药理学研究的一般性问题

科研全过程训练概况专业课程、专业外语、统计学、文献检索、常用软件应用（Word,Excel,图表制作软件，Photoshop,SPSS,PowerPoint,etc）阅读文献，确定课题（查阅文献能力）设计实验实验研究（取得初步结果，可以申请基金）统计分析资料；撰写论文答辩、会议报告（Chinese,English）现在是1页\一共有74页\编辑于星期日一、药理学研究的类型根据研究目的分类基础研究：受体、递质、蛋白质、神经通路、信号转导、基因开发研究：围绕新药研发的药理学研究应用研究：提高治疗效果、减少不良反应的临床药理学现在是2页\一共有74页\编辑于星期日一、药理学研究的类型根据研究内容和研究方法分类药效及作用机制研究药动学研究实验研究整体动物实验离体器官、细胞实验临床研究现在是3页\一共有74页\编辑于星期日二、定位与选题〝三定〞:明确的目标定研究方向很稳定定研究领域相对稳定定研究课题非常活跃如何定位:学科发展的前景与可行性单位的可能条件个人兴趣现在是4页\一共有74页\编辑于星期日如何选题

导师：给方向、提供条件、审阅文章、组织答辩（不同于technician）根据导师的研究方向基金资助情况确有兴趣的探索可以做出开创性的工作二、定位与选题现在是5页\一共有74页\编辑于星期日三、要求独立研究工作的基本能力掌握信息,复习文献的能力科学实验设计能力（创新思维能力）科学实验操作能力科学论文撰写发表能力科学基金申请能力良好的素质，杜绝造假、剽窃文章的可信率、实验的可重复率现在是6页\一共有74页\编辑于星期日四、怎样写好实验记录认真、客观、全面的记录。格式和内容实验方法试剂称量配制时间气候仪器设备动物结果现在是7页\一共有74页\编辑于星期日四、怎样写好实验记录一般要求记录本应事先印有页码，不得撕掉或挪作他用，即使写错了亦应如此。封面或首页应写明科研课题名称，开始工作年、月、日，工作者姓名，每本记录前1～2页应留作写实验目录及页次之用，便于查阅。所有数据，必须立即用不掉色的笔直接清晰地记录在记录本上，严禁用铅笔记录，因为容易退色和被涂改。如有写错不得涂改擦抹，必须改正时，可在错误处画道线或打×，然后写上正确数据，并由课题负责人签字，防止弄虚做假。电脑测得的数据应输入电脑，自动打印，贮存，最好拷贝一份，以防丢失或损坏。现在是8页\一共有74页\编辑于星期日四、怎样写好实验记录写记录的要求立即不能先记在心上，实验后补写记录，因为记忆有时不可靠。直接要直接写在记录本上，不能先写在纸条上，然后重抄，因为重抄有时抄错，有时甚至把纸条丢掉。清晰字体清楚，不要潦草，不要词不达意，自己能看懂，别人也看得清楚，今天清楚，日后也看得懂。自动仪器打印的数据、结果、图谱等必须将原件依顺序贴在记录本上，有条件的还可输入电脑保存。现在是9页\一共有74页\编辑于星期日四、怎样写好实验记录记录的内容年、月、日。有的实验还应注明室温实验名称目的材料实验方法，应注明引用参考文献；结果：包括原始数据，图，表，统计方法讨论或小结

现在是10页\一共有74页\编辑于星期日五、研究设计三要素处理因素（自变量）试验对象（人、动物；器官、组织、细胞、分子）试验效应（因变量）药物、方法和模型的关系现在是11页\一共有74页\编辑于星期日六、实验设计的基本原则对照原则并行对照配对对照自身对照前后对照潜在对照现在是12页\一共有74页\编辑于星期日六、实验设计的基本原则随机原则排除实验者的主观性，使每个实验单位都有同等机会被分配到实验组和对照组。重复原则实验的取样例数或实验次数现在是13页\一共有74页\编辑于星期日

