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文档简介
中华人民共和国国家标准
犌犅5413.19—2010
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定
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20100326发布20100601实施
中华人民共和国卫生部发布
书
犌犅5413.19—2010
前言
本标准代替GB/T5413.19—1997《婴幼儿配方食品和乳粉游离生物素的测定》。
本标准的附录A为规范性附录。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
———GB5413—1985、GB/T5413.19—1997。
Ⅰ
书
犌犅5413.19—2010
食品安全国家标准
婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定
1范围
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定方法。
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中游离生物素的测定。
2规范性引用文件
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版
本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
3原理
利用植物乳杆菌(犔犪犮狋狅犫犪犮犻犾犾狌狊狆犾犪狀狋犪狉狌犿)对游离生物素的特异性和灵敏性,定量测定出试样中
待测物质的含量。在含有除待测物质以外所有营养成分的培养基中,微生物的生长与待测物质含量呈
线性关系,根据透光率与标准工作曲线进行比较,即可计算出试样中待测物质的含量。
4试剂和材料
除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的二级水。
4.1菌株:植物乳杆菌(犔犪犮狋狅犫犪犮犻犾犾狌狊狆犾犪狀狋犪狉狌犿),ATCC8014。
4.2生物素(dBiotin或VitaminH)标准品(C10H16N2O3S):纯度≥99%。
4.3培养基。
4.3.1乳酸杆菌琼脂培养基:见附录A。
4.3.2乳酸杆菌肉汤培养基:见附录A。
4.3.3生物素测定用培养基:见附录A。
注:一些商品化合成培养基效果良好,商品化合成培养基按标签说明进行配制。
4.4乙醇溶液(50%)。
4.5硫酸溶液(3%):量取3mL硫酸加入到水中,定容至100mL。
4.6氢氧化钠溶液(0.5mol/L):称取20g氢氧化钠溶于1000mL水中。
4.7氯化钠溶液(9g/L):称取9.0g氯化钠溶解于1000mL水中,分装试管,每管10mL。121℃灭
菌15min。
4.8标准溶液的制备。
4.8.1生物素标准贮备液(100μg/mL):称取生物素标准品(4.2)用乙醇溶液(4.4)定容至生物素浓度
为100μg/mL,贮于冰箱中。
4.8.2生物素标准中间液(1μg/mL):吸取1mL生物素标准贮备液(4.8.1),用乙醇溶液(4.4)定容至
100mL。
4.8.3生物素标准工作液(10ng/mL):吸取1mL生物素标准中间液(4.8.2),用乙醇溶液(4.4)定容
至100mL。
4.8.4标准曲线工作液:分两个浓度,高浓度溶液的浓度为0.2ng/mL;低
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