邻二酚羟基或兼有3-OH,4=O或5-OH,4=O者。碱式醋酸铅可沉淀具有一般酚类化合物。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*543.锆盐:2%氯氧化锆甲醇液第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*55

4.镁盐

醋酸镁甲醇液作显色剂，可在纸上进行。二氢黄酮（醇）类显天蓝色荧光，若具有C5-OH，色泽更明显。而黄酮、黄酮醇及异黄酮类则显黄-橙黄-褐色。

5.氯化锶(SrCl2)

使具有邻二酚羟基的黄酮显绿-棕色-黑色沉淀。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*56

6.氯化铁(FeCl3)

检查酚羟基。多数黄酮类化合物具有酚羟基，可产生正反应，生成绿、蓝、黑、紫等颜色。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*57（三）硼酸显色反应

条件：1具有下列结构（5-羟基黄酮，2’-羟基查耳酮）

2有无机酸或有机酸存在在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而无荧光。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*58（四）碱性试剂显色反应

日光及紫外光下，通过纸斑反应，观察样品用碱性试剂处理后的色变情况。

1.二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相应异构体——查耳酮类化合物，显橙-红色。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*59

2.黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，据此可与黄酮类区别。

3.黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或3,4’-二羟基取代时，在碱液中不安定，很快氧化，由黄色深红色绿棕色沉淀。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*60(五)与五氯化锑的反应

查耳酮的无水(!)CCl4溶液与五氯化锑作用生成红或紫红沉淀,黄酮、黄酮醇、二氢黄酮类显黄-橙黄色。

方法：

样品5-10mg溶于5ml无水CCl4中，加1ml2%的五氯化锑的CCl4溶液。反应必须无水，否则生成沉淀不稳定。第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应*61（六）Gibbs反应

检查5-OH对位未被取代的黄酮。将样品溶于吡啶中，加入Gibbs试剂显蓝或蓝绿色。Gibbs试剂:

甲液：0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亚胺的乙醇溶液。乙液：硼酸-氯化钾-氢氧化钾缓冲液(pH9.4)第二节

黄酮类化合物的理化性质及颜色反应练习1：

HCl-Mg反应

NaBH4反应

锆-枸橼酸反应SrCl2反应

硼酸+草酸反应

Molish反应

*62(＋)(－)黄色，加枸橼酸后褪色(＋)(＋)(＋)*63一、提取黄酮类化合物在花、液、果等组织中，多以苷的形式存在；在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在；根据化合物极性不同，溶解性不同，采用不同溶剂提取。第三节

黄酮类化合物的提取分离*641.苷元

多用CHCl3、Et2O、EtOAc等极性较小溶剂提取；对于多OCH3化的成分，用苯、石油醚提取；对于极性大的成分，如查耳酮、橙酮、双黄酮、羟基黄酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH;H2O(1;1)等溶剂提取。第三节

黄酮类化合物的提取分离*65

2.苷类水或热水提取，（多糖苷在热水中溶解度较大，在冷水中溶解度较小）；也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。

3.含羟基的苷或苷元，可用碱水提取。

4.提取花青素类可加入少量酸，但一般黄酮类化合物则应避免。第三节

黄酮类化合物的提取分离*66二、粗提物的精制处理

1．

溶剂萃取法去杂石油醚：除去叶绿素、胡罗卜素等脂溶性色素水溶醇沉：除去蛋白质、多糖、大分子水溶性物质逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚在萃取除杂的同时，可使不同极性或极性相差较大者分离，如极性不同的苷和苷元，极性苷元和非极性苷元。第三节

黄酮类化合物的提取分离*672．

碱水提酸沉淀法

适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取。注意事项：①酸碱度不宜过大②邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护③石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质第三节

黄酮类化合物的提取分离*683．

炭粉吸附法

适用于苷类的精制工作。植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，过滤得吸附苷的活性炭粉末。依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、15%酚/醇洗脱，分步收集、检查、合并。大部分苷类可用7%酚/水洗下，经减压浓缩至小体积，乙醚除酚，余下水层经减压浓缩得较纯黄酮苷。第三节

