实验培养基的配制

1、计算2、称量牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0gH2O1000mL琼脂2.0g现在是1页\一共有24页\编辑于星期三3、熔化4、调节pH现在是2页\一共有24页\编辑于星期三5、分装现在是3页\一共有24页\编辑于星期三6、灭菌现在是4页\一共有24页\编辑于星期三灭菌——高压灭菌1.05kg/cm2、121℃，15—30min灭菌锅高压灭菌作用：杀死所有活的微生物及芽孢现在是5页\一共有24页\编辑于星期三（补充：倒“平板”）超净工作台现在是6页\一共有24页\编辑于星期三倒平板约50℃防止培养皿盖上的水珠滴落污染培养基灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基现在是7页\一共有24页\编辑于星期三7、恒温培养（恒温培养箱）现在是8页\一共有24页\编辑于星期三培养基的配制

称量

熔化

灭菌

调节pH

分装加热熔化琼脂（搅拌）倒入三角烧瓶，与其他器具一起放入灭菌锅高压灭菌定容调节PH至计算恒温培养现在是9页\一共有24页\编辑于星期三（一般需要作无菌检查）核心：保证无菌操作超净工作台超净工作台、酒精灯火焰旁操作现在是10页\一共有24页\编辑于星期三分析与讨论1、如何检验培养基是无菌的？2、常用灭菌方法有哪些？将未接种的培养基放在恒温培养箱中适宜条件下培养2-3d，如果无菌落产生，则培养基是无菌的。高压（蒸气）灭菌灼烧灭菌用于培养基、培养皿、锥形瓶等用于接种环等金属器具现在是11页\一共有24页\编辑于星期三3、消毒与灭菌的区别（1）消毒（如巴氏消毒法62℃，30min、酒精擦拭等）仅杀死活的微生物，不能杀死芽孢。（2）灭菌（高压灭菌1.05kg/cm2、121℃、15-30min；灼烧灭菌、干热灭菌等）能杀死所有微生物及其芽孢。现在是12页\一共有24页\编辑于星期三微生物重点实验2——微生物的培养掌握划线法接种方法与作用现在是13页\一共有24页\编辑于星期三单个菌体2.特征：大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。3.功能：1.定义：补充：菌落鉴定菌种的重要依据固体培养基上大量繁殖子细胞群体菌落是由单个细胞分裂形成的种群现在是14页\一共有24页\编辑于星期三常用工具图示接种环玻璃刮铲现在是15页\一共有24页\编辑于星期三微生物（如大肠杆菌）的培养：㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.计算2.称量3.熔化4.调节pH5.分装6.灭菌7.恒温培养现在是16页\一共有24页\编辑于星期三二.大肠杆菌的培养：㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡培养大肠杆菌：（超净工作台上、酒精灯火焰旁进行）划线法菌种1.接种：接种环划线法接种冷却后刮取菌苔划线法接种：使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落现在是17页\一共有24页\编辑于星期三枯草杆菌菌落菌落灰白色，较大，边缘比较粗糙大肠杆菌菌落菌落灰白色，圆形，透明或半透明滕黄八叠球菌菌落菌落黄色，圆形、边缘光滑现在是18页\一共有24页\编辑于星期三问题讨论为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上的微生物污染培养物杀死残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时接种物逐渐稀释，培养后得到单个菌落。避免接种环上的细菌污染环境和感染操作者。现在是19页\一共有24页\编辑于星期三划线法二.大肠杆菌的培养：㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡培养大肠杆菌：1.接种：2.培养：将接种后的平板倒置放入37℃恒温箱中培养2～3d现在是20页\一共有24页\编辑于星期三Q：为什么划线法接种能观察到单个菌落？划线法接种时，使接种物逐渐稀释，最后出现单个细菌，培养后出现单个菌落。要获得单菌落一般选用_______法接种划线划线法优点：可对微生物进行分离、纯化，获得单一菌落现在是21页\一共有24页\编辑于星期三1、鉴别培养基是否被杂菌污染的方法是（）A.将未接种的培养基放在实验桌上培养B.将未接种的培养基放在窗台上培养C.将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养D.将已接种的培养基放在恒温培养箱中培养C试一试2、要将配制好的培养基进行灭菌，通常采用的方法是（）A.灼烧灭菌B.高压蒸气灭菌C.干热灭菌D.煮沸灭菌B现在是22页\一共有24页\编辑于星期三B试一试3、下列对于灭菌和消毒的理解，不正确的是（）A.灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.消毒和灭菌实质上是相同的C.接种环用灼烧法灭菌D.常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸气灭菌等现在是23页\一共有24页\编辑于星期三4、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是（）①化学