珠海红树林海洋真菌代谢物抗肿瘤活筛选课件

珠海红树林海洋真菌代谢物抗肿瘤活筛选1、战鼓一响，法律无声。——英国2、任何法律的根本；不，不成文法本身就是讲道理……法律，也----即明示道理。——爱·科克3、法律是最保险的头盔。——爱·科克4、一个国家如果纲纪不正，其国风一定颓败。——塞内加5、法律不能使人人平等，但是在法律面前人人是平等的。——波洛克珠海红树林海洋真菌代谢物抗肿瘤活筛选珠海红树林海洋真菌代谢物抗肿瘤活筛选1、战鼓一响，法律无声。——英国2、任何法律的根本；不，不成文法本身就是讲道理……法律，也----即明示道理。——爱·科克3、法律是最保险的头盔。——爱·科克4、一个国家如果纲纪不正，其国风一定颓败。——塞内加5、法律不能使人人平等，但是在法律面前人人是平等的。——波洛克珠海红树林海洋真菌代谢物抗肿瘤活性筛选答辩人：吴水平指导老师：蔡小玲讲师中山大学化学与化学工程学院第八届创新化学实验与研究基金项目结题答辩化学与化学工程学院海洋天然有机物研究室研究背景和意义海洋微生物天然产物是近年来寻找新药的国际研究热点，从海洋微生物的天然产物中筛选具有活性的化合物成为先导化合物，具有重大的理论意义和应用价值。红树林作为海洋与陆地植物圈的接合部，其伴生的微生物类群属海洋微生物，又具有植物内生微生物的特点，这也造就了红树林内生真菌具有独特的代谢途径和遗传背景，因此对它们的代谢产物进行活性物质的筛选研究可能会有可喜的发现。对于大多数学生来说，初中阶段是他们学习英语真正的开始，因此这一阶段的英语学习对于其日后学习和工作有着相当重要的奠基作用。在当代注重学生综合素质与实用能力提升的背景下，我们进行英语教学的着重点应放在能够帮助学生实现对英语的灵活运用而非单纯是对中考中取得理想成绩。然后由于一些因素的影响，现阶段的初中英语课堂教学仍旧存在着一些比较严重的问题。一、提升初中英语课堂教学活动实用性的重要意义英语课堂教学活动是链接教师与学生的重要环节，提升其有效性、实用性就意味着学生能够在课堂中接受更多的有效信息。而要想实现这个目标，就要求英语教师能够充分整合手中现有的教育?Y源，以英语教学规律与初中生的认知规律为基础，灵活运用多种教学方式及教学手段，创造出富有活力且高效的英语课堂，这对于提高学生对于英语的学习兴趣、减轻学习负担并未今后英语应用都能够打下坚实的基础，因此具有极为积极的意义。二、现阶段初中英语课堂教学中存在的问题尽管近年来广大英语教师在思想转换、活动设计的多样化等方面取得了非常喜人的进步。但是其中仍旧存在着一些缺点和不足。1.课堂活动的滥用导致课堂教学偏离中心。受情节模式理念的影响，初中英语课堂上，每节课教师都必然要组织学生来一次互动活动，使得课堂上气氛热烈，表面看学生的参与度与积极性都非常高，可是从学生的学习效果却并不理想。2.多媒体设备的应用效果亟待提升。现阶段初中英语课堂在多媒体的应用效果方面比较差强人意。这里的效果并非指使用多媒体设备的熟练程度，而是对如何使其与课堂教学相结合的认识不够，也就是多媒体与课堂教学的契合度不高，导致设备的使用效率低下。例如一部分教师，直接采取网上下载或者使用同事制作的成品课件，并将其纹丝不动地应用在自己的课堂上。在这种情况下所使用的课件与其授课风格必然存在着一定的“不合”，从而使多媒体的应用效果大打折扣。3.教学模式过于固定，缺乏灵活运用。现阶段有许多英语教师在授课过程中教学方式比较僵化，恪守着既定课堂模块。例如在当代颇为流行的“校本课程体系”，不少初中学校的英语教研组为了彰显业绩，会推出“某某某课堂教学模式”，并要求英语教师在上课过程中予以执行。导致教师在进行授课时不能根据课程的内容进行合理设置在课堂教学中。三、提升初中英语课堂教学效率的建议针对上文提出的问题，笔者经过深入分析，提出以下几点富有解决性的建议。