黄酮类化合物的提取分离*694．

离子交换法

用阳离子交换树脂从水提液中吸附黄酮类化合物，与不被吸附的杂质分离，再用甲醇将黄酮类化合物洗脱。

RSO3-H+ArOH（黄酮）无法交换，故实际上树脂仅起到吸附作用。第三节

黄酮类化合物的提取分离*70三、分离

1.极性大小不同，利用吸附或分配原理进行分离常用吸附剂有聚酰胺、硅胶、纤维素粉。１）聚酰胺层析：主要有聚己内酰胺型(Perlon)、六次甲基二胺已二酸盐(Nylon)型、聚乙烯吡咯烷酮(Polyclar)型三种。其原理是酰胺羰基与黄酮酚羟基形成氢键缔合而吸附，吸附能力与酚羟基多少、位置及氢键缔合力大小有关。第三节

黄酮类化合物的提取分离*71

各种溶剂在聚酰胺柱上洗脱能力由弱至强依次为：水，甲醇，丙酮，氢氧化钠水溶液，甲酰胺，二甲基甲酰胺，脲素水溶液。第三节

黄酮类化合物的提取分离*72黄酮类化合物从聚酰胺柱洗脱时有下列规律：①苷元相同，洗脱先后顺序一般为：三糖苷双糖苷单糖苷苷元②母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢羟基位置的影响：具有邻位羟基黄酮具有对位（或间位）羟基黄酮③不同类型的黄酮类化合物，先后流出顺序一般是：异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇④分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强，故查耳酮往往较相应的二氢黄酮难于洗脱。第三节

黄酮类化合物的提取分离*73２）硅胶层析

①对酚羟基多的黄酮类，如多羟基黄酮及其苷类，硅胶减活性使用②对酚羟基少的黄酮类，如甲基化、乙酰化黄酮及二氢黄酮、异黄酮，则无须减活性。第三节

黄酮类化合物的提取分离*742.利用分子大小不同，用葡聚糖凝胶分子筛分离

主要用两种型号的凝胶Sephadex-G型和Sephadex-LH20型分离游离黄酮主要是吸附作用，极性小大洗脱。分离黄酮苷类，主要是分子筛作用，分子大小洗脱。总的洗脱顺序：糖多的苷糖少的苷游离苷元（极性小大）常用洗脱剂：①碱性水溶液，含盐水溶液②醇及含水醇③含水丙酮，甲醇－氯仿

第三节

黄酮类化合物的提取分离*75３．利用酸性强弱，采用pH梯度萃取法

混合物溶于有机溶剂，依次用５％NaHCO3、５％Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取，相应的黄酮类化合物洗脱顺序：7,4’－二羟基7或4’羟基一般酚羟基５－羟基黄酮第三节

黄酮类化合物的提取分离*76４．根据分子中某些特定官能团进行分离

醋酸铅沉淀法硼酸络合法：根据具有邻二酚羟基的黄酮与硼酸络合，生成物易溶于水的性质与其它类型黄酮分离。通常在不与水混溶的有机溶剂如乙醚中，用硼酸液萃取，水相即为邻二酚羟基类黄酮。第三节

黄酮类化合物的提取分离*77

举例：从芹菜［ApiumgraveolensL.］种子中分离graveobiodideA及B

第三节

黄酮类化合物的提取分离*78*79目前主要采用的方法有：①与标准品或与文献对照PPC或TLC得到的Rf或hRf值（Rf100）②分析对比样品在甲醇溶液中及加入酸、碱或金属盐类试剂后得到的UV光谱③1H-NMR④13C-NMR⑤MS第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*80一、色谱在黄酮类鉴定中的作用

1.纸色谱(PPC)