如何针对课题复习文献现在是14页\一共有74页\编辑于星期日1.站在巨人肩上看世界知识爆炸时代:广博、交叉学科

知识广博与深入、专业化间的矛盾〝开卷有益〞？现在是15页\一共有74页\编辑于星期日2.按科研需要来复习文献充分占有文献〝方向〞─专业人员水平领域─专家水平课题─No.1专家水平现在是16页\一共有74页\编辑于星期日2.按科研需要来复习文献文献分类书教科书:相关,交叉学科的基础知识专著编著(资料性)著作(文献性)(方向)(领域)综述资料性(方向)(领域)文献性(领域,课题)Originalpaper课题领域(个别)Datapaper快报摘要会议汇编自己定位不要变,别被文献牵着走现在是17页\一共有74页\编辑于星期日3.如何看文献精读与浏览看懂:问题的提出(Background)目的设计思想与依据研究对象与方法重要结果结论与启示熟悉程度方向:一般涉及;基础知识;学科水准;当前重大进展与趋势领域:了解焦点与热点;已/正/将进行的课题课题:(全面)历史现状展望；主要方法、手段现在是18页\一共有74页\编辑于星期日4.如何收集文献检索重要文献;实验室或学者追踪;确定本学科的重要(核心)期刊分层次收集资料课题有关文献;尽可能收集原著/快报;要新,全本领域非课题文献;新综述,影响大的原著本方向非本领域文献:经典专著/综述不同方向相关知识:专著,教科书现在是19页\一共有74页\编辑于星期日5.文献整理运用自己专业知识按照文献的热点与焦点参照相关综述模式例TGFβ在肾纤维化中的意义(作用)

㈠背景知识

①肾纤维化

②TGFβ的理化特征

③TGFβ的生成与代谢、组织分布等

㈡肾纤维化病程中TGFβ的变化

①血浆的和肾组织的，蛋白与基因表达

②病程中的动态变化与临床病理生理表现

的（相关）关系现在是20页\一共有74页\编辑于星期日5.文献整理㈢TGFβ的生物学（肾）效应：整体，器官，细胞及分子效应

①外源或刺激内源TGFβ的效应（在正常和疾病条件）

②拮抗或促失活的效应㈣TGFβ效应的机理

受体及细胞内信号转导机理

TGFβ的基因表达和细胞表型改变的机理㈤肾脏疾病的TGFβ高/低表达的机理㈥TGFβ与其他已知肾纤维化因子间的关系（包括遗传易感因素）现在是21页\一共有74页\编辑于星期日5.文献整理㈦TGFβ参与肾纤维化发病的临床意义：诊断，治疗，预防策略此外，常用方法学和技术的整理

肾纤维化整体活离体模型；相关细胞的培养；细胞增殖表型转变；胶元测定；

TGFβ受体表达与活性检测……现在是22页\一共有74页\编辑于星期日三.如何撰写文献综述目的学科带头人与学科骨干写科研工作人员开题前写科学情报人员写研究生毕业论文(?)基层人员为写而写文献性与资料性,大综述与小专论现在是23页\一共有74页\编辑于星期日三.如何撰写文献综述小专论内容

审定好内容与题目(如上述例子)

要有思路，有观点，提炼科学问题，要告诉读者什么？概述问题的提出--研究的历史与背景--本问题(课题)的意义背景知识及相关基本知识（不要写成教科书或讲义）本专论要论述的主要内容,注意从课题与背景联系的学科高度分析小结存在的问题与今后的方向现在是24页\一共有74页\编辑于星期日三.如何撰写文献综述资料处理按专业知识列好提纲;文献(作的摘要)编号后按提纲归类背景材料,基础知识,立论依据;权威甚或经典;“教科书式或讲义式”语言不同意见,学术观点与资料如何处理资料的准确性,尤其是翻译,讲不清楚不如不讲老课题文献多,新课题文献太少现在是25页\一共有74页\编辑于星期日三.如何撰写文献综述如何表达自己的学术观点:评述?自引?逻辑分析内容集中,目标明确,不要广证博引(与研究生论文不同)参考文献:新(5年内2/3);背景材料,

立论依据;权威经典;

