定氮仪法测定含量

常量法测定含量贰叁壹目录基础知识必备知识拓展知识精诚制药本草济民基础知识氮测定法系依据含氮有机物经硫酸消化后，生成的硫酸铵被氢氧化钠分解释放出氨，后者借水蒸气被蒸馏入硼酸液中生成硼酸铵，最后用强酸滴定，依据强酸消耗量可计算出供试品的氮含量。基础知识《中国药典》收载有三种测定方法：常量法、半微量法和定氮仪法。（一）第一法（常量法）（二）第二法（半微量法）（三）第三法（定氮仪法）必备知识1、称量取供试品适量（相当于含氮量25~30mg)，精密称定，供试品如为固体或半固体，可用滤纸称取，并连同滤纸置干燥的500ml凯氏烧瓶中；2、消化在凯氏烧瓶中依次加入硫酸钾（或无水硫酸钠）10g和硫酸铜粉末0.5g，再沿瓶壁缓缓加硫酸20ml（保证样品在硫酸液面下）；在凯氏烧瓶口放一小漏斗并使凯氏烧瓶成45斜置，用直火缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，强热至沸腾，俟溶液成澄明的绿色后，除另有规定，继续加热30分钟，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，振摇使混合，放冷。第一法：常量法必备知识3、蒸馏沿瓶壁加40%氢氧化钠溶液75ml，注意使沿瓶壁流至瓶底，自成一液层，加锌粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接（氮气球可防止碱液溅入硼酸吸收液）；另取2%硼酸溶液50ml，置500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴；将冷凝管的下端插入硼酸溶液的液面下，轻轻摆动凯氏烧瓶，使溶液混合均匀（防止温度骤然变化引起硼酸接收液倒吸），加热蒸馏（蒸馏时不宜泡沸过高，以免溅满氮气球），至接收液的总体积约为250ml时，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏（蒸馏过程中不可突然降低温度，以免硼酸吸收液倒吸）。第一法：常量法必备知识4、滴定馏出液用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于1.401mg的N。5、空白试验照供试品消化、蒸馏、滴定的全过程，以相同条件下做空白试验，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至相同的终点，其读数用于校正供试品滴定的读数。第一法：常量法必备知识6、注意事项（1）消化过程应在通风橱中进行（2）蒸馏装置连接后应严密（3）消化时，若发现瓶壁上有黑点，可适当转动烧瓶，使硫酸回流时将黑点洗下，以保证消化完全（4）消化液应防冷后，再沿瓶壁缓缓加水，防止供试液局部过热爆沸，冲出瓶外（5）蒸馏过程中若无黑色CuO析出，说明加入碱量不足，应补足碱量或重做实验第一法：常量法必备知识6、注意事项（6）配制40%氢氧化钠溶液时，宜边加振摇，避免未溶解部分沉积于容器底部而难于溶解（7）约80%以上的氨在最初1~2min内蒸出，初蒸速度不宜太快，以免氨蒸出后未能及时被吸收而逸失（8）锥形瓶加入硼酸溶液和指示剂后应显酒红色；如显绿色，说明锥形瓶有碱性物质污染（9）蒸馏出的氨接收液应尽快滴定，避免放置时间过长，影响测定结果（10）空白值常为0.02~0.3ml，空白值为0ml亦属正常。第一法：常量法必备知识7、记录与计算：应记录天平型号及室温和相对湿度，供试品与试药的名称、规格及取用量，滴定液的名称（可用盐酸滴定液），F值及消耗量（ml）式中T为滴定度，mg；Vs与V0分别为供试品与空白滴定时硫酸滴定液消耗的体积，ml；F为滴定液的F值；W为供试品的重量，mg。第一法：常量法拓展知识附注：1、取用的供试品如在0.1以上时，应适当增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相应地增加40%氢氧化钠的用量2、酰胺碱性水解法不属于本测定法范围3、空白值常为0.02~0.3ml，空白值为0ml亦属正常4、操作环境应避免氨及碱性气体的干扰半微量法测定含量贰叁壹目录基础知识必备知识拓展知识精诚制药本草济民基础知识氮测定法系依据含氮有机物经硫酸消化后，生成的硫酸铵被氢氧化钠分解释放出氨，后者借水蒸气被蒸馏入硼酸液中生成硼酸铵，最后用强酸滴定，依据强酸消耗量可计算出供试品的氮含量。基础知识《中国药典》收载有三种测定方法：常量法、半微量法和定氮仪法。（一）第一法（常量法）（二）第二法（半微量法）（三）第三法（定氮仪法）必备知识1、连接仪器连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒，从D漏斗加水约50ml，关闭G夹，开放冷凝水，煮沸A瓶中的水，当蒸气从冷凝管尖端冷凝而出时，移去火源，关H夹，使C瓶中的水反抽到B瓶，开G夹，放出B瓶中的水，关B瓶及G夹，将冷凝管尖端插入约50ml水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。如此将仪器内部洗涤2~3次。第二法：半微量法蒸馏装置A:1000ml圆底烧瓶；B:安全瓶；C:连有氮气球的蒸馏器；D:漏斗；E:直形冷凝管；F:100ml锥形瓶；G和H:橡皮管夹必备知识2、称量取供试品适量（相当于含氮量1.0~2.0mg），精密称定，置干燥的30~50ml凯氏烧瓶中，供试品如为固体或半固体，可用定量滤纸包裹加入，也可直接称入；3、消化在凯氏烧瓶中依次加入硫酸钾（或无水硫酸钠）0.3g和30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml（保证样品在硫酸液面下）；在凯氏烧瓶口放一小漏斗并使凯氏烧瓶成45斜置，用直火缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，强热至沸腾，俟溶液成澄明的绿色后，除另有规定，继续加热30分钟，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，振摇使混合，放冷。