结直肠癌靶向治疗和易感风险筛查

123结直肠癌的分子发病机制

结直肠癌的背景知识结直肠癌的靶向治疗4结直肠癌家族易感风险筛查主要内容第一页，共31页。分类1*结直肠癌（CRC）是常见的恶性肿瘤，包括结肠癌和直肠癌，85%属于散发性，约15%具有家族遗传性，总的5年生存率30%左右。右半结肠癌直肠癌左半结肠癌发病部位第二页，共31页。*CancerStatisticsinChina,2015MalesFemales发病率1中国癌症统计报告显示，2015年估计有429万例癌症新发病例，每天约12000例。第三页，共31页。死亡率1MalesFemales*CancerStatisticsinChina,2015中国癌症统计报告显示，2015年估计有281万例癌症患者死亡，每天约7500例。第四页，共31页。风险因素1遗传因素（林奇综合征等）炎症性肠病（溃疡性结肠炎等）其它类（吸烟、食用红肉和加工肉类、饮酒、糖尿病等）*另有研究显示吸烟、代谢综合征、肥胖和食用红肉/加工肉类与预后欠佳相关。第五页，共31页。病理分期1第六页，共31页。传统治疗11.肠切除术：

适用于适合切除的结肠癌（无转移），组织学证实的原发于结直肠的恶性肿瘤。第七页，共31页。2.化疗：

适用于手术切除后肠癌患者的辅助治疗或者晚期或转移性结直肠患者的治疗。传统治疗1第八页，共31页。传统治疗1常用化疗药物：氟尿嘧啶、伊立替康、卡培他滨、奥沙利铂等（FD-180产品化药敏感性提示范围内）第九页，共31页。传统治疗1*Lynch综合征筛查（IHC/MSI）-MMR检测*MSI-H的患者，对5-FU不敏感，不能从5-FU辅助化疗中受益；低度微卫星不稳定(MSI-L)者对5-FU类药物敏感性、化疗有效。如果考虑氟尿嘧啶类单药治疗，推荐行MMR检测；*对于具有dMMR/MSI-H的II期患者，预后较好，不需要辅助化疗。MSI与结肠癌患者化疗敏感性第十页，共31页。2分子机制*信号通路CancerGenomeLandscapes.Science.2013March29;339(6127):1546–1558第十一页，共31页。2分子机制*结直肠癌高频突变基因数据统计来源于Cosmic数据库第十二页，共31页。2分子机制*基因累积突变调控结直肠癌发生、发展的过程。CancerGenomeLandscapes.Science.2013March29;339(6127):1546–1558APC-KRAS/NRAS-PIK3CA/SMAD4/TP53第十三页，共31页。案例2分子机制第十四页，共31页。3靶向治疗CFDA/FDA批准结直肠癌上市靶药1.贝伐珠单抗、雷莫芦单抗（抗血管生成药物）：

适用于晚期转移性结直肠癌患者，与化药联用

2.帕尼单抗、西妥昔单抗

（抗EGFR单抗）适用结直肠癌患者，与小分子靶药或化药联用，使用前需明确KRAS/NRAS/BRAF等基因突变状态，仅限野生型。*单抗类药物第十五页，共31页。3靶向治疗CFDA/FDA批准结直肠癌上市靶药1.依维莫司（mTOR抑制剂）靶点：PIK3CA、PTEN、TSC1/22.瑞格菲尼

（抗血管生成药物、BRAFV600）3.舒尼替尼（抗血管生成药物）4.阿柏西普（抗血管生成药物）*小分子类药物第十六页，共31页。3靶向治疗*跨适应症药物：曲美替尼（Trametinib）适应症：与威罗非尼联用，治疗BRAFV600E/K突变的不能手术切术或转移性黑色素瘤患者*临床实验阶段药物：安卓健（Antroquinonol），Ras蛋白抑制剂Ras基因突变结直肠癌-治疗难题第十七页，共31页。4易感风险筛查遗传性结直肠癌*遗传性结直肠癌约占结直肠癌患者总数的10-15%，主要是由遗传性肿瘤综合征引起。1.Lynch综合征（遗传性非息肉病性结直肠癌，或HNPCC）MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、EPCAM2.家族性腺瘤样息肉病（FAP）

APC3.MUTYH基因相关息肉病（MAP）

MUTYH4.李-佛美尼综合症TP535.黑斑息肉综合征（PJS）

STK11（LKB1）6.幼年型息肉病综合征（JPS）

SMAD4、BMPR1A7.多发性错构瘤综合征

PTEN第十八页，共31页。4易感风险筛查*易感基因APC,BMPR1A,MLH1,MSH2,MSH6,MUTYH,PMS2,EPCAM,TP53,PTEN,STK11,SMAD4,CHEK2,POLD1,POLE,GALNT12,BLM,GREM1(来源于NCCN，均在FD-180产品检测基因范围内）