专论内容:新,反映进展,可引会议,摘要及个人咨询,准确发表:刊登进展/综述的专业杂志(如“进展”“国外医学”);专业论文杂志;查阅国内类似综述有无,避免重复.按杂志稿约修改(留底)现在是26页\一共有74页\编辑于星期日四.如何进行科研课题设计原则:目标明确;构思新颖;立论依据充分;实验方法恰当选题(科研目标,目的)目标具体:用实验手段解决科学问题,问题是什么,攻关，攀科学高峰，“关”、“高峰”是什么,在哪里?(目的与手段,工具的关系)射箭中的,忌打哪儿指哪儿，看看有什么变化，研究甚少，填补空白等。“三定”基础上明确该课题的学科地位(与原创新关系);注意工作的积累和发展;可参考文献整理中发现的和未解决的问题；将确定的目标逐字推敲写下来。现在是27页\一共有74页\编辑于星期日四.如何进行科研课题设计创新构思Idea的来源:临床;文献;交叉学科启迪;(学科发展)自己工作的连续性，避免被文献牵着鼻子走，或赶时髦;新技术应用更重视新思维;交叉学科别交叉走了(转向)现在是28页\一共有74页\编辑于星期日四.如何进行科研课题设计设计思想合理,依据充分

如:证明某因子(TGFβ)是某疾病(肾纤维化)的发病因素.设计:疾病时高表达,与病程发展以及某些病理变化相关外源TGFβ或诱导内源TGFβ高表达加剧发病拮抗TGFβ或抑制内源TGFβ生成或促进灭活,消除疾病上述思路与文献(or临床)是否相悖?现在是29页\一共有74页\编辑于星期日四.如何进行科研课题设计方法恰当(方法先进)

方法选择：目的决定方法选择；实验条件选方法；工作者熟练程度选方法；假设全部顺利，所得结果能否达到设计目标？模型经典与新建；是否需与人一致或接近；可行性；模型与分组适合研究目的为原则观察指标多（广）或少（精）好？明确每个指标的原理和意义背景指标如证实疾病模型复制成功的指标；反映质控的指标；反映阴性或阳性的对照指标等→必须是肯定的结果探索性指标前瞻性指标现在是30页\一共有74页\编辑于星期日四.如何进行科研课题设计建立操作程序落实每个方法预试成熟，建立程序设计实验记录与观察内容实验记录表；单项归纳表；汇总表现在是31页\一共有74页\编辑于星期日

6.总体设计的预测评估

⑴预期结果阴性或阳性的解释与再证实；审定设计能否达到目标

⑵预期结果追踪深入研究的方向和可行性

⑶预期结果图表设计（发表是否单薄）

⑷预期结果的学术价值和地位

（写论文的Introduction,M&M）现在是32页\一共有74页\编辑于星期日药物效应的测量现在是33页\一共有74页\编辑于星期日

一、药物-受体相互作用的测定生化结合研究（全部受体）功能研究（部分受体）realtimemeasurementstoptimemeasurement现在是34页\一共有74页\编辑于星期日1种配体与3种不同受体群的相互作用

现在是35页\一共有74页\编辑于星期日配体与受体结合的特异性是相对的，与药物浓度有关现在是36页\一共有74页\编辑于星期日二、放射受体结合研究20世纪60年代，125I-ACTH、125I-血管紧张素;preparation:制备基本原理：配基与受体特异性结合，以放射性强弱表示结合容量。与放免分析相似（1955年发明，Yalow）现在是37页\一共有74页\编辑于星期日

放射配基结合过程图解

现在是38页\一共有74页\编辑于星期日已知药物浓度，可得到受体结合剂量-反应曲线加入大剂量非标记配基，封闭受体，得到非特异性结合相应公式计算非特异性结合、总结合固定配基浓度，改变受体量符合一级动力学：随时间增加，结合达最大值；能被无药物介质逆转现在是39页\一共有74页\编辑于星期日受体结合研究时的平衡情形

