微生物的实验室培养

微生物的实验室培养第1页，共38页，2023年，2月20日，星期六是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称．一、微生物特点：.1.个体微小，结构简单;在形态上，个体微小，肉眼看不见，需用显微镜观察，细胞大小以微米和纳米计量。有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用2.繁殖快:生长繁殖快，在实验室培养条件下细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代。3.代谢类型多，活性强。4.分布广泛:有高等生物的地方均有微生物生活，动植物不能生活的极端环境也有微生物存在。5.数量多:在局部环境中数量众多，如每克土壤含微生物几千万至几亿个。6.易变异:相对于高等生物而言，较容易发生变异。在所有生物类群中，已知微生物种类的数量仅次于被子植物和昆虫。微生物种内的遗传多样性非常丰富。所以微生物是很好的研究对象，具有广泛的用途。第2页，共38页，2023年，2月20日，星期六生物动物界植物界原生生物界原核生物界真菌界病毒第3页，共38页，2023年，2月20日，星期六原生生物界草履虫变形虫疟原虫返回第4页，共38页，2023年，2月20日，星期六第5页，共38页，2023年，2月20日，星期六真菌界酵母菌霉菌食用菌第6页，共38页，2023年，2月20日，星期六真菌第7页，共38页，2023年，2月20日，星期六如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉第8页，共38页，2023年，2月20日，星期六第9页，共38页，2023年，2月20日，星期六蘑菇第10页，共38页，2023年，2月20日，星期六孢子是一种生殖细胞,但不需要结合就直接发育成新个体.孢子囊孢子直立菌丝匍匐菌丝曲霉第11页，共38页，2023年，2月20日，星期六病毒动物病毒植物病毒噬菌体第12页，共38页，2023年，2月20日，星期六病毒的结构第13页，共38页，2023年，2月20日，星期六病毒

第14页，共38页，2023年，2月20日，星期六SARS冠状病毒、禽流感病毒第15页，共38页，2023年，2月20日，星期六朊病毒（蛋白质病毒）第16页，共38页，2023年，2月20日，星期六原核生物界细菌蓝藻支原体衣原体放线菌立克次氏体第17页，共38页，2023年，2月20日，星期六细菌的外形与大小图1-1常见的三种细菌典型形态A.球菌B.杆菌C.弧菌第18页，共38页，2023年，2月20日，星期六第19页，共38页，2023年，2月20日，星期六芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.第20页，共38页，2023年，2月20日，星期六菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。第21页，共38页，2023年，2月20日，星期六细菌的营养类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。自养菌:分类,举例?异养菌:腐生菌寄生菌大部分病原菌光合自养型:光合细菌化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌第22页，共38页，2023年，2月20日，星期六菌落细菌的菌落特征因种而异第23页，共38页，2023年，2月20日，星期六放线菌1、结构：单细胞原核分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）第24页，共38页，2023年，2月20日，星期六（二）培养基

培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、半固体培养基。（2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。1.培养基的类型第25页，共38页，2023年，2月20日，星期六固体培养基：菌落第26页，共38页，2023年，2月20日，星期六液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长第27页，共38页，2023年，2月20日，星期六半固体培养基：无动力有动力(弥散)第28页，共38页，2023年，2月20日，星期六2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．第29页，共38页，2023年，2月20日，星期六4.培养基的用途液体培养基：增菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种半固体培养基：动力检测第30页，共38页，2023年，2月20日，星期六

水无机盐碳源氮源生长因子概念

供给微生物碳素营养的物质能被微生物吸收利用的含氮物质某些微生物生长所必需的少量物质来源

磷酸盐、硫酸盐、钾、钠、钙、镁、铁等盐类无机碳:CO2、NaHCO3等有机碳源：糖类（最常）、脂肪酸、花生粉饼、石油等无机氮源：N2、氨、铵盐、硝酸盐等有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉等维生素、氨基酸、碱基、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液（肝脏浸出液、麦芽汁）作用微生物细胞的组成成分，溶解物质，生物化学反应的介质为微生物生长繁殖及其一系列生命活动提供不可缺少的矿质元素要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物;异养微生物的主要能源物质.主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。一般是酶和核酸的组成成分。说明

不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大，而且微生物对碳源的需求量最大。异养微生物：含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源微生物之所以要补充生长因子，往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限第31页，共38页，2023年，2月20日，星期六三、无菌技术1.无菌技术的概念

无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。成功地培养微生物的关键。第32页，共38页，2023年，2月20日，星期六（１）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别

（2）灭菌的定义：3.常用的消毒与灭菌的方法

条

件结

果能否消灭芽孢和孢子常用方法消毒较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物不能煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法紫外线消毒法等灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物能

高压蒸汽灭菌法干热灭菌法灼烧灭菌法第33页，共38页，2023年，2月20日，星期六方

法操作过程应用范围

消

毒煮沸消毒法100℃煮沸5～6min日常生活中广泛使用巴氏消毒法60～80℃下处理15～30min牛奶、啤酒、果酒和果酱等不宜进行高温消毒的液体化学药物消毒法用体积分数为70～75%的乙醇、碘酒涂抹，来速水喷洒等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等紫外线消毒法30W紫外灯照射30min接种室空气

灭

菌灼烧灭菌法酒精灯火焰灼烧微生物接种工具如接种环、接种针或其它金属用具等，接种过程中试管口活锥形瓶瓶口等干热灭菌法电热鼓风干燥箱160～170℃加热1～2h玻璃器皿（如吸管、培养皿等）、金属用具等凡是不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品。高压蒸汽灭菌法100kPa、121℃维持15～30min培养基及多种器材、物品第34页，共38页，2023年，2月20日，星期六1、灼烧灭菌灭菌的方法：第35页，共38页，2023年，2月20日，星期六2、干热灭菌：