第十九页，共31页。4易感风险筛查*林奇综合征，又称遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC），占结直肠癌患者2-4%一种呈常染色体显性遗传的家族性肿瘤综合征，主要由错配修复基因（mismatch

repair

gene，MMR）缺失引起(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、EPCAM），hMLH1和hMSH2突变约占检出的种系突变的90％，hMSH6突变约占7％-10％，hPMS2突变占不到5％。*MMR基因缺失，主要是由基因突变或启动子甲基化引起，其中MLH1和MSH2基因突变占所有基因改变的90以上。MMR基因突变或启动子甲基化可导致MMR基因功能缺失，从而引起含有错配碱基、核苷酸插入或缺失的DNA分子不能正常修复，最终引起广泛的MSI。Lynch综合征第二十页，共31页。Lynch综合征的初步筛查*微卫星不稳定性(MSI)*免疫组化(IHC)*BRAF基因突变检测(BRAF体细胞突变者不大可能存在林奇综合征,可免于MMR基因检测。如免疫组化结果显示MLH1蛋白不表达应检测BRAF基因。存在BRAF突变表明MLH1表达下降是由体细胞MLH1基因启动子区域甲基化引起,而并非是通过胚系突变而来）4易感风险筛查Lynch综合征诊断性检测则包括对先证者的特异性MMR基因的DNA测序、MMR基因缺失的多重连接探针扩增(MLPA)第二十一页，共31页。IHC和MSI检测原则IHC和MSI检测是评估个体罹患LS风险的经典检测手段（无论是单独进行还是联合检测），尤其是针对结肠癌和子宫内膜癌组织。超过90%的LS肿瘤表现为MSI-H（微卫星高度不稳定），和/或IHC检测至少一个错配修复蛋白表达缺失。不同于LS（是一种错配修复基因或EPCAM基因的遗传性突变），大约10%-15%的散发性结肠癌由于MLH1基因启动子的异常甲基化，也可以表现为IHC异常和MSI-H。突变体BRAFV600E在大多数散发性MSICRC中发现，并且在LS相关的CRC中很少发现。尽管IHC检测发现异常MLH1蛋白增加了患者为LS的可能性，但无法由此而确诊。只有那些发生胚系突变的患者才是真正的Lynch综合征。

4易感风险筛查Lynch综合征第二十二页，共31页。IHC检测是指对肿瘤组织进行染色，以检测LS患者中已知4个突变错配修复基因的蛋白产物：MLH1,MSH2,MSH6和PMS2基因的蛋白产物。异常的检测结果往往显示至少1个上述蛋白表达缺失，由此提示可能存在相关基因的遗传性突变。IHC检测发现的任意一个蛋白表达缺失均是明确指征进行该相关基因的突变检测。IHC检测若出现MLH1蛋白异常，需进一步检测是否存在BRAF基因V600E突变（或IHC检测BRAF蛋白）或与散发性肿瘤相关的MLH1蛋白启动子高度甲基化，如果后者检测为阴性，则要进一步进行基因突变检测（见LS-A3-2）。具有胚系突变的那些鉴定为LS。

IHC检测的假阴性率约5%-10%。*IHC检测4易感风险筛查Lynch综合征第二十三页，共31页。免疫组化结果MMRMSIMLH1或MSH2蛋白缺失dMMRMSI-H正常的蛋白表达pMMRMSI-L/MSSdMMR：MMR基因缺失；pMMR：MMR基因正常；MSI-H：高度微卫星不稳定；MSI-L：低度微卫星不稳定；MSS：微卫星稳定。

MMR蛋白免疫组化结果判读标准4易感风险筛查Lynch综合征第二十四页，共31页。*MSI检测微卫星不稳定性（MSI）是指DNA甲基化或者基因突变致错配修复基因缺失，从而导致微卫星重复序列插入或缺失，继而长度改变，与肿瘤的发生密切相关。约15%的结直肠癌中存在MSI，主要是微卫星序列碱基对的替换和移码突变。散发性肠癌中最常见的就是hMLH1基因启动子区高甲基化，导致MSI的发生。肿瘤中的MSI-H（又称dMMR）是指在预先确定的微卫星重复标记组中具有一定比例改变的肿瘤，丧失MMR活性。其检测意义、运用和提示作用均与IHC相似，尽管两者略有互补性。MSI的检查主要采用美国国立癌症研究所推荐的的5个微卫星标记(D2S123、D5S346、D17S250、BAT25和BAT26)。MSI检测的假阴性率约5%-10%。4易感风险筛查Lynch综合征第二十五页，共31页。MSI不稳定标记的比例阳性标记数（Bethesda工作组）MSI-H≥

40%≥

2/5MSI-L<</span>

40%1/5MSS0%0/5*MSI分级标准4易感风险筛查PCR主要是检测DNA分子链上的MSI状态，国内通常对5个位点（NR-27、NR-24、NR-21、BAT-25和BAT-26）进行检测。第二十六页，共31页。MSI或IHC异常进一步检测4易感风险筛查Lynch综合征第二十七页，共31页。4易感风险筛查*肿瘤检测策略适用于结直肠癌和子宫内膜癌*如果有明确的家族史或存在其他遗传性肿瘤综合征的特点（多发结肠息肉），则对先证者进行进一步检测是必要的，或者对家族中其他成员进行肿瘤检测。*IHC和/或MSI检测异常但是相关基因检测