广东省云浮2023年高考仿真卷生物试卷含解析

2023年高考生物模拟试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列有关生物学实验的叙述，正确的是A．调查土壤中小动物类群的丰富度时，通常采用样方法或标志重捕法B．验证淀粉解对淀粉和麦芽糖的催化作用时，用斐林试剂检测无法区分实验结果C．探究低温诱导植物细胞染色体数目变化的实验中，用卡诺氏液可将染色体染色D．调査人群中某遗传病的发病率时，最好选取群体中发病率较高的多基因遗传病2．元素和化合物是组成细胞的物质基础，下列叙述错误的是（）A．核糖体、ATP和染色体中含有的五碳糖不都是核糖B．细胞内的无机盐主要以离子形式存在，具有维持细胞酸碱平衡的功能C．蛋白质和DNA具有多样性的共同原因是都具有不同的空间结构D．细胞中的微量元素如Fe、Mn、Zn、Cu等含量虽然很少，但功能上不可缺少3．某种蛾易被蝙蝠捕食，千百万年之后，一部分蛾感受到蝙蝠的超声波时，便会运用复杂的飞行模式，逃脱危险，其身体也发生了一些改变。蛾的变化也影响蝙蝠回声定位系统与捕食策略的改进。当变化后的蛾与祖先蛾人工交配后，产出的受精卵不具有生命力。下列相关叙述不正确的是（）A．变化后的蛾与祖先蛾存在生殖隔离B．蛾复杂飞行模式的形成是自然选择的结果C．蛾与蝙蝠间发生了协同（共同）进化D．祖先蛾种群的基因频率未发生改变4．下列有关高等动物细胞以葡萄糖为底物进行细胞呼吸过程的叙述，错误的是（）A．细胞呼吸作用释放的能量部分存储在ATP中B．细胞有氧呼吸和无氧呼吸的第一阶段都会产生[H]C．人在剧烈运动时可通过分解肌糖原释放部分能量D．若细胞呼吸消耗的O2量等于生成的CO2量，则细胞只进行有氧呼吸5．水分子存在两种跨膜运输机制，一种是通过脂双层的自由扩散，另一种是通过水通道蛋白跨膜运输。研究者据此进行了如下实验。实验分为两组，甲组:肾小管上皮细胞+生理盐水配制的蛋白酶溶液；乙组:肾小管上皮细胞+等量的X。将甲、乙两组制成装片，在盖玻片一侧滴加清水，另一侧用吸水纸吸引，显微镜下观察在相同时间内两组细胞发生破裂的情况。下列说法错误的是（）A．乙组为对照组，其中的X为生理盐水B．该实验的目的是探究肾小管上皮细胞的吸水方式C．若甲组细胞破裂数小于乙组，则说明水分子仅通过通道蛋白进入肾小管上皮细胞D．若甲、乙两组细胞破裂数差异不大，则说明水分子主要以自由扩散进入肾小管上皮细胞6．下列有关蛋白质的叙述，正确的是（）A．生物膜上的蛋白质的功能一定是作为载体或通道蛋白B．氨基酸序列相同的多肽链可能形成功能不同的蛋白质分子C．人体内环境中的某些蛋白具有催化丙酮酸氧化分解的功能D．在噬菌体侵染细菌实验中，“S”或“P”均可被用于标记蛋白质7．果蝇的等位基因A､a和B､b分别控制一对相对性状，都位于常染色体上｡基因型为AaBb的雌果蝇会产生4种基因型的卵细胞，而该基因型的雄果蝇只产生2种基因型的精子｡下列相关叙述最合理的是（）A．雄果蝇体细胞中的基因A､a和B､b所处的染色体没有同源染色体B．基因型为AaBb的雌果蝇能产生4种卵细胞可能是因为发生了交叉互换C．基因型为AaBb的雌､雄果蝇分别进行测交，后代的性状类型相同D．基因型为AaBb的雌､雄果蝇交配，其后代会出现9∶3∶3∶1的性状分离比8．（10分）某种植物的花色同时受A、a与B、b两对基因控制，基因型为A_bb的植株开蓝花，基因型为aaB的植株开黄花。将蓝花植株（♀）与黄花植株（♂）杂交，取F1红花植株白交得F2。F2的表现型及其比例为红花：黄花：蓝花：白花=7：3：1：1．则下列分析中正确的是（）A．F2中基因型为Aa的杂合子致死B．F1产生的配子中某种雌雄配子同时致死C．亲本蓝花植株和F1蓝花植株的基因型一定为AAbbD．F1产生的配子中Ab雌配子或Ab雄配子致死二、非选择题9．（10分）回答下列有关植物激素的问题。（1）当植物表现出顶端优势时，顶芽产生的生长素运到相邻侧芽________(填“需要”或“不需要”)消耗ATP。（2）某研究小组探究避光条件下生长素浓度对燕麦胚芽鞘生长的影响。胚芽鞘去顶静置一段时间后，将含有不同浓度生长素的琼脂块分别放置在不同的去顶胚芽鞘一侧，一段时间后测量并记录弯曲角度(α)。下图为实验示意图。①α的范围为________________(填180°≥α>0°、180°≥α≥90”或90°≥α>0)。②在两组实验中若α相同，则琼脂块中含有生长素的浓度________(填一定或不一定)相同。（3）有科学家认为根的向地生长不仅与生长素有关，还与乙烯的作用有关。为了研究二者的关系，科研人员做了这样的实验：将某种开花植物的根尖放在含不同浓度生长素的培养液中，并加入少量蔗糖作为能源。发现在这些培养液中出现了乙烯，且生长素浓度越高，培养液中乙烯的浓度也越高，根尖生长所受的抑制也越强。此实验设计不够严谨，该如何改进？______________________________________________。据此实验结果，推断水平放置的植物其根向重力生长的原因是______________________________________。10．（14分）粮食安全是国家安全的根本，科学种粮是粮食安全的保障。水稻是我国种植面积最大、产量最多的粮食作物。生产实践表明，干旱程度与水稻产量呈负相关。请回答：（1）随着干旱加剧，经细胞壁和__________（填结构名称）流入水稻根细胞液泡的水分减少，导致_________（选填“细胞内液”、“细胞液”或“细胞外液”）的渗透压升高。

