2023届甘肃省兰州市兰化一中高三3月份第一次模拟考试生物试卷含解析

2023年高考生物模拟试卷考生须知：1．全卷分选择题和非选择题两部分，全部在答题纸上作答。选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题的答案必须用黑色字迹的钢笔或答字笔写在“答题纸”相应位置上。2．请用黑色字迹的钢笔或答字笔在“答题纸”上先填写姓名和准考证号。3．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，在草稿纸、试题卷上答题无效。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．今年爆发的肺炎疫情是由传播力极强的新型冠状病毒引起的，严重威胁人们的生命安全，严重影响经济文化生活，给全球带来巨大损失。下列有关该病毒及其引起的肺炎的相关说法，错误的是（）A．可以通过检测病毒的碱基种类来判定该病毒的核酸类型B．该病毒可在唾沫、门把手等处快速繁殖而引起广泛传播C．研制疫苗并进行预防接种是保护易感人群最有效的方法D．新冠肺炎患者痊愈后的血清对该病危重患者有治疗作用2．某同学探究过氧化氢在不同条件下的分解情况（实验中无关变量相同且适宜），结果如下表。下列相关叙述正确的是（）处理试管编号H2O21．5%FeCl120%肝脏研磨液温度实验现象12mL——室温—22mL——90℃++12mL2滴—室温+42mL4滴—室温++52mL—2滴室温+++A．本实验的自变量是催化剂的种类和温度B．试管1的处理降低了H2O2分解反应的活化能C．试管4中继续增加FeCl1的量，气泡不再增加D．试管5迅速放在90℃环境中，因酶的失活而不产生气泡3．酸雨指pH小于5.6的大气降水。在实验室中模拟酸雨喷淋樟树和楝树的树苗。结果发现，楝树的高度比对照组低约40%，而樟树的高度没有明显差异。结合生态学知识所作的合理推测是A．酸雨对楝树种群中个体的株高影响较明显B．酸雨对樟树种群密度的影响比对楝树的大C．森林生态系统物种丰（富）度不受酸雨影响D．楝树生长的群落中，其他树种都不耐酸雨4．某课外小组用传感器测定了不同条件下250ml有鱼和无鱼池塘水的溶解氧变化，获得如下数据。下列说法正确的是编号12345条件26℃光照26℃黑暗26℃光照10℃光照10℃黑暗材料池水池水池水+鱼池水池水+鱼2小时后的溶解氧变化（μg）0.378-0.065-0.758-0.03-0.215A．1号瓶池水中藻类光合作用产生的氧气量为0.378μgB．4号瓶池水中藻类不能进行光合作用C．26℃条件下鱼呼吸作用消耗的氧气量为1.136μgD．池水中藻类光合作用的最适温度为26℃5．某潮间带分布着海星，藤壶、贻贝、石鳖等动物，藤壶、贻贝、石鳖相互之间无捕食关系，但都可被海星捕食。海星被人捕光后，藤壶较另两种动物数量明显快速增加。下列说法错误的是（）A．藤壶、贻贝、石鳖三者之间存在着竞争关系B．海星被捕光后，藤壶成为优势种，其种内斗争加剧C．该潮间带中全部动物和浮游植物共同构成生物群落D．等距取样法适合调查生活在该狭长海岸的藤壶种群密度6．研究发现当机体糖类物质利用受阻或长期不能进食时，机体会动用大量脂肪分解供能，脂肪分解后会生成酮体。当人体内的酮体浓度超过肝外组织所能利用的限度后，血液中酮体堆积，就会导致人体患酮血症。下列相关叙述错误的是A．酮血症患者体内可能胰岛素分泌不足或细胞缺乏胰岛素受体B．人长期不补充糖类食物，除会患酮血症外，尿氮含量也可能会增加C．患有糖尿病的酮血症患者的组织细胞对葡萄糖的摄取和利用率较高D．某患有酮血症的个体出现头昏、心慌和四肢无力，其可能患有低血糖病二、综合题：本大题共4小题7．（9分）如图1是某人工鱼塘生态系统能量流动过程中部分环节涉及的能量流动值(单位为103kJ·m-2·a-1)。图2为甲、乙两个水池中的各由5个物种构成的食物网，且这两个水池的生态系统在没有人为干扰的情况下均达到相对稳定的平衡状态。