药理学实验课

试验课程介绍试验课程安排共18课时（1）试验基本技能（2）吗啡镇痛试验（5）药品对家兔尿量影响（6）传出神经药品对家兔血压影响（4）药品对家兔离体肠平滑肌作用（3）药品抗炎试验药理学实验课第1页试验课程学习要求试验前试验中试验后1.预习试验指导，明确试验目标和要求，充分了解试验方法

2.进入试验室，必须穿白大衣.3.检验试验器材

1.依据试验内容进行小组内分工2.严格、准确地按照指导中试验方法进行试验操作。3.仔细、真实统计试验结果。1.死亡动物放在指定地点；存活动物放入笼内。2.将器材洗净擦干，放回原处3.每小组轮番负责搞好试验室内卫生。药理学实验课第2页试验课程学习目标DBCA巩固药理学基本理论学习基本试验方法培养实事求是学习作风培养动手能力、科研能力药理学实验课第3页基本试验操作不一样给药路径药品对小鼠睡眠时间影响药理学试验一、药理学实验课第4页试验目标：1）掌握小鼠给药基本方法。2）比较不一样给药路径药品起效时间快慢。试验原理：不一样给药路径药品起效时间不相同。1试验目标及原理药理学实验课第5页试验动物：小鼠试验药品：1%戊巴比妥钠2主要试验材料药理学实验课第6页3称重、分组腹腔给药皮

下

给

药灌胃给药（0.1ml/10g）小鼠翻正反射消失时翻正反射再次恢复时间主要试验过程药理学实验课第7页1小鼠基本捉拿、固定方法

2小鼠基本给药方法试验基本技能药理学实验课第8页右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定。如图-1。单手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出拇指、食指及中指抓住鼠双耳及头部皮肤而固定。如图-2。图1图2注意事项：小鼠固定方法药理学实验课第9页注意事项：1.取背部及后腿皮下，注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入，固定后即进行注射。

皮下注射药理学实验课第10页注意事项：

1、针头刺入部位不宜太靠近上腹部或太深，以免刺破内脏。针头与腹腔角度不宜太小，防止刺入皮下。

2、使用针头不宜太粗，防止药液注射后从注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。

腹腔注射药理学实验课第11页注意事项：1.用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，其它三指抓住背部皮肤，将鼠抓持在手掌内，固定好动物，头部和颈部保持很平,右手取注射器进行灌胃。

2.灌时针头沿鼠口角经过食管进入胃内。灌时如很通畅，则表示针头已进入胃内；如动物有呕吐动物或强烈挣扎，必须拔出后按上述方法重新操作。决不可进针不顺硬向里插。

灌胃给药药理学实验课第12页（1）注意基本给药路径正确操作。（2）注意小鼠翻正反射消失时间判定（＞1min）。（3）客观真实统计试验数据。4试验注意事项药理学实验课第13页影响药品起效原因有哪些？请分析此次试验中，那些原因可影响试验结果。？仔细观察统计试验结果，结合药理学总论知识思索，何种给药路径起效最快。为何？问题与思索药理学实验课第14页吗啡镇痛试验药理学试验二、药理学实验课第15页试验目标：①掌握镇痛药试验方法。（热板法、扭体法）②观察药品镇痛作用。试验原理：热刺激或者化学刺激物使小鼠产生疼痛反应，观察给药前后小鼠疼痛反应改变。（痛阈值、扭体次数）1试验目标及原理药理学实验课第16页试验动物：小鼠（雌性）试验药品：0.4%吗啡