1.围绕教学重点组织教学活动。初中生在生理发育上虽然较小学生有了很大进步，但是仍旧属于未成年人范畴，他们的思维注意力也同样非常容易因为外界事物的干扰而发生转移。因此在我们的初中英语课堂中，教师一定要注意对课堂教学目标的把握并进行重点。教学活动首先要符合初中生的生理特点以及接受领悟能力；其次是教学活动的设计要具备一定的趣味性。例如在进行初中英语三年级上册Unit2―Wondersoftheworld部分的教学时，可以在前几天分成若干小组，每个小组负责指定区域内名胜古迹或者著名人文景观的收集，然后在课堂上进行小组展示，这样既增强了学生们的知识面，并且真正突出了本节课的教学目标。2.大力提升多媒体的应用效果。多媒体作为当代信息技术飞速发展的产物，可以将我们上课时所需要的视频、音频、动画等要素进行统一和融合。这种模式不仅体现在教学方法上，还应该全方位地体现在教学思路和教学理念之中。教师对于多媒体的应用既要防止浅尝则止，又要杜绝一味依赖，而是要力争实现充分利用、突出效果，使其成为我们提升课堂教学效率的强大助力。例如在九年级下册的《Myfuturelife》授课时，教师可以从网上下载既体现正能量又符合初中生审美习惯的素材做成PPT，并用语言将这些素材贯穿起来，从而使整堂课显得更加流畅，多媒体的应用也更加有的放矢。3.实施多元化教学方式，引起学生学习兴趣。不可否认，校本课程模式的确在一定程度上体现了集体智慧的结晶，它对于那些授课风格尚未固定、授课时间较短的青年教师的确能够起到帮助他们快速成长之目的，但必须引起我们注意的是，校本课程体系不等于抹杀教师的个性，因为每名英语教师的优势和劣势都是不尽相同的。这就要求我们要给予教师充分的自主权，使他们能够针对每节课的授课内容与重点的不同，灵活多变地对教学方式与流程进行排列组合，扬长避短，使每堂课都充满新意，从而进一步吸引学生的注意力，为课堂教学效率的提升提供帮助。总而言之，在新课程标准下，学生对于英语的实际能力被高度强调，加上“减负”的时代背景，使得初中英语课堂的教学效率提升成为了学界关注的重点。只有在课堂中围绕教学中心合理搭配教学活动，充分发挥多媒体在授课过程中的辅助作用，尊重每位教师的授课风格和差异化，尽可能使其扬长避短，才能使我们初中英语的教学效率得到切实地提高。初中化学教学是化学教育的启蒙阶段。新课程标准要求贯彻全面发展的方针，着眼于提高全民族的素质，要以化学基础知识教育学生，培养学生的基本技能和能力，为学生参加社会主义建设和进一步学习打好基础。在农村尤为如此，要实现这一目标，提高教学质量，就必须以提高课堂教学效率和质量为中心，从以下几个课堂教学策略入手。一、明确教学目的和具体任务教无定法，但教有定规，这是教学的根。教学大纲就是教学的根。教师首先要组织一堂课，根据教学大纲、教材和学生实际，确定教学目的和任务。教学目的和任务是教学的纲，一要具体明确，二要全面恰当。明确哪些知识技能应该理解或掌握，以及通过哪些内容、活动或练习，培养学生的能力和思想品德。同时，要全面考虑发展双基和教育的各项任务以及能力的培养如何贯穿在学习知识、技能的过程中。二、教学方案设计化学教学方案的设计是教师上好课的前提条件，是根据化学教学目的、教学任务和教学目标，结合化学教学内容、学生的实际水平和具体情况，以及教学条件和环境，并预测在教学过程中可能引起的教与学的效果。要设计好教学方案必须做到以下几点：1.备教材。教材是课堂教学的主要依据，教师只有对教材的高度熟悉，对教材相关的知识点做到博学精通，心中有数，以及注意对教材内容的前后联系，这样才能回答和处理学生就教材内容提出的疑问，自如地驾驭课堂教学。2.备学生。