（1）图1中该生态系统中总能量包括_________，能量从该生态系统的第二营养级到第三营养级传递的效率约为_____。（2）试分析图中植食动物、肉食动物和顶位肉食动物随营养级的升高需要的有机物输入越来越多的原因：______。（3）为增加图2中甲水池生态系统的多样性，向水池中引种了大量浮萍，一段时间后水面长满了浮萍，水草、绿藻和轮虫相继死亡。水草死亡的主要原因是缺少_____，轮虫死亡的主要原因是缺少_____。乙水池中加入了较多的有机肥，一段时间后，水池中绿藻爆发，其他4种生物陆续死亡，水体发臭。整个过程属于_____反馈调节。（4）该生态系统的功能除图中所示外，还包括_____和信息传递，其中，前者的特点是具有_____性；后者在生态系统中的作用除生命活动的正常进行离不开外，还有_____(写一点即可)。（5）下表是五个种群在一个相对稳定的水域生态系统中所含有的总能量和污染物X的平均浓度。已知水中X的质量浓度为0.003mg/L。请分析说明：项目甲乙丙丁戊能量(kJ)1.6×1091.2×1091.3×1089.1×1079.5×106X浓度(mg/L)0.0370.0360.350.394.1①处于本生态系统第一营养级的生物种群是_____。②若每种生物都被相邻下一营养级的所有生物捕食，请绘出这个生态系统的营养结构。_____8．（10分）甲醇酵母菌是基因工程中常用的受体菌，研究人员将人的胶原蛋白基因导入甲醇酵母菌中并成功表达。回答下列问题。（1）获取目的基因是实施基因工程的第一步，获取目的基因的方法有_____、__________(答出两种)。（2）要使胶原蛋白基因在甲醇酵母菌中表达，需要先构建基因表达载体而不是直接将基因导入受体细胞，原因是_________________和_________________。（3）甲醇酵母菌可高效表达外源蛋白质并分泌到细胞外，但自身蛋白质分泌到培养基中的很少，这一特点的优点在于_____________，甲醇酵母菌分泌的胶原蛋白的结构与人的几乎完全相同，从细胞结构的角度分析，其原因可能是_______。（4）在构建基因表达载体时，用两种不同的限制酶分别切割目的基因的两端和质粒，使目的基因和质粒获得不同的黏性末端，其目的是______________。9．（10分）欲了解捕食和种间竞争对田鼠数量的影响，研究者设计了4个处理组，分别是甲组（有捕食者、无竞争物种），乙组（有捕食者、有竞争物种），丙组（无捕食者、有竞争物种），丁组（无捕食者、无竞争物种），统计结果如下图。请回答：（1）在23周时，捕食关系和种间竞争关系中对田鼠影响较大的是_______，判断理由是_______。（2）实验中的自变量是_______，是否符合单一变量原则，为什么？_______，_______。（3）下列能表示在自然生态系统中田鼠与竞争物种之间数量关系的曲线图有_______。10．（10分）下图表示某种绿色植物叶肉细胞中部分新陈代谢过程，X1、X2表示某种特殊分子，数字序号表示过程，请据图回答：（1）①过程中，ATP转化成ADP时，产生的磷酸基团被______________接受，同时在物质X2H的作用下使之成为卡尔文循环形成的第一个糖，此后的许多反应都是为了_____________。（2）图中X1H转化成X1发生于过程_______（填序号）中，此过程中产生ATP所需的酶存在于_____________________。（3）若a表示葡萄糖，则正常情况下，一个叶肉细胞中光合作用过程产生的ATP总量_________（大于/小于/等于）③和④过程产生的ATP总量；在消耗等量葡萄糖的情况下，③和④过程产生的ATP总量约等于厌氧呼吸的_________倍。（4）若将该植物置于光照、温度等条件均适宜的密闭容器中，一段时间后，与初始状态相比，叶肉细胞中RuBP含量和3-磷酸甘油酸的生成速率将分别________________________。11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

