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文档简介
真菌的基本性状
检验医学院、生命科学学院真菌与我们的生活
☆环境的再循环
有些真菌像某些微生物一样是分解者,就是一些分解死亡生物的有机物的一类生物。☆食物与真菌
有些真菌也成为重要的食物来源。可食用的蕈菌有200多种,如冬菇、草菇、木耳、云耳等。真菌所侵入后的生(动)物复合体如冬虫夏草。真菌用于食物加工,例如酵母菌用于面包等加工,酿酒也需要真菌。
☆抗病的真菌
亚历山大·弗莱明由于一次幸运的过失而发现了青霉素。分布在自然界的真菌约50多万种,其中仅200余种对人类致病。
感染率的上升与人群免疫力下降、医院感染及抗生素滥用引起菌群失调等有关。真菌感染的临床表现
真菌,即一般人俗称的霉菌,普遍存在人们日常生活中的各个角落:过期的面包,雨天没晾干的鞋子,或是摆在桌上忘了吃的橘子几天后当上面开始出现白白毛毛的东西时,这就是长真菌—发霉了。
☆皮肤病:皮癣菌感染是指包括几种不同属或不同种的真菌,它们会感染我们皮肤的最表层(角质层)、指甲或头发。临床上造成的疾病有足癣(香港脚)、股癣、体癣、头癣、甲癣(灰指甲)等。也可感染真皮或皮下组织。☆心灵的窗口—“眼睛”
真菌性角膜炎,早期溃疡为浅在性,表面为灰白或乳白色“苔垢”状物所覆盖,外观干燥而少光泽,稍隆起,“苔垢”状物易剔去,基质层有菌丝繁殖,浸润较为致密,有时浸润边缘因胶原溶解而出现浅沟。在浸润向深部发展时,组织坏死脱落,形成明显溃疡。随着真菌毒素侵入前房,引起虹膜炎及前房积脓,晚期积脓质地粘稠,其内常含真菌。习惯带隐形眼镜的女生注意☆尿路感染:念珠菌导致的膀胱炎可能引起尿频,尿急,尿痛和耻骨上疼痛.血尿常见☆真菌性阴道炎:真菌性阴道炎症状表现为外阴阴道奇痒,白带粘稠,呈豆渣样、凝乳状或白膜状,阴道粘膜红肿,严重时形成浅溃疡。☆真菌性肠炎:真菌性肠炎属于深部真菌感染而致病。在结肠内窥镜下,有的可见到肠腔痉挛或有较多的黄白色稠性分泌物。有的肠壁可见多个表面呈黄色的溃疡改变。出现各种机会性病原体感染真菌的结构真菌(fungi):属于真核细胞型微生物。细胞结构比较完整,有细胞壁、完整的核和较完善的细胞器(如线粒体、过氧化物体和高尔基体等)。不含叶绿素,无根、茎、叶的分化,少数为单细胞,大多为多细胞,由丝状体和孢子组成★与植物细胞不同:不含叶绿体,无根茎叶★与动物细胞不同:有细胞壁第一节真菌细胞的形态与结构真菌(fungi):真核细胞型微生物,具有被核膜包裹的细胞核和较为完善的细胞器。酵母菌亚显微结构动物细胞显微结构植物细胞显微结构一、细胞壁
主要成分:多糖、少量蛋白质、脂质。
微纤维(细胞壁骨架)--不溶性多糖晶体
多糖
基质--高分子复合物(一)、细胞壁结构与化学组成1、微纤维:区别于高等植物细胞壁的重要特征。丝状真菌微纤
维以几丁质为主,而酵母菌以葡聚糖为主。(1)几丁质(chitin):N-乙酰葡糖胺经β-1,4糖苷键连接而成的直链多聚体,借几丁质酶由UDP-N-乙酰葡糖胺转化而成。(2)葡聚糖:以β-1,3连接的葡萄糖残基为骨架作为支柱,以分支状的β-1,6葡萄糖残基组成侧链。在酵母样真菌中含量最高2、基质(1)多糖:其含量直接影响真菌的形态变化。(2)蛋白质与蛋白质多糖复合物:当蛋白质含量占10%以下时,
与多糖形成糖蛋白,具有酶活性,是细胞壁抗原的分
子基础。(3)甘露聚糖:其抗原决定簇可用于真菌实验诊断。(4)脂质:以磷脂为主,尤以不饱和脂肪酸为多。脂肪的存在可
保持水分不被蒸发。(5)无机盐:主要成分是磷,以脂肪、糖中含量为多,另有少许
钙、镁元素。二、细胞膜与内部结构(一)细胞膜:液体镶嵌模型结构,其特征为双层结构中的磷脂是不恒定的微团结构,并有大量的麦角固醇类(ergosterol)化合物,后者是多稀族化学物,可作为抗真菌药物的分子基础。细胞膜结构微团结构(二)细胞核:细胞内遗传信息的储存、复制和转录的主要场所。体积较小,呈球状,每个细胞通常只有一个核,有的含2个至多个,但在菌丝顶端细胞中常找不到细胞核。真菌细胞核由核被膜、染色质、核仁和核基质等构成。1、核被膜(nuclearenvelope):由核膜和核纤层两部分组
