实验神经干动作电位专家讲座

试验一

神经干动作电位引导及传导速度和不应期测定

实验神经干动作电位专家讲座第1页【试验目标】

1.学习和掌握制备蛙类神经干制作方法。

2.①学习使用BL-420生物机能试验系统引导蛙类坐骨神经干动作电位方法。

②分析神经干动作电位基本波形、幅值、时程，测定神经兴奋传导速度和不应期。

实验神经干动作电位专家讲座第2页

【试验原理】神经干动作电位是神经兴奋客观标志。它是由粗细不等、兴奋性不一样神经纤维所组成，故在神经干表面统计动作电位为复合性动作电位。这种电位幅度在一定范围内可随刺激强度增加而加大。实验神经干动作电位专家讲座第3页处于兴奋部位膜外电位负于静息部位，当神经冲动经过后，该处电位又恢复到静息水平，这一可扩布、一过性电位改变，即动作电位。假如将两个引导电极分别置于神经干表面，当神经干一端兴奋时，兴奋波先后经过两个引导电极处，统计到两个方向相反电位偏转波形，称为双向动作电位。实验神经干动作电位专家讲座第4页【试验对象】

蟾蜍或蛙

【试验器材】蛙类手术器械（粗剪刀，眼科剪，手术剪，镊子，探针，蜡盘，玻璃分针，大头针，）培养皿，神经屏蔽盒，引导线，刺激电极，任氏液，BL-420生物机能试验系统，废液缸，张力换能器。实验神经干动作电位专家讲座第5页【试验步骤】

1.制备坐骨神经腓神经标本

（1）破坏脑脊髓

（2）剪除躯干上部及内脏

（3）剥皮及分离下肢

（4）制备坐骨神经-腓神经标本。

实验神经干动作电位专家讲座第6页实验神经干动作电位专家讲座第7页实验神经干动作电位专家讲座第8页实验神经干动作电位专家讲座第9页实验神经干动作电位专家讲座第10页实验神经干动作电位专家讲座第11页2.仪器连接

（1）开机并开启BL-420生物机能试验系统

（2）本试验采取双通道统计，将两对引导电极分别与通道1和通道2连接，刺激电极连接至刺激器输出接口。

连接方法如见图：实验神经干动作电位专家讲座第12页

BL-420生物机能试验系统神经屏蔽盒CH1CH2

刺激输出刺激电极地线C1C2C3C4

仪器连接示意图实验神经干动作电位专家讲座第13页实验神经干动作电位专家讲座第14页（3）将坐骨神经—腓神经标本放入神经屏蔽盒（坐骨神经中枢端放在刺激电极上，外周端放在引导电极上）。实验神经干动作电位专家讲座第15页【试验项目】1、观察细胞外引导双相动作电位波形特点、测定幅值及时程。2、测定神经干动作电位传导速度。3、测定不应期：记下第二个动作电位刚消失时两个刺激脉冲之间波间隔，此时波间隔值即为绝对不应期。用不应期减去绝对不应期即可得出相对不应期实验神经干动作电位专家讲座第16页【结果分析】1.解释双相动作电位产生机制，统计动作电位时程、幅值。(3)2.测定神经干动作电位传导速度:V=ΔS/ΔT(m/s)。（4）3.动作电位不应期测量（5）4.刺激强度与复合动作电位幅值关系（6）实验神经干动作电位专家讲座第17页【注意事项】1.破坏蟾蜍脑和脊髓时，应预防其耳后腺及皮肤分泌蟾酥毒液射入操作者眼内或污染试验标本。2.制备神经标本过程中，应防止用手捏神经或镊子夹伤神经。3.为了预防神经标本干燥，制备过程中需不停滴加任氏液，使其保持良好兴奋性。实验神经干动作电位专家讲座第18页4.将神经干放入屏蔽盒之前，用刀片轻刮引导电极，以确保电极和神经干亲密接触。5．制作标本过程中，切勿伤及神经干及其分支，防止牵拉和其它不良刺激，6．试验过程中，应经常在标本上滴加任氏液以保持湿润，使其保持良好兴奋性。7．每次刺激标本以后，必须让肌肉休息1-2分钟，以防标本疲劳。实验神经干动作电位专家讲座第19页双向动作电位实验神经干动作电位专家讲座第20页传导速度：动作电位在神经干传导速度，可用电生理学方法进行测量。测定神经冲动在神经干上传导距离（S）和经过该距离所需时间（t），即可计算出神经冲动传导速度(V)，V＝ΔS/Δt。实验神经干动作电位专家讲座第21页

不应期：当双脉冲间隔时间为20ms左右时，示波器荧光屏上展现两个一样大小动作电位。逐步缩短双脉冲之间间隔，第二个动作电位逐步向第一个动作电位靠近，振幅也随之降低，最终可因落在第一个动作电位绝对不应期内而完全消失。实验神经干动作电位专家讲座第22页刺激强度与复合动作电位幅值关系

一根神经纤维在受到阈值以上刺激产生动作电位不伴随刺激强度增大而增大,不过坐骨神经干是有许多神经纤维组成,在受到阈值以上刺激时,因为引发不一样数目神经纤维产生动作电位,伴随刺激强度增大,神经纤维产生动作电位数目也越多,动作电位幅度也就越大,当全部神经纤维都产生动作电位时,动作电位幅度就不会增大了．

故在一定范围内,坐骨神经干动作电位幅度为何伴随刺激强度增大而增大．实验神经干动作电位专家讲座第23页试验汇报要求神经干动作电位引导及其传导速度和不应期测定一、试验目标二、试验器材三、试验步骤四、试验结果1.动作电位时程

及幅度

2.写出阈刺激

、最大刺激强度

；3.相对不应