现在是40页\一共有74页\编辑于星期日

放射性配基结合实验中不同水平的特异性结合

现在是41页\一共有74页\编辑于星期日特别注意点去除非特异性结合在一定浓度的敏感“窗”内进行现在是42页\一共有74页\编辑于星期日三、功能性研究测定功能性反应方法多样经典生理反应酶活性第二信使水平反应、表达产物测定报告物质（酶、基因等）现在是43页\一共有74页\编辑于星期日要求： 大的信-噪比：机体、仪器 基础状态稳定办法：找出衰减规律 设对照（不常用） 也必须在稳定的“窗”内进行现在是44页\一共有74页\编辑于星期日

图5

生物制备的稳定窗

现在是45页\一共有74页\编辑于星期日不同受体制备进行实验的前提敏感性和反应性不变（实际不可能）纠正系统不稳定性平衡周期达稳态对照现在是46页\一共有74页\编辑于星期日

图6

移动基线对剂量-反应曲线的影响

现在是47页\一共有74页\编辑于星期日激动剂作用后指数性细胞死亡对剂量－反应曲线的影响

现在是48页\一共有74页\编辑于星期日组织失去敏感性后，最大反应也丢失一个系统不太可能充当不同组织间基础反应变化的良好对照数据必须在稳定的“窗”内进行，避免继发作用靠一个剂量得到的反应不能下结论现在是49页\一共有74页\编辑于星期日图8生物制备反应窗

现在是50页\一共有74页\编辑于星期日图9剂量－反应曲线形状的改变显示继发反应

现在是51页\一共有74页\编辑于星期日生物放大的基本原则具有终端器官反应的细胞体系具有很大价值现在是52页\一共有74页\编辑于星期日图10细胞代谢指示物氢离子从细胞释放调控示意图

现在是53页\一共有74页\编辑于星期日四、药物反应的表述基础与给药状态的差值原发反应变异性较大利用差值较好有多种转换方法现在是54页\一共有74页\编辑于星期日图11两种描述药物反应的方法

现在是55页\一共有74页\编辑于星期日图12生物制备剂量－反应曲线误差范围

现在是56页\一共有74页\编辑于星期日

实验的药物数据的不同处理直接反应以对数浓度作图有较高精确性药物反应减去基础值降低反应测量误差反应值以基础水平的百分数表示变异大以最大反应值的百分数表示较好；需要较少的实验次数现在是57页\一共有74页\编辑于星期日图13直接反应以对数浓度作图

现在是58页\一共有74页\编辑于星期日图14从图13显示的数据所计算的delta反应

现在是59页\一共有74页\编辑于星期日图15反应以基础值的百分率表示

现在是60页\一共有74页\编辑于星期日图16Delta反应以最大delta反应的百分数计算

现在是61页\一共有74页\编辑于星期日图17连续累积剂量－反应曲线

现在是62页\一共有74页\编辑于星期日研究结果的表达现在是63页\一共有74页\编辑于星期日一、研究文章的撰写确定投哪本杂志文章的质量与杂志的档次要相称发表周期现在是64页\一共有74页\编辑于星期日论文撰写基本格式与要求Bacon:Writingmakesanexactman.现在是65页\一共有74页\编辑于星期日二、基本要求值得研究数据真实、经过统计学处理按照国际科学界公认的格式编排文体要好，含义确切、合乎逻辑现在是66页\一共有74页\编辑于星期日1978年1月美、加、英医学期刊编辑：《温哥华宣言》1991年国际医学期刊编辑委员会修改BrMedJ1991;302:338-3411995年

人民军医出版社《医学生物学文献方法学》现在是67页\一共有74页\编辑于星期日题目（title）作者姓名（author’sname）作者单位地址（address）摘要（abstract）关键词（keywords）引言（introduction）Nature例外材料与方法（materialsandmethods）结果（results）讨论（discussion）总结或结论（conclusionorsummary）致谢（acknowledgement）参考文献（reference）现在是68页\一共有74页\编辑于星期日题目（title）：短！具体；简洁：通常不超过20个字确切；通常在论文写完后确定“甲氨蝶呤加四物汤治疗白血病46例”避免“关于……的研究、调查、分析、观察”作者姓名（author’sname）：第一作者……correspondence;contributedequally作者单位地址（address）现