（2）长期干旱条件下，水稻叶片提前变黄，这是因为分布在叶绿体________上的叶绿素含量降低。叶片变黄导致光反应为暗反应提供的______减少，水稻产量降低。（3）科研小组测定不同土壤含水量条件下水稻根和叶细胞内SOD（超氧化物歧化酶，能清除氧自由基和过氧化氢，起抗衰老作用）活性，结果如下图。据图可得出的结论是______。11．（14分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。12．已知果蝇的伊红眼对紫眼为完全显性，由一对等位基因A、a控制，长翅对残翅为完全显性，由另一对等位基因B、b控制，两对等位基因均位于常染色体上。现有纯合伊红眼长翅果蝇和纯合紫眼残翅果蝇杂交，所得F1雌雄个体相互交配，多次重复实验，统计F2的表现型及比例都近似如下结果：伊红眼长翅：伊红眼残翅：紫眼长翅：紫眼残翅=134：13：13：36；上述亲本的反交实验结果也是如此。据实验结果回答问题：（1）控制伊红眼和紫眼的等位基因的关系是___________A．两对等位基因均遵循分离定律B．两对等位基因间遵循自由组合定律C．两对等位基因所在的染色体可能发生了自由组合D．两对等位基因所在的染色体可能发生了交叉互换（2）针对上述实验结果提出了假说：①控制上述性状的两对等位基因位于________对同源染色体上。②F1通过减数分裂产生的雄配子和雄配子各有4种，且基因型和比例是AB：Ab：aB：ab=6：1：1：6。③雌雄配子________结合。为验证上述假说，请利用上述实验中的果蝇设计一个简单的杂交实验并预期实验结果：杂交实验：__________________________________________________________________预期实验结果（子代表现型及比例）：__________________________________________