第二法：半微量法必备知识4、蒸馏取2%硼酸溶液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端插入液面下。然后，将凯氏烧瓶中内容物经由D漏斗转入C蒸馏瓶中，用水少量淋洗凯氏烧瓶及漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10ml，用少量水再洗漏斗数次，关G夹，加热A瓶进行蒸气蒸馏，至硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续馏约10分钟后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。第二法：半微量法蒸馏装置A:1000ml圆底烧瓶；B:安全瓶；C:连有氮气球的蒸馏器；D:漏斗；E:直形冷凝管；F:100ml锥形瓶；G和H:橡皮管夹必备知识5、滴定馏出液用硫酸滴定液(0.005mol/L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白（空白和供试品所得馏出液的容积应基本相同，70~75ml）试验校正。每lml硫酸滴定液（0.005mol/L）相当于0.1401mg的N。取用的供试品如在0.lg以上时，应适当增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相应地增加40%氢氧化钠溶液的用量。6、空白试验照供试品消化、蒸馏、滴定的全过程，以相同条件下做空白试验，用硫酸滴定液（0.005mol/L）滴定至相同的终点，其读数用于校正供试品滴定的读数。第二法：半微量法必备知识7、注意事项（1）消化过程应在通风橱中进行（2）蒸馏装置连接后应严密（3）消化时，若发现瓶壁上有黑点，可适当转动烧瓶，使硫酸回流时将黑点洗下，以保证消化完全（4）消化液应防冷后，再沿瓶壁缓缓加水，防止供试液局部过热爆沸，冲出瓶外（5）蒸馏过程中若无黑色CuO析出，说明加入碱量不足，应补足碱量或重做实验第二法：半微量法必备知识7、注意事项（6）配制40%氢氧化钠溶液时，宜边加振摇，避免未溶解部分沉积于容器底部而难于溶解（7）约80%以上的氨在最初1~2min内蒸出，初蒸速度不宜太快，以免氨蒸出后未能及时被吸收而逸失（8）锥形瓶加入硼酸溶液和指示剂后应显酒红色；如显绿色，说明锥形瓶有碱性物质污染（9）蒸馏出的氨接收液应尽快滴定，避免放置时间过长，影响测定结果（10）空白值常为0.02~0.3ml，空白值为0ml亦属正常。第二法：半微量法必备知识8、记录与计算：应记录天平型号及室温和相对湿度，供试品与试药的名称、规格及取用量，滴定液的名称（可用盐酸滴定液），F值及消耗量（ml）式中T为滴定度，mg；Vs与V0分别为供试品与空白滴定时硫酸滴定液消耗的体积，ml；F为滴定液的F值；W为供试品的重量，mg。第二法：半微量法拓展知识附注：1、蒸馏前应蒸洗蒸馏器15分钟以上。2、硫酸滴定液(0.005mol/L)的配制精密量取硫酸滴定(0.05mol/L)100ml，置于1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。3、取用的供试品如在0.1以上时，应适当增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相应地增加40%氢氧化钠的用量。4、酰胺碱性水解法不属于本测定法范围。5、空白值常为0.02~0.3ml，空白值为0ml亦属正常。6、操作环境应避免氨及碱性气体的干扰。定氮仪法测定含量贰叁壹目录基础知识必备知识拓展知识精诚制药本草济民基础知识氮测定法系依据含氮有机物经硫酸消化后，生成的硫酸铵被氢氧化钠分解释放出氨，后者借水蒸气被蒸馏入硼酸液中生成硼酸铵，最后用强酸滴定，依据强酸消耗量可计算出供试品的氮含量。基础知识《中国药典》收载有三种测定方法：常量法、半微量法和定氮仪法。（一）第一法（常量法）（二）第二法（半微量法）（三）第三法（定氮仪法）必备知识本法适用于常量及半微量法测定含氮化合物中氮的含量。半自动定氮仪由消化仪和自动蒸馏仪组成；全自动定氮仪由消化仪、自动蒸馏仪和滴定仪组成。第三法：定氮仪法必备知识第三法：定氮仪法1、消化根据供试品的含氮量参考常量法（第一法）或半微量法(第二法)称取样品置消化管中，依次加入适量硫酸钾、硫酸铜和硫酸，把消化管放入消化仪中，按照仪器说明书的方法开始消解[通常为150℃，5分钟（去除水分）；350℃，5分钟（接近硫酸沸点）；400℃，60~80分钟]至溶液成澄明的绿色，再继续消化10分钟，取出，冷却。必备知识第三法：定氮仪法2、蒸馏、滴定将配制好的碱液、吸收液和适宜的滴定液分别置自动蒸馏仪相应的瓶中，按照仪器说明书的要求将已冷却的消化管装入正确位置，关上安全门，连接水源，设定好加入试剂的量、时间、清洗条件及其他仪器参数等。如为全自动定氮仪，即开始自动蒸馏和滴定。如为半自动定氮仪，则取馏出液照第一法或第二法滴定，测定氮的含量。拓展知识定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理。通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含