成的被摸,其上有许多核孔(nuclearpore),是细胞核与细胞质进行物质交流的选择性通道。
核膜:由两层厚度约7-8nm的膜组成,两膜间空间称核周间隙(perinuclearspace)。
核纤层:位于核膜内侧,由核纤层蛋白(lamin)组成。2、染色质(chromatin):DNA和组蛋白,(其他蛋白和少量RNA)。其基本组成单位是核小体。3、核仁(nucleolus):一个没有膜包裹的圆形或椭
圆形小体,富含蛋白质和RNA。是真核细胞中合成rRNA和装配核糖体的部位。4、核基质:主要成分是蛋白质,具有支撑细胞核和提供染色质附着点的功能。(三)线粒体:进行氧化磷酸化反应的重要细胞器,是真菌细胞的“动力车间”。(四)微体(microbody):单层膜包裹的、与溶酶体相似的
球形细胞器。
过氧化物酶体,主要依赖于黄素的氧化酶和过氧化氢物,可使细胞免受H2O2损害。
乙醛酸循环体,具有相似的解毒功能。(五)内质网和核糖体内质网(endoplasmicreticulum):与细胞基质相隔离、彼此相通的囊腔和细管系统,由脂质双分子层围成。分为粗面内质网(roughER)和光面内质网(smoothER)。核糖体(ribosome):又称核蛋白体,由60S和40S的两个小亚基组成。核糖体除分布在内质网和细胞基质中外,还分布于线粒体中。内质网结构示意图(六)高尔基体(Golgiapparatus)
真菌中,目前发现存在高尔基体者仅限于根肿菌、前毛壶菌、卵菌和霉菌等少数低等真菌中。高尔基体是协调细胞生化功能和沟通细胞内外环境的一个重要细胞器。原核细胞型微生物与真核细胞型微生物比较
原核细胞型微生物真核细胞型微生物细胞核结构核膜无有核仁无有分裂方式主要以二分裂有丝分裂,减数分裂细胞质结构质膜常缺乏固醇常有固醇内膜较简单,有中介体复杂,有内质网和高尔基体核糖体70S80S呼吸系统质膜或中介体线粒体第二节
真菌的形态特征真菌可分:☆专司营养的营养体☆由营养体转变而成的繁殖体营养体的形态类型:单细胞真菌酵母菌:孢子,无菌丝类酵母菌:芽生孢子,假菌丝多细胞真菌丝状菌(霉菌):孢子和菌丝双相型真菌机体内寄生37℃单细胞型:多细胞型:含动物蛋白培养基酵母菌沙氏培养基25℃ 普通培养基25℃丝状菌一、营养体(一)营养体的形态类型:
酵母型(yeast):单细胞真菌,圆形、卵圆形细胞,以出芽方式繁殖。有些酵母菌在一定条件下出芽后芽管不脱落,形成各种假菌丝。临床常见的酵母菌有隐球菌和假丝酵母菌。
丝状菌(filamentousfungus):多细胞真菌,由菌丝和孢子交织而成,又叫霉菌(mold)。单细胞真菌多细胞真菌假丝酵母菌(二)菌丝(hypha):真菌的营养器官。由成熟的孢子在基质上萌发产出的芽管,进步伸长,并产生分枝而不断生长,或由一段菌丝细胞增长形成。气生菌丝:菌丝向上生长
营养菌丝:菌丝深入培养基中
生殖菌丝:能产生孢子各种真菌菌丝形态各异,借菌丝形态鉴别真菌菌种。菌丝的差别不仅表现在菌丝无色透明或有色、暗色,有隔或无隔,直径大小等,其菌丝体在生长中组成不同性状菌落也是鉴别真菌的重要特征。
孢子适宜温/湿度芽管延长呈丝状菌丝
营养、气生、生殖菌丝分支交织成团菌丝体
各种真菌菌丝形态各异,借菌丝形态鉴别真菌菌种。菌丝的差别可表现在菌丝无色透明或有色、暗色,有隔或无隔,直径大小等其菌丝体在生长中组成不同性状菌落也是鉴别真菌的重要特征。二、繁殖体
真菌通过各种有性和无性的孢子进行繁殖。不同的真菌有其特有的孢子,其性状大小、表面纹饰和色泽等各不相同,产生孢子的器官——子实体(sporophore)也有差别,孢子和子实体是鉴别真菌的重要依据。(一)无性孢子与无性子实体不经两性细胞的结合而形成的孢子叫无性孢子,菌丝上细胞分化生成,不发生细胞融合这一繁殖过程称无性繁殖。