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

A、调查土壤中小动物类群的丰富度时，通常采用取样器取样法，A错误；

B、麦芽糖和其水解产物葡萄糖都能属于还原糖，都能与斐林试剂产生砖红色沉淀，因此验证淀粉解对淀粉和麦芽糖的催化作用时，用斐林试剂检测无法区分实验结果，B正确；

C、探究低温诱导染色体加倍的实验中，卡诺氏液用于材料的固定，C错误；

D、调査人群中某遗传病的发病率时，最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病，D错误。

故选B

2、C【解析】

1、核糖体、ATP中含有的五碳糖都是核糖，染色体中含有的五碳糖是脱氧核糖。2、无机盐离子的作用有：（1）维持细胞和生物体的生命活动有重要作用；（2）维持细胞的酸碱平衡；（3）维持细胞的渗透压；（4）无机盐对维持细胞的形态和功能有重要作用等。3、蛋白质结构多样性与组成蛋白质的氨基酸的种类、数目、排列顺序及蛋白质的空间结构有关，根本原因是DNA分子多样性，多肽中乙肽键数=氨基酸数目-蛋白质结构多样性决定功能多样性。【详解】A、核糖体、ATP中含有的五碳糖都是核糖，染色体中含有的五碳糖是脱氧核糖，A正确；B、细胞内的无机盐主要以离子形式存在，缓冲对具有维持细胞酸碱平衡的功能，B正确；C、蛋白质具有多样的空间结构，而DNA具有特定的双螺旋结构，C错误；D、细胞中的微量元素如Fe、Mn、Cu、Zn等含量虽然很少，但不可缺少，D正确。故选C。3、D【解析】

本题考查的是与进化有关的知识，现代生物进化理论认为：种群是进化的基本单位，生物进化的实质是基因频率的定向改变，突变和基因重组是生物进化的原材料，自然选择决定生物进化的方向，隔离是物种形成的必要条件，共同进化导致生物多样性的形成。【详解】生殖隔离指的是种群间的个体不能自由交配，或者交配后不能产生出可育后代，由题干信息可知变化后的蛾与祖先蛾人工交配后，产出的受精卵不具有生命力，说明变化后的蛾与祖先蛾存在生殖隔离，A正确；由于某种蛾易被蝙蝠捕食，只有感受到蝙蝠的超声波时，会运用复杂的飞行模式的蛾才有可能逃脱危险，被保留下来，不具有这种能力的蛾就被蝙蝠吃掉而淘汰了，因此蛾复杂飞行模式的形成是自然选择的结果，B正确；共同进化是指不同物种之间，生物与无机环境之间在相互影响中不断进化和发展的过程，在蛾与蝙蝠的生存斗争中，这两个物种相互选择，实现了共同进化，C正确；祖先蛾种群在进化过程中保留了一部分适应能力强的个体，淘汰了适应能力弱的个体，因此其种群的基因频率发生发改变，D错误；因此选D。【点睛】熟悉现代生物进化理论的基本内容，并能从题干中获取有效信息，是解题的关键。4、D【解析】

有氧呼吸指细胞在氧气的参与下，通过多种酶的催化作用，把葡萄糖等有机物彻底氧化分解，产生二氧化碳和水，生成大量能量的过程。【详解】A、细胞呼吸作用释放的能量大部分以热能的形式散失，少部分存储在ATP中，A正确；B、细胞有氧呼吸和无氧呼吸的第一阶段相同，都产生[H]和少量的能量，B正确；C、糖原是能源物质，人在剧烈运动时可通过分解肌糖原释放部分能量，C正确；D、若细胞呼吸消耗的O2等于生成的CO2，细胞可能同时存在有氧呼吸和无氧呼吸，因为无氧呼吸不一定产生CO2，D错误。故选D。【点睛】对于人来说，只有有氧呼吸或有氧呼吸和无氧呼吸共存时，氧气的消耗量都等于二氧化碳的释放量。5、C【解析】