主要仪器：热板测痛仪（RB-200智能热板仪）2主要试验材料药理学实验课第17页3

设定仪器温度（55℃）动物初筛给药组：0.4%吗啡0.1ml/10g给药组：生理盐水0.1ml/10g腹腔注射

给药后30min、45min、60min再次测定各组小鼠痛阈值。主要试验过程（热板法）药理学实验课第18页筛选指标：小鼠痛阈值——即小鼠出现疼痛反应时间。

以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。

测定2次痛阈值，以痛阈值大于5秒，小于30秒，做为筛选合格动物。

小鼠筛选方法：药理学实验课第19页动物随即分组给药组：0.4%吗啡0.1ml/10g腹腔注射

30min后各组小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）；统计15min内各组小鼠扭体次数。对照组：生理盐水0.1ml/10g3小鼠扭体反应主要试验过程（扭体法）药理学实验课第20页热板仪温度设定：55℃±0.5℃。室温:以15～20ºC为宜。热板法中动物性别选择：雌性。痛阈值判定指标：添后足。痛阈值时间：初筛（＞5s、＜30s）。超出60s动物未添足，将动物取出，痛阈值以60s计算。试验中保持小鼠足底及热板内干燥。冰醋酸现用现配。4试验注意事项药理学实验课第21页两种镇痛模型区分？吗啡药理学作用、机制？？问题与思索药理学实验课第22页药理学试验

抗炎试验三、药理学实验课第23页1.1试验目标：学习利用化学药品或者鸡蛋清制急性炎症动物模型方法。观察糖皮质激素抗炎作用。1.2试验原理：化学刺激物或者蛋清，可致动物急性炎症，出现局部肿胀。比较給予药品前后动物局部肿胀程度改变从而观察到药品抗炎作用。1试验目标及原理药理学实验课第24页试验动物：小鼠、大鼠（雄性）试验药品：氢化可松主要仪器（PV-200足趾肿胀测定仪）

2主要试验材料药理学实验课第25页

动物称重、分组踝关节突起点标识，作为测量标志（见后图）给药组：氢化可松溶液1ml/100g

体重对照组：生理盐水1ml/100g

体重腹腔注射

30min，从右后足掌心向掌跖关节方向进针，皮下注射新鲜蛋清0.1ml。(见后图)注射蛋清后30min、60min、90min，测量右后足体积，3试验主要步骤（大鼠足肿胀）药理学实验课第26页皮下注射新鲜蛋清大鼠足外踝标识试验照片药理学实验课第27页小鼠称重、标识、分组给药组：氢化可松0.1ml/10g腹腔注射

30min后用二甲苯50μl均匀涂抹每只鼠右耳

对照组：生理盐水0.1ml/10g3

90mim后小鼠脱臼处死，分别用打孔器取相同部位左右耳片，电子天平称重。主要试验步骤（小鼠耳肿胀）药理学实验课第28页抗炎试验中动物性别选择：雄性。测定大鼠足体积时，选定统一测量位置（大鼠足外踝关节突起）。小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。防止滴入耳廓内。小鼠左右耳打耳片位置统一（耳廓中间部位）。4试验注意事项药理学实验课第29页炎症表现以及炎症类型有哪些？？本试验中选择雄性动物原因？问题与思索药理学实验课第30页常见炎症模型介绍1非特异性炎症模型：急性大鼠足肿胀小鼠耳肿胀白细胞游走法2非特异性炎症模型：慢性棉球植入法大鼠巴豆气囊法3免疫性炎症弗氏完全佐剂致炎法药理学实验课第31页药理学试验