病毒（如噬菌体）没有细胞结构，蛋白质和核酸（每种病毒只含一种核酸，DNA或RNA）等物质组成的简单生命体。病毒只能寄生在宿主细胞内才能正常地生活，可以根据病毒所含核酸种类的不同可分为DNA病毒和RNA病毒。传染病概念：由病原体（细菌、真菌、病毒和寄生虫）引起的，能在人与人之间和人和动物之间传播的疾病。传染病流行具有三个环节：传染源、传播途径和易感人群。传播途径：空气传播、水传播、饮食传播、接触传播、生物传播等，传染病的预防措施：控制传染源；切断传播途径；保护易感人群。【详解】A、可以通过检测病毒的碱基种类来判定该病毒为DNA病毒或RNA病毒，A正确；B、病毒只能在宿主细胞才可快速繁殖，B错误；C、易感人群接种疫苗是最有效的防疫手段，C正确；D、新冠肺炎患者痊愈后的血清内有相应的抗体和记忆B细胞，对危重患者有治疗作用，D正确。故选B。【点睛】新型冠状病毒也属于病毒，把握病毒的基本特点：仅含一种核酸，需寄生于活细胞。同时掌握免疫反应的基本概念，结合所学知识解答题目。2、B【解析】

1.酶是由活细胞产生的具有催化作用的有机物，绝大多数酶是蛋白质，极少数酶是RNA。

2.酶的特性：高效性、专一性和作用条件温和的特性。

1.酶促反应的原理：酶能降低化学反应的活化能。

4.影响酶活性的因素主要是温度和pH，在最适温度（pH）前，随着温度（pH）的升高，酶活性增强；到达最适温度（pH）时，酶活性最强；超过最适温度（pH）后，随着温度（pH）的升高，酶活性降低。另外低温酶不会变性失活，但高温、pH过高或过低都会使酶变性失活。【详解】A、实验设计要遵循单一变量的原则，本实验的自变量是催化剂的种类或温度，A错误；

B、试管1的处理是加入1．5%FeCl1，Fe1+能作为无机催化剂能降低化学反应的活化能，B正确；

C、试管4中继续增加FeCl1的量，提高了催化剂浓度，单位时间内产生的气泡会增加，C错误；

D、若把5号试管迅速放在90℃环境中，过氧化氢酶变性失活，但过氧化氢高温下会分解，其实验现象将与2号试管的相近，D错误。

故选B。3、A【解析】

根据题目信息“在实验室中模拟酸雨喷淋樟树和楝树的树苗。结果发现，楝树的高度比对照组低约40%，而樟树的高度没有明显差异”，可直接推出酸雨对楝树生长的影响明显大于樟树，A符合题意，B不符合题意；

楝树的生长受酸雨的影响，则一些其他生物的生长也会受酸雨的影响，故酸雨能影响森林生态系统的物种丰富度，C不符合题意；

楝树的生长受酸雨的影响，不能说明群落中其他树种都受酸雨的影响，D不符合题意。

【点睛】充分利用题目信息“在实验室中模拟酸雨喷淋樟树和楝树的树苗。结果发现，楝树的高度比对照组低约40%，而樟树的高度没有明显差异”判断出酸雨对楝树生长的影响明显大于樟树是正确解答该题的关键。4、C【解析】

26℃黑暗和10℃黑暗溶氧量的变化表示呼吸消耗量；26℃光照和10℃光照下氧气的变化量表示氧气的释放量。【详解】1号瓶池水中藻类光合作用产生的氧气量为0.378μg+0.065μg=0.443μg，A错误；4号瓶有光照，池水中藻类可以进行光合作用，B错误；26℃条件下鱼呼吸作用消耗的氧气量为0.378μg+0.758μg=1.136μg，C正确；题目中只有10度和26度，无法确定池水中藻类光合作用的最适温度，D错误。故选C。5、C【解析】

根据题干的信息可知，该题主要考察了种间关系，海星可以捕食藤壶、贻贝、石鳖，而藤壶、贻贝、石鳖之间存在竞争关系，当海星被人捕光以后，发现“藤壶较另两种动物数量明显快速增加”，表明藤壶在这种竞争中占优势。【详解】A、根据题干可以推测藤壶、贻贝、石鳖相互之间无捕食关系，且当海星被捕光以后，藤壶较另两种动物数量明显快速增加，说明三者之间为竞争关系，A正确；B、海星被捕光后，藤壶较另两种动物数量明显快速增加，变成优势种，随着数量的增多，种内斗争加剧，B正确；C、生物群落是指一定自然区域内全部的种群，该地区除了动物和浮游植物以外还有其它的生物，C错误；D、等距取样法适合调查长条形地块的藤壶种群密度，D正确；故选C。6、C【解析】