题意分析，本实验中的蛋白酶的作用是要破坏肾小管细胞膜上的水通道蛋白，结合题意可知实验的目的是探究水进出肾小管上皮细胞的方式，实验中若甲组和乙组破裂的细胞数目基本相同，说明水跨膜不需要通道蛋白，进而可知水通过肾小管上皮细胞的方式主要是自由扩散；若甲组极少的细胞发生破裂，说明无通道蛋白水就不能跨膜，进而可知肾小管上皮细胞主要依赖水通道蛋白吸水，若出现甲乙两组均出现一定破裂的细胞，且甲组破裂的细胞数量比乙组少，说明肾小管上皮细胞通过两种方式吸收水分。【详解】A、根据实验设计的单一变量原则可知，乙组为对照组，其中的X为生理盐水，A正确；B、根据实验操作中蛋白酶的作用可知，蛋白酶会将细胞膜上的水通道蛋白分解，可推测该实验的目的是探究肾小管上皮细胞的吸水方式，B正确；C、若甲组细胞破裂数小于乙组，则说明水分子除了通过自由扩散进入细胞外，还会通过通道蛋白进入肾小管上皮细胞，C错误；D、在甲组水通道蛋白被破坏的情况下，甲、乙两组细胞破裂数差异不大，可推测水分子主要以自由扩散进入肾小管上皮细胞，D正确。故选C。6、B【解析】

蛋白质的基本单位是氨基酸，每个氨基酸至少含有一个氨基和一个羧基，且至少有一个氨基和一个羧基连在同一个碳原子上。不同氨基酸的主要区别在于R基不同，蛋白质具有多种功能，如调节作用（激素）、免疫作用（抗体）、运输作用（载体）、催化作用（酶）等。【详解】A、生物膜上的蛋白质的功能可能是作为载体或者通道蛋白、也可能具有催化功能、识别功能等，A错误；B、氨基酸序列相同的多肽链空间结构可能不同，可能形成功能不同的蛋白质分子，B正确；C、催化丙酮酸氧化分解的蛋白质（酶）分布在细胞中，C错误；D、在噬菌体侵染细菌实验中，35S被用于标记蛋白质，32P被用于标记核酸，D错误。故选B。7、B【解析】

根据题干中“AaBb的雌果蝇会产生4种基因型的卵细胞，而该基因型的雄果蝇只产生2种基因型的精子”，说明Aa和Bb在一对同源染色体上。【详解】A、根据分析雄果蝇体细胞中的基因A､a和B､b在一对同源同源染色体上，A错误；B、如果Aa和Bb在一对同源染色体上，在减数分裂过程中产生四种配子，可能是发生了交叉互换，B正确；C、由于雄性只能产生两种配子，所以测交后代有两种表现型，而雌性可以产生四种配子，所以测交后代能产生四种表现型，C错误；D、由于Aa和Bb在一对同源染色体上，不遵循自由组合定律，所以后代的比例不会出现9∶3∶3∶1，D错误。故选B。【点睛】本题需要考生掌握自由组合定律的实质，分析出在卵细胞产生过程中发生了交叉互换，而在精子产生过程中没有交叉互换。8、D【解析】