要知道学生的实际情况，了解学生的知识能力及兴趣爱好、课外阅读等方面的情况，把握学生的思维动向。要注意把握学生思维的脉搏，关注学生认知发展的动向。3.备习题。化学习题浩如烟海。教师在习题中应有目的、有计划地去精心选题，善于分析其中的因果关系，让学生掌握题目所给的条件，明确要求，并由表及里地指导学生从不同角度去考虑化学问题，从而使学生获得解决化学问题的正确思路。4.备学法。老师的备课要探讨学生如何学，指导学生如何进行预习、听课、记笔记、做实验、做复习、做作业等，要考虑到学生观察能力、想象能力、思维能力、推理能力及总结归纳能力的培养。5.备课堂。备课堂实际上是在脑海里活现上课情景，既要把讲课的内容、方法、步骤仔细推敲、揣摩，又要在头脑中装着学生，形成一个在脑海中上课的情景。多从学生方面考虑，才有利于提高教师的应变能力。6.备演示实验。演示实验是化学课堂教学中非常重要的一个环节，演示实验的成功与否将直接影响教学进度和教学效果。这就要求教师必须对所演示实验的目的要求、仪器装置、实验药品等做到心中有数，确保准确无误，并在保证实验效果的直观性强、简易快捷以及实验安全等前提下做好预备实验。三、运用适当的教学方法教学方法，是完成教学任务所采用的手段，是使教学过程达到优化的一种推动力。化学教学要从学生实际出发，从学科的特点出发。初中生刚刚开始学习化学时，对实验现象兴趣很浓，但并没有因此形成稳定发展的内在动机。初中生关于化学的准备知识是薄弱的，加上化学运动形态较物理运动形态更复杂、更抽象，一般难以直接地、简明地重现，这就给学生化学思维能力的发展，带来了较大的困难。再加上初中阶段的学习内容受学习水平的限制，描述性知识偏多，概念多，而且集中。所以，教师要有针对性地下工夫，在教学中随时向学生指明需要记忆的内容、记忆的方法，要努力化难为易，多联系学生熟悉的常识和日常生活中的实际，多设计一些生动形象化的教学方式，多引导学生议论、讨论和练习。在学生认识水平的基础上，引导其得出结论，并将该结论上升为概念和理论。运用多媒体和实验等为学生创设更好的学习情境，针对初中学生的心理特征，最主要的是激发和发展学生探索、求知的内在动机。通过实验教学激发学生学习的兴趣，帮助学生形成概念，获得知识和技能，培养观察能力和实验能力，同时便于学生记忆和再现化学知识。因此，教师一定要加强演示实验和学生实验的教学。四、让化学教学回归生活化学新课程标准对教材编写的主要特点就是：结合学生熟悉的生活情景和已有的实际经验，提炼学习素材，从丰富、生动的现实生活素材中设计学习主题，激发学生学习化学的兴趣，使学生逐步认识化学对日常生活和社会发展的重要影响。化学知识需要溶入现实生活之中，才能显示出活力，才能激发学生的学习欲望。因此，在农村初中化学实验设备有限的条件下，要让化学回归生活，重视学生已有的经验和体验，把课堂知识与学生日常生活、社会生产等联系起来，把理论和实际结合起来，活学活用，学生才学得有趣，才会感觉到化学就在身边，化学与日常生活关系密切，学有所用，进而激励学生学好化学。教学是一门艺术，教师的教要落实到学生的学上。教师的教学策略要得当，课堂教学要合乎科学性、系统性、趣味性，充分调动学生学习的主动性，让学生积极参与到教学的各个环节，从而提高教学质量。珠海红树林海洋真菌代谢物抗肿瘤活性筛选答辩人：吴水平指导老师：蔡小玲讲师中山大学化学与化学工程学院第八届创新化学实验与研究基金项目结题答辩化学与化学工程学院海洋天然有机物研究室代谢物对hTopoⅠ抑制活性筛选获取海洋真菌代谢粗提物终止反应，用1％琼脂糖凝胶电泳，EB染色后，genegenius全自动凝胶成像分析系统分析测试结果