由题干可知，脂肪分解生成酮体。酮体的浓度超过一定限度，会导致机体患酮血症。脂肪过多分解的原因主要由两种：一种是糖尿病患者，另一种是长时间不补充糖类食物，导致肌肉以脂肪为呼吸底物。【详解】多数患有酮血症的患者都患有糖尿病，糖尿病产生的原因是体内胰岛素分泌不足或细胞缺乏胰岛素受体，A正确；当机体长期不补充糖类食物时，机体会以脂肪和蛋白质为底物进行氧化分解供能，故该机体除患酮血症外，尿氮含量还可能会增加，B正确；含有糖尿病的酮血症患者，组织细胞对葡萄糖的摄取、利用效率低，从而导致血糖浓度高，C错误；某患有酮血症的个体出现头晕心慌和四肢无力，可能是因为长时间不补充糖类物质而导致低血糖，D正确；因此，本题答案选C。【点睛】解答本题的关键是看清题干中相关信息“研究发现当机体糖类物质利用受阻或长期不能进食时，机体会动用大量脂肪分解供能，脂肪分解后会生成酮体”，再根据题意作答。二、综合题：本大题共4小题7、生产者通过光合作用固定的总能量和输入的有机物中的能量15.6%能量流动逐级递减以及维持各营养级较高的输出量光照绿藻（或食物）正物质循环全球性和循环往复生物种群的繁衍离不开信息传递或调节生物种间关系，维持生态系统稳定甲和乙【解析】

图中①表示呼吸作用，②表示贮存在有机物中的能量。图中生产者固定的太阳能的去向包括被植食动物同化、呼吸消耗、被分解者利用、未被利用四个部分；而植食动物同化的能量的来源为从生产者那里同化、由外界补充，去向包括被小型肉食动物同化、呼吸消耗、被分解者利用、未被利用四个部分。【详解】（1）图1中该生态系统中总能量包括生产者通过光合作用固定的总能量和输入的有机物中的能量。该生态系统中肉食动物从植食动物同化的能量为：（2.1+5.1+0.25+0.05-5）×103kJ·m-2·a-1=2.5×103kJ·m-2·a-1，植食动物的同化量为：（4+9+0.5+2.5）×103kJ·m-2·a-1=16×103kJ·m-2·a-1，所以第二营养级到第三营养级的传递效率为2.5×103÷16×103×100%≈15.6%。（2）能量流动的特点是单向传递、逐级递减，以及各营养级有较高的输出量，所以图中植食动物、肉食动物和顶位肉食动物随营养级的升高需要的有机物输入越来越多。（3）由于池中引种了大量浮萍，一段时间后，水面长满了浮萍，遮住了光线，水草因光照减弱，不能正常进行光合作用而死亡；水草死亡，轮虫因缺乏食物来源也死亡。乙池中加入了较多的有机肥，好氧性微生物大量繁殖，消耗水体中的氧气，水体中的溶解氧下降，动物因缺乏氧气供应而死亡；不久，绿藻也大量死亡，大量的尸体使分解者的数量剧增，分解者产生氨气和硫化物等有刺激气味的物质，导致水体发臭，整个过程属于正反馈调节。（4）生态系统的功能包括能量流动、物质循环、信息传递，图示中体现了能量流动的功能。物质循环具有全球性和循环往复的特点。信息传递的作用除生命活动的正常进行离不开外，还能调节生物种间关系，维持生态系统稳定。（5）表中的能量、X含量都能作为确定生物营养级的依据；能量流动的特点是单向流动，逐级递减，营养级越高，能量越少。污染物会随着食物链的延长在体内不断积累，所以营养级越高，污染物的含量越多。

①表格分析，甲和乙能量最多，污染物含量最低，处于生态系统第一营养级。

②丙、丁处于第二营养级，戊处于第三营养级，而每种生物都被相邻下一营养级的所有生物捕食，故最可能的食物网为：

。【点睛】本题考查生态系统结构和功能的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力。8、从基因文库中获取人工合成目的基因无表达所需的启动子目的基因无复制原点（目的基因不能在受体细胞中稳定存在）便于目的蛋白的分离和纯化甲醇酵母菌有内质网和高尔基体防止目的基因和质粒的自身环化、防止目的基因与质粒反向连接【解析】

