分子生物学期末复习试题及答案

一、名词解释包括对蛋白质和核酸等生物大分子的构造与功能,以及从分子水平争论生命活动RNARNA组学争论细胞中snmRNAs间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。增色效应:DNAOD260增高的现象。减色效应：DNA复性时其溶液OD260降低的现象。Tm：变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内，紫外光吸取值到达最大值的50DNA解链温度,又称融解温度(meltingtemperature,Tm〕.其大小与G+C解链曲线：假设在连续加热DNA的过程中以温度对A260〔absorbance,A，A260代表溶液在260nm处的吸光率〕值作图,所得的曲线称为解链曲线。DNADNA自然的双螺旋构象，这一现象称为复性。核酸分子杂交：在DNA变性后的复性过程中,假设将不同种类的DNA单链分子或RNA的条件〔温度及离子强度〕下,就可以在不同的分子间形成杂化双链，这种现象称为核酸分子杂交。基因：广义是指原核生物、真核生物以及病毒的DNARNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的根本单位。狭义指能产生一个特定蛋白质的DNA断裂基因:不连续的基因称为断裂基因，指基因的编码序DNA重叠基因：核苷酸序列彼此重叠的2个基由于重叠基因，或称嵌套基因。致死基因:删除后可导致机体死亡的基因。基因冗余：由于一基因在个体中有假设干份拷贝,当删除其中一个时，个体的表型不发生明显变化.DNADNA又称为遗传重组或基因重排.同源重组:发生在同源序列间的重组称为同源重组，又称根本重组。接合作用：当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,DNA〔细菌〕转移至另一细胞(细菌〕的DNA〔conjugation)。转化作用：通过自动猎取或人为地供给外源DNA，使细胞或培育的受体细胞获得的遗传表型,称为转化作用(transformation)。转导作用：当病毒从被感染的〔供体〕细胞释放出来、再次感染另一(供体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之

DNA位点特异重组：位点特异重组〔site—specificrecombination)是由整合酶催化，在两个DNA异位点间发生的整合。12-23重组发生在间隔为12bp23bp列之间，称为12-23规章。转座子：(transposon〕在基因中可以移动的一段DNA序列。由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transpositio。克隆：来自同一始祖的一样副本或拷贝的集合。DNA应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质〔DNA〕与载体DNADNA〔replicon)，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进展扩增提取获得大量同一DNADNA(recombinantDNA)。〔geneticengineerin〕方法及相关的工作称基因工程，又称重组DNA工艺学。限制性核酸内切酶：(restrictionendonuclease,RE)识别DNA的特异序列，并在识别位点或其四周切割双链DNA点，这些酶称同功异源酶.DNA载体:为携带目的基因，实现其无性生殖或表达有意义的蛋白质所承受的一些DNA复制：(replication)是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNAsemi-conservativereplicatioDNA生物合成时，母链DNA(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地承受过来，另一股DNA都和亲代DNA基序列全都。这种复制方式称为半保存复制。复制子：(replicon〕DNA个复制子。replicationeye)DAN下观看起来如同一只眼睛，称为复制眼。replicationfork成复合物和链合成的部位，这种构造称为复制叉。 开放阅读框：从mRNA5¢端起始密码子AUG到3¢端终止密端粒：(telomere)指真核生物染色体线性DNA分子末端的 码子之间的核苷酸序列各个三联体密码连续排列编码一构造. 