药品对家兔离体肠平滑肌作用四、药理学实验课第32页1.1试验目标：学习离体平滑肌器官试验方法。观察拟胆碱药和抗胆碱药对离体家兔肠平滑肌作用。1.2试验原理：乙酰胆碱经过激动M受体兴奋胃肠平滑肌；阿托平可阻断M受体；氯化钡直接兴奋胃肠平滑肌。1试验目标及原理药理学实验课第33页2主要试验材料试验动物：家兔试验药品：乙酰胆碱溶液（1:10万）、0.1%硫酸阿托品溶液、1%氯化钡溶液主要仪器：离体平滑肌槽、生物机能系统药理学实验课第34页3①离体肠肌制备取回肠置冷台氏液中制备离体肠肌家兔处死试验主要步骤1药理学实验课第35页3②安装离体试验装置在浴槽（大试管）中，加入台氏液至标线处，加热，维持水温38°C±0.5°C。试验主要步骤2药理学实验课第36页3③安装离体试验装置取回肠，固定于平滑肌槽内调整悬挂丝线松劲程度调整通气阀每秒钟1-2个气泡点击桌面中BL-420图标，进入主菜单试验主要步骤3药理学实验课第37页试验主要步骤4正常曲线乙酰胆碱阿托品乙酰胆碱1.肠管稳定10分钟，统计一段正常活动曲线。2.加入1:10万乙酰胆碱溶0.2ml，统计其收缩幅度3.收缩到最高点时，马上加入0.1%硫酸阿托0.1ml。观察结果。4.平滑肌收缩稳定后，再加入1:10万乙酰胆碱溶液，相比较，观察结果有何不一样。3④添加药液药理学实验课第38页试验主要步骤5Bacl2乙酰胆碱加入1%氯化钡溶液1ml待作用至最高点时，加入0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，再次观察结果。3④添加药液药理学实验课第39页冲洗和分离肠管时动作应轻柔，尽可能防止牵拉肠管。肠管穿线时，对角线穿过肠壁，只需穿过一层肠壁。台氏液应保持在38±0.5°C，换液时，台氏液亦应38±0.5°C。加药时不要把药液直接加到回肠上，以免影响结果。浴温和肠肌张力均可影响试验结果，应注意调整。4试验注意事项药理学实验课第40页阿托品是否对于乙酰胆碱和氯化钡都有拮抗作用？？试验中能影响离体肠肌收缩活性必要条件有哪些？问题与思索药理学实验课第41页药理学试验四、药品利尿作用药理学实验课第42页1.1试验目标：

学习学习利尿试验方法.观察利尿药对尿量影响。1.2试验原理：呋噻米属高效利尿药，经过抑制髓袢升枝粗段对氯化钠重吸收而到达利尿作用。1试验目标及原理药理学实验课第43页2主要试验材料试验动物：雄性家兔，体重2—3kg

试验药品：3%戊巴比妥钠、1%呋噻米、主要仪器：烧杯、膀胱漏斗、10ml量筒。

药理学实验课第44页1、取家兔1只，称重，清水灌胃30ml/kg

3试验主要步骤1药理学实验课第45页2、30min后，用3%戊巴比妥钠1ml/kg经耳缘静脉注射麻醉试验主要步骤2药理学实验课第46页3、家兔背位固定于兔台上。耻骨联合前正中切开腹部皮肤4～6cm，暴露膀胱。

试验主要步骤3药理学实验课第47页4、分离输尿管，结扎尿道内口。在膀胱游离部作荷包缝合，然后剪开小口插入膀胱漏斗并固定。

试验主要步骤4药理学实验课第48页5、统计10分钟正常尿量；耳缘静脉注入呋噻米0.5ml/kg，观察并统计各药给药后10min尿液滴数及尿量。

试验主要步骤5药理学实验课第49页家兔麻醉过程中，控制麻醉药推注速度，亲密观察试验过程中家兔情况。手术过程中，动作轻柔，以免损伤膀胱。准确找到输尿管，注意输尿管生理比邻位置。4试验注意事项药理学实验课第50页？呋塞米强大利尿作用原因是什么？尿液生成正常过程？问题与思索药理学实验课第51页药理学试验传出神经系统药品对家兔动脉血压影响五、药理学实验课第52页1.1试验目标：学习麻醉动物急性血压试验方法。观察传出神经药品对动物血压影响。1.2试验原理：盐酸肾上腺素溶液、酚妥拉明溶液等药品能与心肌或者血管平滑肌上对应受体结合，从而影响家兔血压。1试验目标及原理药理学实验课第53页2主要试验材料1

试验动物：家兔试验药品：3%戊巴比妥钠溶液、0.001%肾上腺素溶液、0.001%去甲肾上腺素溶液、0.001%异丙肾上腺素溶液、酚妥拉明（1%溶液）

、普萘洛尔（0.01%溶液）、乙酰胆碱（0.001%溶液）、阿托品（0.01%溶液）.药理学实验课第54页2主要试验材料2主要仪器：压力换能器、BL-420生物机能试验系统、手术刀、手术剪、止血钳、气管插管、动脉插管、动脉夹、头皮静脉注射针头等。药理学实验课第55页3①麻醉与手术称重、麻醉、固定腹腔注射3%戊巴比妥钠1ml/kg