基因分离定律和自由组合定律的实质：进行有性生殖的生物在进行减数分裂产生配子的过程中，位于同源染色体上的等位基因随同源染色体分离而分离，分别进入不同的配子中，随配子独立遗传给后代，同时位于非同源染色体上的非等位基因进行自由组合，按照自由组合定律，基因型为AaBb个体产生的配子类型及比例是AB：Ab：aB：ab=1：1：1：1，自交后代A_B_：A_bb：aaB_：aabb=9：3：3：1。【详解】A、由于子二代A_B_：aaB_：A_bb：aabb=7：3：1：1，与9：3：3：1相比，A_B_少了2，A_bb少了2，如果是Aa__的杂合子致死，则A_B_致死的个体应该是2AaBB、4AaBb，A_B_应该少6，A错误；B、如果子一代产生的某种基因型的雌配子、雄配子都致死，则后代的杂交组合是9种，而实际上子二代的杂交组合是12种，B错误；CD、由于子二代A_B_：aaB_：A_bb：aabb=7：3：1：1，与9：3：3：1相比，A_B_少了2，A_bb少了2，最可能的原因是Ab的雄配子或雌配子致死，因此不存在AAbb的纯合体，亲本蓝花植株和F2蓝花植株的基因型一定为Aabb，C错误，D正确。故选D。二、非选择题9、需要90°≥α＞0°不一定该实验设计不够严谨，缺乏对照，为使实验更严谨，还需将另一些等量的根尖放在含等量蔗糖但不含生长素的培养液中，作为对照组高浓度生长素诱导根细胞合成了乙烯，乙烯抑制了根近地侧的生长【解析】

生长素的生理作用及特点：（1）不同器官生长素促进生长的最适浓度不同不同器官对生长素敏感性不同，根最敏感，芽居中，茎最不敏感，同一浓度的生长素作用于不同器官上，引起的生理功效不同。（2）不同浓度的生长素对同一器官所起作用不同。【详解】（1）当植物表现出顶端优势时，顶芽产生的生长素运到相邻侧芽是一种主动运输，需要消耗能量。（2）①结合题图分析可知，α的范围为90°≥α＞0°。②生长素生理作用具有两重性，故在两组实验中若α相同，则琼脂块中含有生长素的浓度不一定相同。（3）该实验设计不够严谨，缺乏对照，为使实验更严谨，还需将另一些等量的根尖放在含等量蔗糖但不含生长素的培养液中，作为对照组；据实验结果可推断水平放置的植物其根向重力生长的原因是高浓度生长素诱导根细胞合成了乙烯，乙烯抑制了根近地侧的生长。【点睛】本题结合实验过程图和曲线图，考查生长素作用以及作用的两重性，要求考生识记生长素的作用，掌握生长素作用的两重性。10、原生质层（细胞膜、液泡膜和它们之间的细胞质）细胞液类囊体薄膜ATP和[H]随着土壤含水量降低，根和叶细胞内的SOD活性都升高，并且叶细胞内的SOD活性更高【解析】

1、温度对光合作用的影响：在最适温度下酶的活性最强，光合作用强度最大，当温度低于最适温度，光合作用强度随温度的增加而加强，当温度高于最适温度，光合作用强度随温度的增加而减弱。2、二氧化碳浓度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随二氧化碳浓度的增加而增强。当二氧化碳浓度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。3、光照强度对光合作用的影响：在一定范围内，光合作用强度随光照强度的增加而增强。当光照强度增加到一定的值，光合作用强度不再增强。【详解】（1）水分从外界进入液泡，需要经过的细胞结构包括细胞壁和原生质层（细胞膜、液泡膜和它们之间的细胞质）；随着干旱的加剧，根细胞能从外界获取的水分减少，导致进入液泡的水分减少，所以细胞液浓度增大，进而渗透压升高。（2）长期干旱条件下，由于叶绿素合成受阻并出现分解，导致分布在类囊体薄膜上的叶绿素含量下降，所以叶片提前变黄；叶绿素能够吸收光能并用于光反应，生成ATP和[H]，提供给暗反应进行三碳化合物的还原，所以叶片变黄导致光反应为暗反应提供的ATP和[H]减少。（3）从图中可以看出，随着土壤含水量降低，根和叶细胞内的SOD活性都升高，并且叶细胞内的SOD活性更高。【点睛】此题主要考查光合作用的过程以及影响光合作用的环境因素的相关知识，识记光合作用的过程是解答本题的关键。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