个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架〔openreading转录：(transcription〕生物体以DNA为模板合成RNA frame,ORF)。的过程。 顺反子:遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子不对称转录:〔asymmetrictranscription)在DNA分子双 (cistron)。链上某一区段一股链用作模板指引转录另一股链不转多顺反子:原核细胞中数个构造基因常串联为一个转录单录；模板链并非永久在同一条单链上。 位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质为多模板链：DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA顺反子〔polycistron)。的一股单链，称为模板链templatestran，也称作有 单顺反子真核mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反意义链或Watson链。 〔singlecistron〕.编码链：相对的另一股单链是编码链(codingstrand)， 翻译的跳动现象翻译中读码框发生位移或核糖体跳过一也称为反义链或Crick链。 大段mRNA后连续翻译称为翻译的跳动现象。启动子:RNA聚合酶结合模板DNA的部位称为启动子信号序列:(signalsequence〕全部靶向输送的蛋白质结(promoter〕 构中存在分选信号主要为N末端特异氨基酸序列可引转录泡:〔transcriptionbubble)在转录延长过程中，由导蛋白质转移到细胞的适当靶部位这一序列称为信号序局部翻开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及生成的RNA列.三者结合在一起的复合体,为空泡状构造,又称转录复合信号肽：(signalpeptide〕各种生分泌蛋白的N端有物。 保守的氨基酸序列称信号肽。转录因子：能直接、间接识别和结合转录上游区段DNA线粒体定向肽：由核基因组编码的线粒体外膜蛋白的N〔trans-actingfactors)。反式作用因子中，直接或间氨酸等。接结合RNA聚合酶的则称为转录因〔transcriptional基因表达:(geneexpression)基因经过转录、翻译，产生factor，T。 具有特异生物学功能的蛋白质分子的过.转录后加工〔RNA的成熟在细胞内，由RNA聚合酶合操纵子operon是原核生物在分子水平上基因表达调成的原初转录物 的单位由构造基因启动子操纵基因和调整基因组成;〔pre-RNA〕经过链的裂解、5`端与3`等过程,转变为成熟的RNARNA转录后加工postranscriptionalprocessing。转录衰减〔attenuation是指转录可正常起,但在转录RNA编辑：转变RNA编码序列的方式称为RNA编辑。进入第一个构造基因前即突然停顿的过程由于这一终止密码子〔codo代表一个氨基酸或蛋白合成终止信号作用并不能使正在进展的构造基因转录中途停顿而仅的核苷酸三联体。 局部中途停顿转录，所以称为转录衰减。二、填空题：1。分子生物学的进展分为三个阶段：DNADNA建立和进展阶段，DNA和分子生物学的迅猛进展阶段.2。对DNAJ。Watson，F.Crick，O.Avery。DNAG:lbertsanger4。PCRKaryB.Mullis。5。核酸分子由碱基，戊糖，磷酸三局部组成。6.DNA氢键维持双链横向稳定性，碱基积存力维持双链纵向稳定性.7。OD260=1.0相当于50ug/ml双链DNA，40ug/ml单链DNA,20ug/ml寡核苷酸。8.DNA1.7g/cm3，相当于8MCSCL9。质粒PSC101中的P构建该质粒的争论者或单位.10。DNA同源重组，接合作用，转化作用，转导作用，位点特异的重组，转座.11.基因工程中常用载体可分为三类DNADNADNA。12化学合成法,cDNA文库，基因组DNA(PCR。重组DNA导入受体菌时，对受体菌的要求为安全宿主菌，限制酶和重组酶缺陷，处于感受态；导入方式有转化,转染,感染三种。重组DNA分，切，接，转，筛。15。1958Meselson氮的同位素试验证明白DNA16。复制的方向有单向复制,相向复制,双向复制.17。参与DNA底物，聚合酶,模板,引物，其他的酶和蛋白质分子。18。细菌的RNAα，β，β，ω，σ。19.真核生物的转录过程可分为识别,起始，延长，终止四个阶段。20。