标准解读

《GB/T 35942-2018 隐孢子虫套式PCR检测方法》是一项国家标准，旨在规范隐孢子虫的分子生物学检测流程。该标准详细描述了使用套式PCR技术对环境样本中的隐孢子虫进行定性分析的方法。套式PCR是一种两步或多步扩增过程，通过第一次PCR反应放大目标DNA片段后，再以第一次PCR产物作为模板进行第二次或更多次PCR扩增，从而提高检测灵敏度和特异性。

根据此标准，首先需要从待测样品中提取总DNA，然后设计针对隐孢子虫特定基因区域的引物对。标准中推荐了内外两套引物组合，其中外引物用于第一轮PCR扩增，内引物则应用于第二轮扩增。整个实验过程中需严格遵守无菌操作原则，避免污染，并且每一步骤都应设置阳性对照与阴性对照以确保结果准确性。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2018-02-06 颁布
  • 2018-09-01 实施
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文档简介

ICS11220

B41.

中华人民共和国国家标准

GB/T35942—2018

隐孢子虫套式PCR检测方法

NestedPCRmethodfordetectionofCryptosporidiumspp

.

2018-02-06发布2018-09-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T35942—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会归口

(SAC/TC181)。

本标准起草单位中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心

:、。

本标准主要起草人陈兆国米荣升黄燕刘陆世王岩

:、、、、。

Ⅰ

GB/T35942—2018

隐孢子虫套式PCR检测方法

1范围

本标准规定了隐孢子虫套式检测方法

PCR。

本标准适用于动物的隐孢子虫感染的检测流行病学调查和出入境检验检疫

、。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

临床诊断中聚合酶链反应技术的应用

WS/T230—2002(PCR)

3缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

聚合酶链式反应

PCR:(PolymeraseChainReaction)。

磷酸盐缓冲液

PBS:(PhosphateBufferedSaline)。

乙酸电泳缓冲液

TAE:Tris-(TrisAcetate-EDTABuffer)。

溴化乙锭

EB:(EthidiumBromide)。

牛血清白蛋白

BSA:(BovineSerumAlbumin)。

4仪器材料与试剂

、

41仪器

.

411基因扩增仪

..PCR。

412高速台式冷冻离心机

..。

413低速大容量离心机

..。

414微量可调移液器

..:2μL、10μL、20μL、200μL、1000μL。

415核酸电泳仪

..。

416核酸电泳槽

..。

417凝胶成像分析系统

..。

418生物样品均质研磨仪

..。

419高压蒸汽灭菌器

..。

42材料

.

421一次性封口袋

..。

422棉

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