实验五-延胡索对小白鼠的镇痛作用

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》实验教学实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用——理论验证性实验讲解教师：王长林指导教师：王长林赵建平李艳玲第一页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用大纲要求：【教学目标】通过实验使学生加深对延胡索功效的认识，加深对中药材功能的理解和记忆,并验证延胡索镇痛的药理作用。第二页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【实验考核】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用实验考勤实验态度操作过程实验报告实验分析

实验关键技术第三页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索（第九节理血药2）【基源】本品为罂粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥块茎。【相关理论】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第四页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索【产地分布】主产于浙江、江苏、湖北、湖南、辽宁、山东等地。【相关理论】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第五页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索【性状】本品呈不规则的扁球形，直径0.5～1.5cm。表面黄色或黄褐色，有不规则网状皱纹。顶端有略凹陷的茎痕，底部常有疙瘩状凸起。质硬而脆，断面黄色，角质样，有蜡样光泽。气微，味苦。【相关理论】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第六页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索【炮制】延胡索除去杂质，洗净，干燥，切厚片或用时捣碎。醋延胡索取净延胡索，照醋炙法（参照兽药典附录）炒干，或照醋煮法（参照兽药典附录）煮至醋吸尽，切厚片或用时捣碎。【相关理论】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用延胡索醋延胡索炙醋炙：引药归肝经，加强镇痛效果。第七页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索【性味归经】辛、苦，温。归肝、脾经。【功能】活血散瘀，行气止痛。【主治】——“诸痛

”气滞血瘀，跌打损伤，产后瘀阻，风湿痹痛。【相关理论】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第八页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索【化学成分】

本品主要含生物碱，其主要成分为延胡索甲素、延胡索乙索、延胡索丙素(原阿片碱)、延胡索丁素等。尚含淀粉、挥发油、树脂、去氢紫堇碱等。【相关理论】延胡索素实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用延胡索乙素第九页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学延胡索【现代研究】（1）有明显的镇痛作用。（2）有镇静、催眠作用。（3）减少胃液分泌。（4）扩张冠状血管。【相关理论】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第十页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【实验原理】——热板法延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。舔足t≤

30″55±0.5℃第一组：延胡索液第二组：哌替啶注射液第三组：生理盐水

实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用舔足第十一页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【实验原理】——热板法延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。55±0.5℃第二组：哌替啶注射液第三组：生理盐水

实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用舔足杜冷丁第十二页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【实验原理】——热板法延胡索能活血行气止痛，是止痛的良药。热板法是筛选镇痛药的经典方法：小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时，就发生舔足的特殊反应。以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值，以此为观测指标。舔足t≤

30″55±0.5℃第一组：延胡索液第二组：哌替啶注射液第三组：生理盐水

实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用舔足第十三页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【实验组织】班级进行分组，每组３名学生；每组用15只预选合格实验动物；每４组有一名专业教师或实验教师（兼职教师）进行指导。实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第十四页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学实验动物小白鼠（合格15/组）。1【实验准备】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用雌性为什么？第十五页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学实验器材鼠笼、水浴锅、烧杯（500ml）、天平、注射器、秒表、钳子、镊子、棉棒等。2【实验准备】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第十六页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学实验药品哌替啶注射液lmg／ml延胡索水煎醇沉液4g／ml。生理盐水苦味酸（标记用）3【实验准备】实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第十七页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【课程组织过程】教师演示关键步骤和技术。学生在教师的指导下亲自操作各种按摩手法。结果统计和讨论以及分析总结。实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第十八页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】要求：浓度：2ｇ／ｍｌ；温度：室温（２0℃）醇沉（一）延胡索的煎制——水煎醇沉（提前准备）实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用水煎醇沉：水煎剂经浓缩到一定浓度（1~2g/ml）后，加入2~3倍量95%乙醇（使含乙醇量达到60~70%），边加边搅拌，即有沉淀析出，置冰箱内24小时使沉淀完全。过滤，滤液回收乙醇后以蒸馏水溶解。过滤后稀释成规定浓度即可，必要时可以重复此乙醇沉淀2~3次。第十九页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】调节水浴锅，使温度恒定在55±0.5℃，每次取小鼠1只，放入烧杯内。记录自放入烧杯至出现舔后足所需时间(s)，作为该鼠的痛阈值。（二）预选实验动物——结合给药前第一次痛阈值测定55±0.5℃t≤

30″第1次实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】t≤30″为合格动物预选合格小鼠15只/每实验小组。（三）预选实验动物结合给药前痛阈值测定t≤

30″55±0.5℃第1次实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十一页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】分3组每组5只。（四）实验动物分组（15只）第2次测定给药前痛阈值t≤

30″55±0.5℃第2次第一组：实验组a第二组：阳性对照组b第三组：阴性对照组c再次测定痛阈值，计算平均数，作为该鼠给药前的痛阈值a1_a15;b1_b15;c1-c15.实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十二页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】（五）用药第一组：实验组a第二组：阳性对照组b第三组：阴性对照组c第一组：延胡索液0.2ml／10

g第二组：哌替啶注射液0.2ml／10g第三组：生理盐水

0.2ml／10g腹腔注射0.2ml／10

g体重实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用腹腔注射（ip）左手固定小鼠，使腹部在上，头部下倾，右手持注射器，取45°角刺入一侧下腹部向头端刺入腹腔（图）。进针部位不宜太高，刺入不能太深，以免伤及内脏。注射量一般为0.1～0.2ml/10g体重。第二十三页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】（五）测定给药后小鼠痛阈值给药后的15、30、60、90min测定各鼠痛阈值。若小鼠在热板上60s仍无痛觉反应，应取出，按60s计。abc15′30′60′90′实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十四页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】（五）数据记录给药前给药后组别第1次第2次平均15′30′45′60′

90′

延胡索注射液a1—a5哌替啶注射液b1—b5生理盐水c1—c5实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十五页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】（六）数据处理（1）组内处理分组动物数给药前平均值（s）给药后痛阈值（s）痛阈提高百分率%1530609015306090延胡索液5哌替啶5生理盐水5实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十六页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】（六）数据处理（2）班级12小组数据汇总分组动物数给药前平均值（s）给药后痛阈值（s）痛阈提高百分率%1530609015306090延胡索液60哌替啶60生理盐水60实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十七页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】（六）数据处理（2）痛阈提高百分率用药后平均痛阈值用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值×100%实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十八页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【方法与步骤】数据参考实验五、延胡索对小白鼠的镇痛作用第二十九页，共34页。郑州牧业工程高等专科学校精品课程教学课件ZhengzhoucollegeofAnimalsHusbandryEngineering《中兽医基础与临床

》实验教学【注意事项】室温以15～20℃为宜，过低则小鼠反应迟钝，过高则过于敏感，而引起跳跃，影响实验的准确性。正常小鼠一般放入烧杯后10～15s内出现不安，举前肢，舔后足，踢后肢，跳跃等现象。这些动作均不作为疼痛指标，只有舔后足才作为疼痛的指标。一般不选用雄性小鼠，因雄性小鼠阴囊可触及烧杯底部，易