需氧革兰阳性杆菌公开课课件

需氧革兰阳性杆菌芽胞杆菌属Bacillus李斯特菌属Listeria丹毒斯菌属Erysipelothrix加德纳菌属Gardnerella需氧芽胞杆菌属（Bacillus）48个种与医学有关5个种炭疽芽胞杆菌（B.anthracis）蜡样芽胞杆菌（B.cereus）蕈状芽胞杆菌（B.mycoides）巨大芽胞杆菌（B.megaterium）苏云金芽胞杆菌（B.thuringiensis）1临床意义引起人、蓄共患的急性传染病，包括皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽、败血性炭疽，烈性传染病,死亡率极致病因子：荚膜：抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散炭疽毒素：保护性抗原、致死因子、水肿因子病后可获得持久免疫力炭疽芽胞杆菌2炭疽芽胞杆菌革兰阳性大杆菌，两端截平，竹节状排列，有芽胞、无鞭毛、可有毒株有荚膜，芽胞椭圆形，小于菌体，位于菌体中央，多在有氧条件下形成，25～30℃，在培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中，都易形成芽胞在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸体严禁解剖3生化反应葡萄糖+、麦芽糖+、蔗糖+、卵磷脂酶弱+、触酶+硝酸盐还原试验+、VP＋、吲哚－、硫化氢－、柠檬酸盐－、尿素－明胶液化＋胨化牛乳：在牛乳中生长2～4天后牛乳凝固并缓慢胨化5抗原菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热，特异性不高，病兽脏器皮毛加热后仍可与相应抗体反应，称Ascoli热沉淀反应荚膜多肽抗原：抗吞噬，与毒力有关芽胞抗原：炭疽毒素Anthraxtoxin：由保护性抗原、致死因子、水肿因子形成。6抵抗力耐热、耐干燥对氧化剂敏感对青霉素、磺胺类抗生素敏感7痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物2%兔血清肉汤快速增菌37℃4h荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验直接涂片荚膜染色G染色初步报告0.2ml注射小白鼠腹腔，8h后解剖涂片G染色、荚膜染色初步报告快速检验程序核酸检测Ascoli试验皮毛、腐败脏器等9生化反应噬菌体裂解青霉素抑制毒力试验皮毛、腐败脏器等血液以NG制成悬液经加温或饱和尿素处理肉汤增菌培养BAP或戊烷脒平板2%兔血清肉汤4－8hG染色镜检菌落特征动力观察串珠试验确定报告荚膜肿胀试验分离培养检验程序法定报告传染病，发现疑是病例应于24小时内上报CDC10戊烷脒多粘菌素琼脂基础培养基

25μg/L戊烷脒:杀灭利什曼原虫等寄生虫3000IU/L多粘菌素

2%脱纤维羊血

11菌落特征形态染色生化试验:表13－1串珠试验:接种于含青霉素(0.05～0.5U/ml)的肉汤中，37℃6h，大而均匀成串的圆球状菌体，与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关，类炭疽无此现象鉴定试验13接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板，37℃24h生长受抑制不生长

串珠和青霉素抑制联合试验：兔血琼脂平板抑菌环青霉素纸片青霉素抑制试验串珠形成区14噬菌体裂解试验：AP631炭疽噬菌体

NaHCO3毒力试验：接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板，10%CO2、37℃、24～48h，有毒株形成荚膜—黏液型菌落，无毒株不形成荚膜—粗糙型菌落毒素动物试验：小鼠、家兔或豚鼠皮下接种植物凝集素试验：荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断其它实验15蜡样芽胞杆菌Bacilluscereus形态：革兰阳性大杆菌、两端钝圆、有芽胞、周鞭毛、无荚膜培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温度30~35℃，营养要求不高。普通琼脂平板：菌落较大，灰白色，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，有蜡样光泽BAP有β溶血卵黄平板—生长迅速，培养3h后，虽看不到菌落，但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环，称乳光反应或卵黄反应17生化反应葡萄糖＋、蔗糖＋、麦芽糖＋等卵磷脂酶+、VP＋胨化牛乳＋、液化明胶＋，多次传代后生化特性常可改变18微生物学检查呕吐物、残留食物等活菌计数接种BMBAP卵黄琼脂平板37℃18~24h直接涂片染色镜检动物试验生化反应血清凝集报告结果19三、枯草芽胞杆菌21生物学性状——形态染色革兰阳性大杆菌、两端钝圆有芽胞、无荚膜、有鞭毛22培养特性BM：灰白色、不透明、干燥、锯齿状粗糙大菌落BAP：β溶血大菌落23炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的鉴别

鉴别项目炭疽芽胞杆菌枯草芽胞杆菌蜡样及其他芽胞杆菌形态菌体两端平截、长链两端钝园、短链两端钝园、短链荚膜多肽荚膜－－动力－++菌落卷发状，有毒株为M型锯齿状、R型蜡样或R型肉汤生长絮状沉淀、上层清形成菌膜均匀混浊有菌膜卵磷脂酶+－++溶血反应不溶或微溶血β溶血β溶血Ascolis试验+－－串珠试验+－－青霉素抑制试验+－－植物凝集素试验+－－荚膜肿胀试验+－－／荧光抗体染色动物毒力试验+－蜡样芽胞杆菌的肠毒素可致小鼠等动物发病致死，但不产生荚膜，其他需氧芽胞杆菌（－）噬菌体裂解试验+－－25李斯特菌属产单核细胞李斯特菌红斑丹毒丝菌26临床意义主要引起脑膜炎、败血症传播途径：粪－口途径，胎盘和产道致病因子：溶血素和菌体表面成分29微生物检查标本涂片革兰染色镜检荧光抗体染色动力检查（25℃，37℃）血液肉汤增菌脑脊液沉淀物咽喉拭子、组织、粪便冷增菌接种羊血琼脂平板生化反应血清学试验动物试验30二、红斑丹毒丝菌革兰阳性杆菌，无芽胞，无鞭毛，无荚膜厌氧或微需氧BAP：形成两种菌落——光滑型小菌落和粗造型大菌落。发酵葡萄糖及乳糖、液化明胶、产生硫化氢主要引起家畜感染及人类丹毒31加德纳菌属阴道加特纳菌32生物学性状多形性，单个或成双排列，染色不定（视菌龄和菌种而定：临床株G+，保存株G－），无芽胞、无荚膜、无鞭毛兼性厌氧，营养要求高，BAP：可有β溶血葡萄糖＋、麦芽糖＋、蔗糖＋氧化酶－、触酶－对青霉素类敏感、对磺胺类耐药33临床意义与非特异性阴道炎（BV）有关BV是阴道内乳酸杆菌被另一组厌氧菌为主的细菌取代，同时伴有阴道分泌物性质改变的一组综合征。主要病因为阴道内乳酸杆菌大量减少，伴有阴道加特纳菌、类杆菌、消化球菌及支原体大量