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文档简介
微生物实验室培养教案
【课标解读】
1、知道培育基的基础学问,进行无菌技术的操作
2、进行微生物的培育
【教学重难点】无菌技术的操作
【教学过程】
(一)引入新课
2023年,由国家标准委和卫生部联合发布的《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2023)强制性国家标准和13项生活饮用水卫生检验国家标准正式实施。新标准中的饮用水水质指标由原标准的35项增至106项,增加了71项。其中,微生物指标由2项增至6项,其中大肠杆菌要求每公升水中不得超过3个。你用什么方法将他们找到并精确 计数?
在传统发酵技术的应用中,都利用了微生物的发酵作用,其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中,为了提高发酵的质量,需要获得优良菌种,并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培育、分别、鉴别等基本技术。现在我们开头学习微生物的培育和应用专题。
(二)进行新课
一、基础学问
1、培育基(阅读教材)
1.1概念(略)
1.2培育基的种类
(1)形态——固体和液体培育基(琼脂)
(2)成分——自然 和合成培育基
(3)作用——选择和鉴别培育基
思索:1、固体培育基和液体培育基你认为哪个更适合工业生产?为什么?
2、如何区分S型细菌和R型细菌?
3、什么是菌落?
【补充】培育基的类型及其应用:(创新设计)
思索:1、硝化细菌、蓝藻与酵母菌的C源和N源有不同吗?能源呢?
2、结合细胞元素组成说明大多数培育基的组成为何有4类?肯定都需要吗?
1.4培育条件——养分物质(特别养分物质—生长因子)、PH、氧气
思索:1、微生物的养分物质就是4类吗?牛肉膏和蛋白胨能为微生物供应哪些养分?
2、特别养分物质是什么?试举一例。(介绍生长因子)
3、你能将土壤中酵母菌、硝化细菌、乳酸菌、固氮菌分别出来吗?说一说最佳(方案)。
4、分别菌种是否肯定要选择培育基?
培育乳酸杆菌时需要添加维生素,培育霉菌时需要将培育基pH调整为酸性,培育细菌时需要将pH调整为中性或微碱性。
2、无菌技术(阅读并思索回答下列问题)
2.1意义、对象
2.2消毒与灭菌的区分
2.3消毒与灭菌的方法、适用对象
思索:1、什么是巴氏消毒法?灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌特殊留意什么?
2、以下各项分别适用哪项无菌技术?简洁说明理由
试管口;培育基;接种操作间;葡萄酒;培育皿;接种针(环);口罩;手;空气;饮用水
3、无菌技术除了防止培育物被污染外,还具有什么目的?
二.试验操作(录像)
1、制备牛肉膏蛋白胨固体培育基
程序:
计算—称量—溶化—调pH—灭菌—倒平板
思索:1、为何将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯溶化?
2、制备过程中要调整相宜的PH值,要在哪一个环节操作?为什么?
3、请阅读倒平板操作(P17)并回答争论1—4
4、试管培育基常制成斜面的作用是什么?
2、接种(4种方法)
2.1平板划线法:通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基表面。其操作步骤是:
2.1.1目的
2.1.2平板划线操作(略)
思索:请回答P18争论1—3
2.2稀释涂布平板法:将菌液进行一系列梯度稀释,并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培育基上进行培育。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的`标准菌落。
2.2.1目的
2.2.2系列稀释操作:
①取盛有9mL水的无菌试管6支,编号101、102、103、104、105、106。②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中,并吹吸3次,使之混匀。
③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打匀称,获得102倍液。依此类推。
思索:为什么操作中试管口和移液管应在离火焰1~2cm处?整个操作过程中使用了几支移液管?
2.2.3涂布平板操作
思索:1、涂布器操作要点及缘由
2、教材P19争论
3、结果分析评价
3.1培育未接种培育基的作用是对比,若有菌落形成,说明培育基灭菌不彻底。
3.2假如在培育基上观看到不同形态的菌落,请你分析缘由?
3.3培育12h和24h后的菌落大小、位置相同吗?;缘由是什么?。
4、课题延长
频繁使用的菌种利用临时保藏法保存,长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培育基培育后
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