逆转录酶是一类格外简单的酶，在其简洁的一条多肽链上具有多种酶活性DNA聚合酶活性,RNA酶活性,DNADNAtRNA21。遗传密码的特点有连续性，简并性,摇摆性,通用性。22.基因水平,转录水平,转录后水平，翻译水平，翻译后水平的调控。三、翻译：脱氧核糖核(DN， 超螺〔supercoil， 正超螺〔positivesupercoiDNA-dependentDNApolymeras〔依靠DNA的DNA聚合酶, 解螺旋酶helicase，引物酶primas， SS〔单链DNA结合蛋白, DNAligas〔DNA连接酶, telomeras〔端), cDN〔互补teminato〔终止子， UB〔upstreambindingfactor上游启动子结合因子TBP〔TATAbox—bindingprotein〕TATA框结合蛋白，downstreamelement〔下游启动子元件，TF(transeriptionalfactors)转录因子,CTD〔carboxylterminaldomain〕羧基端构造域,EB〔溴化乙锭， IF起始因子, E〔延长因子， R〔释放因子molecularchaperon〔分子伴侣〕四、简答题：1DNA1944,O。Avery肺炎双球菌转化试验1952，A。DHershey和M.Chase噬菌体感染试验2.mRNA构造特点：1、大多数真核mRNA的5´末端均在转录后加上一个7—甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C´2也是甲基化，形成帽子构造：m7GpppNm—。2mRNA的3´末端有一个多聚腺苷酸(polyA〕构造，称为多聚A功能：把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则,抄录并传送至核糖体，用以打算其合成蛋白质的氨基酸排列挨次.3tRNA含10～20%稀有碱基，如DHU；3´末端为-CCA-OH；5´末端大多数为G；具有TyC4tRNAtRNA〔氨基酸臂;DHU；TΨC〕tRNAL5.简述原核生物和真核生物的rRNA真核生物的种类有:5SrRNA，28SrRNA，5.8SrRNA，18SrRNA;原核生物的种类有：5SrRNA,23SrRNA,16SrRNA、6DNA的变性?变性DNADNA〔denaturation)：在某些理化因素作用下，DNA变性后其它理化性质变化:OD260增高;粘度下降;比旋度下降；浮力密度上升;酸碱滴定曲线转变；生物活性丧失。7.CCCDNA:1C值不随生物的进化程度和简单性而增加〔如肺鱼的C112.22、亲源关系亲热的生物C〔14、高等真核生物具有比用于遗传高得多C值，(如人染色体组DNA300万个基因，但有实际用途的基因只有5—10万个左右〕.8。简述鼠伤寒沙门氏菌鞭毛相转变的原理？鞭毛相转变phasevariatio：鼠伤寒沙门氏菌由鞭毛蛋白打算的H抗原有两种，分别为HH2鞭毛蛋白。从单菌落的沙门氏菌中常常能消灭少数呈另一抗原的细菌细胞，这种现象称为鞭毛相转变.hixH片段可在Hin〔倒位〕.H动子P，其一驱动hin基因表达，另一正向时驱动H2和rH1基因表达，反向〔倒位〕时H2和rH1不表达。rH1为H1的阻遏蛋白基因。IgRSS重链〔IgH)基因的V—D-J重排和轻链(IgL)基因的V—J重排均发生在特异位点上.V,JD〔recombinationsignalsequenc，RSS1TCACAGTA的〔ACAAAAAC.。中间为固定长度或12bp23bpHindⅢ为例说明限制性核酸内切酶命名的原则？HindⅢHaemophilusinfluenzaedd第一个字母取自产生该酶的细菌属名，用大写;其次、第三个字母是该细菌的种名,用小写;第四个字母代表株;用罗马数字表示觉察的先后次序。简述载体的选择标准？〔DNA插入点具有多个单一酶切位点，称为多克隆位点；分子量小，以容纳较大的外源DNA。DNA目的基因的猎取——克隆载体的选择和构建--外源基因与载体的连接--DNA导入受体菌—-重组体的筛选--克隆基因的表达13PCR组成成分：模板DNA；特异性引物；耐热DNA聚合酶；dNTPs；Mg2+.反响步骤：变性〔95℃〕—-退火〔Tm-5℃〕—-延长〔72℃)-—变性〔95℃〕—-……循环14DNA顺着解链方向生成的子链，复制是连续进展的，这股链称为领头链。另一股链由于复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长，这股不连续复制的链称为随从链。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazakifragmen。领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。15DNA1、遵守严格的碱基配对规律;2、聚合酶在复制延长时对碱基的选择功能；3DNA-pol的准时校读功能。DNADNADNADNA反响不需ATP。DNA拓扑异构酶Ⅱ：切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛；利用ATP供能，连接断端,DNA什么叫端粒？其构造特点和功能是什么？端粒指真核生物染色体线性DNA分子末端的构造。构造特点：1DNA序列和蛋白质构成；2、DNAG、C1、维持染色体的稳定性；2、维持DNA的完整性什么叫端粒酶？其组成如何?端粒酶(telomerase)：以酶分子中的RNA片段为模板,在染色体DNA3`—端合成一段DNA.组成:端粒酶RNA(humantelomeraseRNA，hTR)；端粒酶协同蛋白humantelomeraseassociatedprotein，端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase，hTRT〕19简述转录与复制的异同点？20RNAα2ββ′ωσ:～465kD；β和β′亚基:催化中心，构成核酸通道；α亚基：核心酶组装所需;也与调整因子作用；σ亚基：启动子识别，具有启动子特异性。21.简述原核生物启动子的序列特点？s-35和-10s启动子具有不同的其始效率。22RNA聚合酶中σ因子的特点？重复使用(Re—usable)；使Holo—enzyme识别SextamaBox,与模板链结合;修饰RNApol构型，降低全DNA〔107/mol)，增加全酶与R，Bsite(1014/mol)，导致RNA链的延长缓慢。23。简述转录过程？识别阶段：RNA聚合酶在sDNA基配对合成最初RNA,RNARNA录终点，RNARNADNA24.RNARNA编辑能消退移码突变等过程带来的危害；能增加基因产物的多样性；和生物细胞发育与分化有关，是基因调控的一种重要方式；可能使基因产物获得的构造和功能,有利于生物进化；很可能与学习和记忆有关.五、论述：E。coliDNA1、复制的起始。起始复合物的形成:大约20—40DnaA蛋白各带一个ATP4个9bpDNA成起始复合物(HU〕.开链复合物的形成：富含AT3个13bp前引发复合物的形成：DnaB在DnaCATP的能量，双链沿5`-3`方向移动,形成前引发复合物。2DNA-poldNTPdNMP酸二酯键的不断生成.领头链的合成：引物合成酶合成一段DNA引物。前导链和后随链合成的协调全都，DNADNApolIII一个突环形构象。3、复制的终止。原核生物基因是环状DNA,双向复制的复制片段在复制的终止点〔ter〕处集合.RNA细菌的RNA〔DDRP〕全酶:组成α2ββ′ωσ：～465kD；α2ββ′局部称为核心酶.α亚基：核心酶组装的组建因子，促使RNApolDNAα因子使双链解链为单链，位于尾端的αβNTPNMP与Rho〔ρRNA3”—end,催化中心模板DNA结合，构成RNAβ因子含有两个位点，IATPGTP,E位点对NTPβ′因子:强碱性亚基,促使RNApolymerase(sensestrand)结合，受K.s因子：重复使用，使RNA酶全酶识别启动与模板链结合，促进转录的起始，修饰RNA聚合酶构型降低了全酶和DNA的非专一性结合力，增加RNA与识别位点的专一性结合力，导致RNA链的延长缓慢。ω亚基未知。β和β′亚基是催化中心,构成核酸通道。转录识别阶段:RNA聚合酶在s亚基引导下结合到启动子上，DNA过碱基配对合成最初RNA链；延长阶段：核心酶向前移动，RNA链不断生长；终止阶段：RNA聚合酶到达基因转录终点,RNARNADNA3。论述蛋白质翻译的过程？1、翻译的起始。指mRNA和起始氨酰—tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物.〔一〕原核生物翻译起始复合物形成.核蛋白体大小亚基分别;mRNAtRNA〔二〕真核生物翻译起始复合物形成。核蛋白体大小亚基分别；起始氨基酰—tRNA结合；mRNA2、翻译的延长。指依据mRNA密码序列的指导,次序添加氨基酸从N端向C端延长肽链,直到合成终止的过程。当与起始密码子紧邻的密码子被其氨酰—tRNA在核蛋白体上连续性循环式进展，又称为核蛋白体循环，每次循环增加一个氨基酸，胞括以下三步：a。进位，又称注册，指依据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基