苷类成分可采用双向展开，第一相展开采用醇性溶剂，如BAW系统（正丁醇：醋酸：水4：1：5上层）；第二相展开用水性溶剂，如氯仿：醋酸：水（3：6：1）苷元则多采用醇性溶剂。花色苷及其苷元，可用含盐酸或醋酸的溶剂。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*81第一次第二次纸色谱第一相展开剂：醇性溶剂BAW（4:1:5），分配作用Rf：苷元﹥单糖苷﹥双糖苷第二相展开剂：水性溶剂，2%HAc，吸附作用Rf：（1）苷元原点附近，苷﹥0.5，糖链越长，Rf越大（2）苷，黄酮（醇）查耳酮﹤二羟黄酮（醇）第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*82二、紫外光谱在黄酮类鉴定中的应用

可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有羟基。一般程序：

①测定样品在甲醇中的UV谱以了解母核类型；

②在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测UV谱和可见光谱以了解3，5，7，’，4’有无羟基及邻二酚羟基；

③苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上法测苷元的UV谱以了解糖的连接位置。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*83（一）黄酮类化合物在甲醇溶液中的紫外光谱

多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成：带I在300-400nm区间，由B环桂皮酰系统的电子跃迁所引起；第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*84

带II在240-285nm区间，由A环苯甲酰系统的电子跃迁所引起。

第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*85

带II(240-285nm)（苯甲酰系统）带I(300-400nm)桂皮酰系统类

型说

明

250-285304-350黄酮类

-OH越多，带I带II越红移

B环3’,4’有-OH基，带II为双峰（主峰伴肩峰）328-357黄酮醇类(3-OR)

352-385黄酮醇类(3-OH)

245-270270-295300-400异黄酮类二氢黄酮（醇）B环上有-OH,OCH3对带I影响不大

220-270340-390或340-390(Ia)300-320(Ib)查耳酮类查耳酮2’-OH使带I向红移影响大370-430(3-4个小峰)橙酮类

第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*862．加入诊断试剂后引起的位移及结构测定

第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*87加入试剂带II带I说明样品+MeOH250-285304-385两峰强度基本相同，具体位置与母核上电负性取代基(-OH,-OCH3)有关，-OH,-OCH3越多，越长移

+NaOMe或+NaOHA环有-OH，红移小，无意义40-60nm（不变或增强）50-60nm（下降）有4’-OH，无3-OH

有3-OH，无4’-OH有3,4’-OH或3,3’,4’-OH（衰减更快）

7-OH带I，II随加NaOMe时间延长，逐渐衰减

320-330nm有小峰+NaOAc(未熔溶)5-20有3-OH,4’OH也发生红移，但意义不大7-OH第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*88加入试剂带II带I说明+NaOAc/H3BO35-10

12-30有6,7-OH或7,8-OH(5,6-OH无)B环有邻二酚羟基

AlCl3/HCl

6050-6035-5517-200有3-OH有3,5-二OH有5-OH，无3-OH有6-OR无3-OH,5-OH或6-OR存在AlCl3光谱-AlCl3/HCl光谱

30-4050-650B环有邻二酚羟基A,B环皆有邻二酚羟基A,B环皆无邻二酚羟基第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*89说明：1）+NaOMe,OHOMe，红移另有有3,4’-OH或3,3’,4’-OH时，在NaOMe作用下易氧化破坏，故峰有衰减。

2）NaOAc为弱碱，仅使酸性较强者，如7,4’-OH解离。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*903）形成络合物的能力：黄酮醇3-OH>黄酮5-OH（二氢黄酮5-OH）>邻二酚羟基>二氢黄酮醇3-OH邻二酚羟基和二氢黄酮醇3-OH在酸性条件下不与AlCl3络合；但不在酸性条件下，五者皆与Al3+络合；形成络合物越稳定，红移越多。4）二者相减可检测邻二酚羟基。

第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*91芦丁带II带IMeOH259359NaOMe272410AlCl3275433AlCl3/HCl271402NaOAc271393NaOAc/H3BO3262387第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定黄酮醇或3-0-苷△Ⅰ=410-359=51，