基因工程是狭义的遗传工程，基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因（即目的基因）在宿主细胞中稳定高效地表达。为了实现基因工程的目标，通常要有多种工具酶、目的基因、载体和宿主细胞等基本要素，并按照一定的程序进行操作，它包括目的基因的获得、重组DNA的形成，重组DNA导入受体细胞也称（宿主）细胞、筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达等几个方面。基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。【详解】（1）获取目的基因是实施基因工程的第一步，获取目的基因的方法有从基因文库中获取（目的基因序列未知）、人工合成（目的基因序列已知）。（2）单独的目的基因容易丢失，且目的基因的表达需要启动子和终止子，目的基因的复制需要复制原点，因此要使胶原蛋白基因在甲醇薛母菌中表达，需要先构建基因表达载体而不是直接将基因导入受体细胞。（3）甲醇酵母菌可高效表达外源蛋白质并分泌到细胞外，但自身蛋白质分泌到培养基中的很少，这样分泌到细胞外的蛋白主要是我们需要的目的蛋白，这一特点的优点在于便于目的蛋白的分离和纯化。甲醇酵母菌分泌的胶原蛋白的结构与人的几乎完全相同，从细胞结构的角度分析，其原因可能是甲醇酵母菌有内质网和高尔基体，可以对表达出的蛋白质进行进一步的加工、运输。（4）用一种酶切质粒和目的基因，可能会引起质粒或目的基因自身环化。在构建基因表达载体时，用两种不同的限制酶分别切割目的基因的两端和质粒，使目的基因和质粒获得不同的黏性末端，其目的是防止目的基因和质粒的自身环化、防止目的基因与质粒反向连接。【点睛】本题重点在基因工程的步骤及原理，须在理解的基础上加强识记。9、捕食关系只有捕食者的甲组比只有竞争物种的丙组存活数量少有无捕食者和有无竞争物种是（符合）一个自变量对应观测一个因变量/甲与乙、甲与丁、乙与丙、丙与丁两者间符合单一变量①④【解析】

分析题图可知，结合第29周的田鼠存活数量与数量变化曲线可知，比较甲丁与丙丁二组，说明捕食关系与种间竞争均会使田鼠数量下降，比较甲丙二组，可发现捕食关系对田鼠数量影响更大。【详解】（1）丁组为无捕食和竞争的对照组，甲与丁的自变量是有无捕食者，丙与丁的自变量是有无竞争者。据图可知，甲与丁之间的田鼠数量差异比丙与丁之间的差异大，说明捕食关系对田鼠的影响更大；（2）单一变量原则是一个自变量对应观测一个因变量，甲与丁的自变量是有无捕食者，丙与丁的自变量是有无竞争者，甲与乙的自变量是有无竞争者，丙与乙的自变量是有无捕食者，以上四组中每组内都遵循单一变量原则；（3）在自然生态系统中，根据田鼠与竞争物种间生存能力的差异，如果两个物种的生存能力相似，此消彼长则用图④表示，如果两个物种中一个物种的生存能力很强、一个物种的生存能力很弱，可能走向两极分化，则可以用图①表示。【点睛】本题考查种群数量变化与捕食者和种间竞争的关系，本实验设置三个实验组与一个对照组，要求学生在分析实验结论时首先理清空白对照组与实验组，再与单一变量发生变化的实验组进行对比分析获得实验结果。10、3-磷酸甘油酸再生RuBP④线粒体内膜上大于15增加减慢【解析】

光合作用分为两个阶段进行，在这两个阶段中，第一阶段是直接需要光的称为光反应，第二阶段不需要光直接参加，是二氧化碳转变为糖的反过程称为碳反应。光合作用在叶绿体中进行，光反应的场所位于类囊体膜，碳反应的场所在叶绿体基质。光反应的发生需要叶绿体类囊体膜上的色素、酶参与。光合作用和呼吸作用是植物两大重要的代谢反应，光合作用与呼吸作用的差值称为净光合作用。图中①为碳反应，②为光反应，③为糖酵解+柠檬酸循环，④为电子传递链。a为糖类，b为O2。【详解】（1）①过程为三碳酸的还原，三碳酸变成三碳糖的过程需要消耗ATP和NADPH，因此ATP转化成ADP时，产生的磷酸基团被3-磷酸甘油酸（三碳酸）接受。三碳糖是卡尔文循环形成的第一个糖，此后的许多反应都是为了再生RuBP（核酮糖二磷酸）。（2）图中X1H为还原氢，生成于糖酵解和柠檬酸循环，在电子传递链中被消耗，与氧气反应生成水，因此转化成X1发生于过程④（电子传递链）中。电子传递链放出大量的能量，此过程在线粒体内膜上发生，因此产生ATP所需的酶存在于线粒体内膜上。（3）③和④为呼吸产生的ATP总量，正常情况下，叶肉细胞的光合作用大于呼吸作用，有有机物的积累，因此一个叶肉细胞中光合作用过程产生的ATP总量大于③和④产生的ATP总量。在消耗等量葡萄糖的情况下，③和④过程产生的ATP总量为2+2+26=30，约等于厌氧呼吸（2ATP）的15倍。（4）若将该植物置于光照、温度等条件均适宜的密闭容器中，一段时间后，CO2含量减少，碳反应减慢，RuBP含量升高。RuBP与CO2生成3-磷酸甘油酸，RuBP含量升高，但CO2含量减少，3-磷酸甘油酸的生成速率将减慢。【点睛】熟悉光合作用和呼吸作用的过程是解答本题的关键。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维