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种子生产与经营专业聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳操作方法

聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳是在两块垂直放置的、间隔数毫米的平行玻璃板中进行，所得的是垂直的平板状的凝胶。

一、垂直板型凝胶模子及电泳槽垂直板电泳槽中，有一种操作比较简便，比较有效的夹芯式电泳槽。将玻璃片嵌入凹槽时，长玻璃片下部与胶带保持2~3mm的距离，以使此端的凝胶与一侧的电极槽相通。为避免胶液由此狭缝漏掉，灌胶时，可先向凝胶模底部灌入用电极缓冲液配制的分离胶液，待分离胶凝固后即封住凝胶模下面的窄缝，而在通电时又可做为盐桥。聚丙烯酰胺凝胶液灌在它的上面，形成分离胶。另一较短的玻璃片，其三边嵌入胶带中。因这一玻璃片稍低于前者，将来可使另一侧电极的缓冲液没过玻璃片顶部，使凝胶顶部与电极槽相通，以便样品在电场中泳动。一、垂直板型凝胶模子及电泳槽一、垂直板型凝胶模子及电泳槽凝胶模样品槽模板硅橡胶带玻璃片二、制胶制作凝胶时，将胶液加到距玻璃板顶端约1cm处，然后将样品梳插入胶液顶部。插入样品梳的目的是使凝胶聚合后，在凝胶顶部形成数个相互隔开的凹槽（样品槽），电泳时将样品液加在这些凹槽中。凝胶系统全部成分混合后开始计算时间，聚合作用在15min时开始，0.5~1h后完成。聚合作用是放热的，所以聚合时要加以冷却，控制聚合时的温度相同于电泳时的温度。

小心地取出样品梳，在两个电极槽中充满电极缓冲液。

二、制胶三、加样品液

样品的用量与凝胶板厚度有关。对2mm厚和10mm宽的样品槽，用约20μl样品液。在样品液中常加入指示染料如甲基绿或溴酚蓝。四、染色

垂直板型电泳是在两块垂直放置的、间隔数毫米的平行玻璃板中进行，所得的是垂直的平

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