4’-OH△Ⅰ=402-433=-31，B环有邻二OH△Ⅰ=402-359=43，有5-OH，无3-OH△Ⅱ=271-259=12，7-OH△Ⅰ=387-359=28，B环有邻二OH*92三、1H-NMR

常用溶剂：氘代氯仿（CDDl3），氘代二甲基亚砜（DMSO-d6），氘代吡啶（C5D5N）。也可将黄酮类化合物作成三甲基硅醚衍生物溶于四氯化碳中进行测定。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*93（一）A环质子

1．5，7-二OH黄酮第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*942．7-OH黄酮

H-5较H-6、H-8低场，是由于羰基的负屏蔽效应的影响。H-6、H-8较5,7-二OH黄酮低场，且相互位置可能颠倒。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*95（二）

B环质子δ6.5-8

1．4’-氧取代黄酮类化合物H-3’,5’6.5-7.1,d,J=8.5HzH-2’,6’7.1-8.1,d,J=8.5Hz由于C环对H-2’,6’的负屏蔽作用大于对H-3’,5’，且H-3’,5’受4’-OR的屏蔽作用，故前者较低场；C环氧化程度越高，H-2’,6’处于越低场的位置。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*962．3’,4’-二氧取代黄酮类化合物

H-2’受C环负屏蔽和3’-OR屏蔽作用，H-6’也受C环负屏蔽作用，而H-5’则仅4’-OR屏蔽作用。故由低场到高场的顺序为：H-6’H-2’H-5’。但有时也会发生H-2’和H-6’重叠的现象。（1）3’,4’-二氧取代黄酮及黄酮醇

H-5’6.7-7.1d,J=8.5HzH-2’7.2d,J=2.5HzH-6’7.9dd,J=2.5,8.5Hz第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*97

（2）3’,4’-二氧取代异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇

H-2’,5’,6’常作为一个复杂多重峰（通常为两组峰）

6.7-7.1第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*983．3’,4’,5’-三氧取代黄酮类化合物

若R1=R2=R3=H，则H-2’,6’为单峰，

6.7-7.5若上述条件不成立，则H-2’,6’分别为二重峰（J=2Hz）第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*99（三）

C环质子

1.黄酮类第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*1003.二氢黄酮和二氢黄酮醇

1)二氢黄酮两个H-3,分别为dd峰，中心位于δ2.8，J=17Hz（偕偶），5Hz（顺偶）及J=17Hz（偕偶），11Hz（反偶）H-2,dd,δ5.2,Jtrans=11Hz（反偶）,Jcis=5Hz（顺偶）第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*101（2）二氢黄酮醇

3-OR苷化，供电子能力下降，两个氢的δ值升高（向低场位移），可用于判断二氢黄酮醇苷中糖的位置。

H-2与H-3为反式双直立键，J=11HzH-2δ4.9H-3δ4.3第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*1024.查耳酮

第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*1035.橙酮

第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*104四、13C-NMR

方法：

1）对比法：与简单的模型化合物如苯乙酮、桂皮酸及它们的衍生物光谱的比较；

2）计算法：用经验的简单芳香化合物的取代位移加和规律进行计算；

3）选用各种一维和二维NMR技术。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*105（一）骨架类型的判断

根据中央三碳链的碳信号，即先根据羰基碳的δ值，再结合C2、C3的裂分和δ值判断。第四节

黄酮类化合物的检识与结构测定*106C=OC-2（或C-β）C-3（或C-α）归属168.6~169.8(s)137.8~140.7(d)122.1~122.3(s)异橙酮类

174.5~184.0(s)160.5~163.2(s)104.7~111.8(d)黄酮类149.8~155.4(d)122.3~125.9(s)异黄酮类147.9(s)136.0(d)黄酮醇类182.5~182.7(s)146.1~147.7(s)111.6~111.9(d)(=CH-)橙酮类

188.0~197.0(s)

136.9~145.4(d)116.6~128.1(d)查耳酮类75.0~80.3(d)42.8~44.6(t)二氢黄酮类82.7(d)71.2(