无性繁殖产生的无性孢子与无性子实体有5种:孢子囊孢子分生孢子芽生孢子厚(壁)膜孢子关节孢子1、孢子囊孢子:菌丝分枝的顶端或孢囊梗的顶端形成膨大的孢子囊,并生出横隔将孢囊梗与孢子囊分开,孢子囊中原生质切割后逐渐形成孢子,其数量较多。孢子囊孢子⑵分生孢子:由菌丝分化而来有两种产生方式:①断裂法:由菌丝片段沿横隔处断裂而成②突芽法:由分生孢子梗顶端形成各种分生孢子的形态、颜色、大小和不同的结构可用于分类和鉴定菌种生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成;也可从菌丝侧面出芽形成大分生孢子的形态⑶芽生孢子:酵母菌的无性繁殖多数是出芽产生芽孢子,可见几个芽孢子连成一串芽生孢子⑷厚壁孢子:由菌丝细胞原生质浓缩、变圆形成,由于孢子壁厚,可抵抗不良环境厚壁孢子⑸关节孢子:菌体成熟后,菌丝的上部形成许多横隔,在横隔处断裂成圆筒状或短柱状、两端稍呈钝圆的细胞称关节孢子。(二)有性孢子和有性子实体
不同性别的细胞或器官配合后产生不同类型的有性孢子,这个过程称有性繁殖,通常有质配、核配和减数分裂几个阶段。有性细胞配合方式有:配子囊接触交配、配子囊接合、精孢接合、体细胞配合和游动配子结合。
有性孢子有卵孢子、接合孢子、担孢子、子囊孢子和休眠孢子囊。三、真菌的菌落
真菌的菌落一般指在一定基质上,接种某种真菌的一个孢子或一段菌丝,经过培养,向四周蔓延生长出丝状的群体。
菌落呈放射状生长,在不同成分的培养基上和不同条件下培养,同一种真菌形成的菌落也有差别。因此,不同真菌菌落所表现的特征,为真菌分类提供重要依据。1、菌落颜色:很多真菌产生多种颜色的色素,使菌落的背面
染有颜色,有的甚至分泌可溶性色素,扩散到
全部基质中。2、菌落质地:如短绒毛状、絮状、粒状、粉状等;有的菌落表
面呈颗粒结构,或出现同心环或辐射状沟纹等。真菌菌落外观结构描述:①菌落表面:平滑或皱缩、致密或疏松等②菌落质地:绒毛状、棉絮状、绳索状等③菌落边缘:全缘、锯齿状、树枝状等④菌落高度:扁平、丘状隆起、中心部分凸起或凹陷等酵母型菌落类酵母型菌落(白假丝酵母菌)曲霉菌青霉菌不同真菌培养基中真菌菌落形态第三节真菌的营养代谢与繁殖
真菌代谢包括真菌的营养类型、生长条件、能量代谢、群体与个体生长多方面。一、营养物质
真菌真菌大多为腐生菌;生长需要碳源、氮源和其他营养成分;体外培养时碳源由培养基提供;氮源主要有硝酸盐、亚硝酸盐等;其它成分如纤维素、氨基酸、无机盐等;琼脂为真菌体外培养多采用的固化支持物
常用的真菌培养基往往只提供真菌生长需要的最低营养成分,以利于限制细菌生长而促进真菌生长繁殖,提高真菌分离率。二、生长条件
大多数真菌需氧生长,一部分兼性厌氧;其最适pH为4.6-6.0,最适温度为30℃(或室温22-25℃)。
基础分离时不要在35℃以上培养,以免抑制某些致病菌的生长;但在某些情况下,高温培养可利于耐高温的真菌培养,如烟曲霉菌。
双相真菌在37℃或组织中可以酵母或小球体形式生长,可区别于其它真菌。
三、繁殖
每种真菌繁殖既可以有性繁殖方式也可以无性的孢子进行繁殖。
真菌在适宜条件下,经过一定时期的营养生长进行无性繁殖,产生无性孢子。在真菌营养后期,缺乏养分、温度不适宜的情况下,真菌转入有性生殖产生有性孢子,在整个生活史中往往只出现一次。四、生化反应利用不同的假丝酵母菌对糖类的发酵和同化能力不同鉴定假丝酵母菌种。
新生隐球菌能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇,但不能发酵糖类,不能同化硝酸盐。
非致病性隐球菌则不能同化肌醇。
五、抵抗力真菌对干燥、紫外线有较强的抵抗力;不耐热,60℃1h即可被杀死;对常用消毒剂有抵抗力,对2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酒较敏感。
对常用抗细菌的抗生素不敏感。两性霉素B、制霉菌素、酮康唑、克霉唑、伊曲康唑、灰黄霉素等具有抗真菌的作用六、人工培养
常用的培养基:选择性、无选择性和鉴别培养基。
无选择性培养基:沙氏培养基、脑心浸液培养基和血琼脂培养基。
选择性培养基:是在无选择性培养基中根据细菌污染情况加入氯霉素和庆大霉素、或青霉素和链霉素、或金霉素和庆大霉素、或氯霉素和庆大霉素等以抑制细菌的生长。为抑制腐生性真菌的生长,加入0.5mg/ml放线菌酮。
鉴别培养基:马铃薯葡萄糖琼脂、酵母浸膏琼脂、米粉琼脂、蔡氏琼脂。
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