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文档简介
实验一水质毒性快速测定实验目的实验原理实验步骤实验材料和仪器注意事项12345目录1实验目的掌握水质毒性快速测定的原理和方法了解水质毒性评价2实验原理发光细菌是一类可以自身发出蓝绿色光的细菌,一旦遭遇外界不利因素,如有毒物质,会很“敏感”地反应,立即影响发光强度;抑制程度跟所受到的毒物的浓度及其毒性大小正相关;抑制程度可以用光电传感器检测,推算样品毒性大小。2实验原理
通过检测水质综合毒性对发光细菌毒性发光强度的抑制率来确定水样的毒性强弱。
发光细菌的发光强弱,能表示其生命力强弱。
细菌荧光素酶(LE)还原性的黄素单核苷酸(FMN·H2)长链脂肪醛(RCHO)
2实验原理毒性抑制发光,变化程度与受试物浓度在一定范围内线性相关抑制发光机理:A.直接抑制参与发光酶的活性B.抑制细胞内与发光反应有关的代谢过程受试毒性发光强度3实验材料和仪器便携式水质毒性分析仪发光菌剂自来水池塘水4实验步骤——试剂准备(活化)用500μl复苏稀释液使1小瓶发光细菌冻干粉试剂水合用50μl移液枪吹打试剂3-4次,使试剂混合均匀将水合的试剂放在室温(21-25oC)下15min1234实验步骤——测试样本准备将试管A1、A2放到试管架的A1和A2位置将待测样品与渗透压调节液按9:1的比例混合,手指夹住试管,手腕甩动,使其充分混合均匀4实验步骤——测量过程A1A21ml复苏稀释液(空白)1ml渗透压调节后的样本4实验步骤——测量过程A1A250ul水合后的试剂(先放置15min)加液间隔时间15s,用1ml的移液枪吹打3-4次混匀(每管用一个Tip头,避免交叉感染)发光细菌菌液4实验步骤——测量过程试剂反应5min,以A1管加入试剂时刻开始计时;
4min时,开机;
5min时,将A1管读完后,取出A1管;将A2管放进仪器中读取A2管的读数,仪器自动给出样品的相对发光度和RLU值。4实验步骤——测量过程5注意事项1认真准备样品,去除影响检测的因素,如色、pH、氯、浊度2反应试剂水合过程混匀必须充分,水合完全!3手不应接触任何试管的中下部4必须熟练、准确地使用移液枪吸取或混合样品5移液枪量程选择得当,计量无误6吸取水合反应试剂等有气泡的液体时,移液枪头应该放置于试管底部吸取7样品稀释过程中避免飞溅、挂壁等现象,造成样品损
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