标准解读

《GB/T 23874-2009 饲料添加剂木聚糖酶活力的测定 分光光度法》是一项国家标准，旨在提供一种基于分光光度计测量饲料添加剂中木聚糖酶活性的方法。该标准适用于以木聚糖为底物，在特定条件下通过测定还原糖生成量来间接反映木聚糖酶活力大小。

根据标准内容，实验过程主要包括以下几个步骤：

  1. 样品处理：首先需要准备待测样品溶液，通常要求将样品溶解于适宜缓冲液中。
  2. 反应条件设定：定义了酶促反应的具体条件，包括pH值、温度以及反应时间等参数。
  3. 酶解反应：在上述确定条件下，让样品中的木聚糖酶与底物（通常是某种形式的木聚糖）进行充分接触并发生酶解作用。
  4. 产物检测：采用分光光度法测量反应后产生的还原糖含量。此过程中可能需要用到DNS（二硝基水杨酸）试剂或其他能够与还原糖发生颜色反应的物质作为显色剂。
  5. 计算酶活力：依据标准曲线或直接从吸光度读数换算出单位体积内样品所含有的木聚糖酶活性单位数。

整个测定过程中需要注意控制好各种变量，确保实验结果准确可靠。此外，还需按照标准规定正确使用仪器设备，并严格遵守安全操作规程。


如需获取更多详尽信息，请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2009-05-26 颁布
  • 2009-10-01 实施
©正版授权
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文档简介

犐犆犛６５．１２０

犅４６

中华人民共和国国家标准

犌犅／犜２３８７４—２００９

饲料添加剂木聚糖酶活力的测定

分光光度法

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２００９０５２６发布２００９１００１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

书

犌犅／犜２３８７４—２００９

前言

本标准的附录Ａ为资料性附录。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。

本标准由中国农业大学农业部饲料工业中心、武汉新华扬生物有限公司、广东溢多利生物技术股份

有限公司负责起草。

本标准主要起草人：陆文清、曹云鹤、刘兴海、詹志春、刘亚力、陈清华。

Ⅰ

书

犌犅／犜２３８７４—２００９

饲料添加剂木聚糖酶活力的测定

分光光度法

１范围

本标准规定了用分光光度法测定饲料添加剂中木聚糖酶的活力。

本标准适用于饲料添加剂木聚糖酶产品，最低检出量为１０．０Ｕ／ｇ。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法

３原理

木聚糖酶能将木聚糖降解成寡糖和单糖。还原性寡糖和单糖在沸水浴条件下可以与３，５二硝基

水杨酸（ＤＮＳ）试剂发生显色反应。反应液颜色的深度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成

量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通过分光比色测定反应液颜色的强度，可以计算反应液

中木聚糖酶的活力。

在３７℃、ｐＨ为５．５０的条件下，每分钟从浓度为５ｍｇ／ｍＬ的木聚糖溶液中降解释放１μｍｏｌ还原

糖所需要的酶量为一个酶活力单位Ｕ。

４试剂与溶液

除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合ＧＢ／Ｔ６６８２中规定的二级水。

４．１氢氧化钠溶液，浓度为２００犵／犔

称取氢氧化钠２０．０ｇ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．２乙酸溶液，浓度为０．１犿狅犾／犔

吸取冰乙酸０．６０ｍＬ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．３乙酸钠溶液，浓度为０．１犿狅犾／犔

称取三水乙酸钠１．３６ｇ。加水溶解，定容至１００ｍＬ。

４．４乙酸乙酸钠缓冲溶液，浓度为０．１犿狅犾／犔，狆犎为５．５０

称取三水乙酸钠２３．１４ｇ，加入冰乙酸１．７０ｍＬ。再加水溶解，定容至２０００ｍＬ。测定溶液的ｐＨ。

如果ｐＨ偏离５．５０，再用乙酸溶液（４．２）或乙酸钠溶液（４．３）调节至５．５０。

４．５木糖溶液（犆５犎１０犗５），浓度为１０．０犿犵／犿犔

称取无水木糖１．０００ｇ，加乙酸乙酸钠缓冲溶液（４．４）溶解，定容至１００ｍＬ。

４．６木聚糖溶液，浓度为１００犿犵／犿犔

称取木聚糖（ＳｉｇｍａＸ０６２７１））１．００ｇ，加入０．３２ｇ氢氧化钠，再加入９０ｍＬ

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