2022-2023学年人教版（2019）选择性必修三 2-2-1动物细胞培养 课件（20张）

1.图片中的物质是什么？2.这块人的皮肤是怎么来的？其主要用途是什么？3.怎样培养人的皮肤？

思考讨论：第2节

动物细胞工程

◆动物细胞培养◆动物细胞融合◆单克隆抗体制备◆动物体细胞核移植技术和克隆动物动物细胞培养是动物细胞工程的基础。Ⅰ

动物细胞培养一、动物细胞培养的概念

动物细胞培养是指从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。概念②分散成单个细胞③适宜培养条件④原理：细胞增殖①取出组织无菌、无毒温度、pH、渗透压气体环境、营养物质⑤终点：细胞——解除接触性抑制二、基本培养条件1.营养条件（1）合成培养基

（3）液体培养基（也称培养液）2.无菌、无毒环境（2）加入血清等天然成分糖类（葡萄糖）氨基酸、维生素无机盐

④定期更换培养液③添加适量抗生素①对培养液和培养用具进行灭菌②无菌操作1.动物细胞培养的培养基中为什么要加入血清等天然成分？人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，血清等一些天然成分的营养成分比较齐全，可以弥补人工培养基的不足。2.合成培养基：将细胞所需的营养物质按照种类和需要量严格配制而成的培养基3.为什么要定期更换培养液？清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害3.温度、pH和渗透压温度：36.5±0.5℃pH：7.2—7.4渗透压：维持细胞正常的形态和功能4.气体环境仪器：培养皿或松盖培养瓶，CO2培养箱置于含有

95%

空气和

5%

CO2

的混合气体的

CO2

培养箱中进行培养（1）气体组成O2：细胞代谢所必需CO2：维持培养液的pH（2）具体操作动物胚胎或幼龄动物的组织、器官剪

碎胰蛋

白酶分散成单个细胞加培

养液细胞悬液转入培养瓶CO2培

养箱原代培养分散、分瓶CO2培养箱传代培养取动物组织分散成单个细胞CO2培养箱原代培养三、培养过程细胞悬液转入培养瓶分散、分瓶CO2培养箱传代培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官转入培养瓶40-50代细胞无限传代传代培养单个细胞剪碎、胰蛋白酶处理细胞悬液加培养液稀释10代细胞细胞株细胞系原代培养（三）过程分瓶培养胰蛋白酶处理动物组织消化后的初次培养①原代培养特点：单层贴壁生长要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附②传代培养原代培养的细胞处于接触抑制后，

用胰蛋白酶处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，然后加入新的培养液，将细胞分离稀释，并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内，这个过程称传代培养。（分瓶培养的过程）传代10代以内，遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。传代10-50代左右，增长缓慢以至于完全停止，部分细胞核型可能发生变化（遗传物质可能改变）继续传代培养少部分细胞获得不死性，细胞突变，遗传物质已经改变，等同于癌细胞。7、传代培养中，第10代细胞与第50代以后细胞的主要区别是什么？▲细胞株：传代细胞一般能传到40-50代，遗传物质一般不会发生改变，叫细胞株。▲细胞系：传代50代以后不能再传下去，部分细胞遗传物质发生了改变，能连续传代，获得不死性，叫细胞系。1.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？2.为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？3.怎样制成细胞悬液？4.用胃蛋白酶可以吗？为什么？细胞生命力旺盛，分化程度低，分裂能力强①机械方法：剪碎②胰蛋白酶或胶原蛋白酶：分散成单个细胞③加培养液（1）增大细胞与培养液的接触面积，有利与细胞吸收营养物质和排出代谢废物。（2）解除接触性抑制不可以；多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高5.体外动物细胞培养类型：6.动物细胞培养的目的是什么？7.细胞收集方法：8.细胞贴壁：9.接触抑制：10.原代培养：11.传代培养：使细胞数目增多。悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的现象当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。分瓶之前的细胞培养，即动物组织经初次处理后的培养分瓶后的细胞培养①细胞悬浮在培养液中增殖；②细胞贴附于基质表面增殖先用胰蛋白酶分散成单个细胞后，再用离心法收集比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的植物组织培养和动物细胞培养比较细胞的全能性细胞增殖固体培养基液体培养基蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清植物体许多细胞快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞及代谢产物四、干细胞培养及应用1.干细胞：动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。四、干细胞培养及应用1.干细胞（1）概念：动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。（2）分布：早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中（3）分类：胚胎干细胞

成体干细胞简称ES细胞根据全能性大小分为：全能干细胞、多能干细胞、专能干细胞2.干细胞的种类（1）胚胎干细胞（简称ES细胞）①概念：也叫全能干细胞，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。②分布：早期胚胎③特点：体积小、核大、核仁明显④应用：ES细胞在体外分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等⑤应用的局限性：必须从胚胎中获取，涉及伦理问题，因而限制了在医学上的应用（2）成体干细胞①概念：成体组织或器官内的干细胞②分布：成体的骨髓和脐带血等多种组织和器官中③特点：具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力④种类：多能干细胞和专能干细胞⑤发现最早、研究最多的、应用最成熟的实例：造血干细胞。主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中

上皮基底层干细胞成肌干细胞神经元干细胞上皮细胞神经细胞肌细胞（3）诱导多能干细胞（简称iPS细胞）①概念：通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞，简称iPS细胞②诱导方法：a.将特定基因或特定蛋白导入细胞（成纤维细胞以及已分化的T细胞、B细胞均可）b.用小分子化合物诱导③优点：a.诱导过程无须破坏胚胎b.iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应可治疗镰状细胞贫血症，在治疗阿尔兹海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展④应用：移植取成纤维细胞iPS细胞转入相关因子细胞发生转化分化胰岛细胞神经元血细胞肠上皮细胞心肌细胞肝细胞病人iPS细胞用于治疗人类疾病示意图3.干细胞的应用

有着自我更新能力及分化潜能的干细胞，与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关（1）应用