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精选资料，欢迎下载精选资料，欢迎下载从口腔脱落细胞中提取人类基因组一．实验目的、了解从细胞中提取 的基本原理2学习从口腔脱落细胞中提取高分子量 的基本操作步骤和会影响提取效果的注意事项。二．实验原理用蛋白酶（使膜上蛋白变性分解）和去污剂 （破坏细胞膜的脂质结构）共同消化细胞。然后酚、氯仿等有机溶剂进行抽提，进行 的纯化，去掉蛋白质、、多糖等生物大分子。然后用无水乙醇沉淀，干燥后用溶解，在℃下可保存一年。三．实验步骤1、先用清水漱口。然后用舌头舔颊粘膜上颚、用牙刮颊部，嘬咀，用分泌出的唾液反复漱口；将唾液吐到杯中。用生理盐水洗涤，后将 液体转入个干净的管中， 离心分钟，倒掉上清。2重复用 生理盐水洗涤沉淀次，离心，去上清。3沉淀中加口 细胞裂解液（）E打散细胞团、混匀，再加口蛋白酶，充分混匀。 ℃水浴。4加口饱和酚，轻摇混匀，室温 离心m5、上清（注意不要吸到中间层白色絮状物质以及下层有机相）移至另一加入装有 口氯仿的管，轻摇混匀，室温 离心。6吸取口上清（注意不要吸到中间层白色絮状物质以及下层有机相）至已装有 口预冷无水乙醇的离心管，混合均匀，可见白色絮状沉淀，离心， 沉淀在管底。7去上清，加入乙醇 清洗沉淀， 离心，去上清（尽量用小枪头将液体去干净，但注意不要将沉淀也吸走），室温干燥 ，再用0 溶解沉淀，℃储藏备用。四．实验结果

五．结果分析编号：100如图所示， 号几乎没有提取出 N只有很弱的一条带，如果量再多一些的话，应该也看得到会有几条带。经过分析后认为主要以下几点原因：【1】.唾液稀释过度，导致取到的细胞很少。II在破碎细胞的时候进行的不彻底，没有混匀，导致抽提不完全。II加入活性去污剂到加热 的间隔有些长导致部分被水解酶降解。II加入饱和酚的时候没有摇匀，蛋白质的去除不彻底，部分与蛋白质结合，在分离去除蛋白质的时候损失了不少。止匕外，不同的条带代表提取出的的大小不同，在实验过程中，可能由于剧烈震荡，或水解酶的缘故使得链被打断。因此出现了不同的几个条带。六．注意事项1.取唾液时既不能过分稀释，也不能太粘稠，发现细胞不足时要及时补充。2.裂解细胞的时候，要充分混匀活性去污剂，但震荡也不能太剧烈。最好及时放入水域锅中加热。3加.苯酚后要充分混匀，之后离心，尽可能多的将上清吸出，但注意不要取到中间的蛋

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