制备超螺旋质粒DNA、hTopoⅠ在共20µLhTopoⅠ样品反应体系中，加有4µL反应缓冲液，0.5µg负超螺旋pBR322、1U的hTopoⅠ及0.5µL测试样品。同时做空白对照，阴性对照、阳性对照以及DMSO溶剂对照。37℃反应30分钟木榄从左到右依次为：ZH45、ZH15、ZH50、ZH51、ZH68、ZH164、ZH58、阴性对照、ZH44、阳性对照、DMSO对照、空白对照卤蕨从左到右依次为：ZH71、ZH55、ZH30、ZH218、ZH154、ZH11、阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照桐花树从左到右依次为：ZH63、ZH64、ZH93、ZH2、ZH65、ZH97、ZH81、ZH135、ZH208、ZH209、ZH10、ZH14、阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照海桑从左到右依次为：阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照、ZH116、ZH117、ZH173、ZH61、ZH87、ZH88、ZH91、ZH178、ZH57、ZH4、ZH62、ZH111、ZH222、ZH75阔苞菊从左到右依次为：阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照、ZH79、ZH177无瓣海桑从左到右依次为：阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照、ZH80、ZH131秋茄从左到右依次为：阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照、ZH9、ZH82、ZH83、ZH151银叶树从左到右依次为：阴性对照、阳性对照、DMSO对照、空白对照、ZH73、ZH74、ZH228、ZH34、ZH72、ZH182统计结果筛选出ZH116、ZH178、ZH71、ZH11、ZH154、ZH55、ZH30、ZH15、ZH50、ZH45、ZH44、ZH58、ZH151、ZH93、ZH34、ZH228、ZH74、ZH182和ZH72共19株海洋真菌的代谢物有较强的hTopoⅠ抑制作用；另外有ZH61、ZH88、ZH79、ZH218、ZH68、ZH82、ZH83、ZH64、ZH10、ZH135、ZH209、ZH81和ZH164共13株菌的代谢物也对hTopoⅠ有一定的抑制活性；剩余22株菌的代谢物要么没有抑制活性，要么抑制作用太弱。收集对数生长期的受试靶细胞，接种于96孔板，每孔190µL（约1×104个细胞/孔），24小时后加入不同梯度浓度药物10µL，每一浓度3个重复孔。同时设置调零孔、对照孔。培养68小时后加入MTT10µL（浓度为5mg/mL）。继续培养4小时后弃上清，每孔加入DMSO100µL后用酶联免疫检测仪测定492nm处吸光度OD值，以药物浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制抑制曲线。对照组吸光值减少一半时所需的药物浓度为IC50浓度。体外肿瘤细胞毒性实验（MTT法）细胞毒实验结果表2筛选样品对KBv200的IC50菌株编号IC50（µg/mL）菌株编号IC50（µg/mL）ZH1127ZH6812ZH111205ZH71＜＜11ZH116＜＜11ZH7231ZH11724ZH73456ZH13115ZH7422ZH16425ZH75＜＜11ZH3427ZH79100ZH5161ZH8022ZH5538ZH8142ZH5723ZH82＜＜11ZH6118ZH83133ZH6224ZH8732ZH6334ZH9119ZH64＜＜11ZH9331ZH6523

表3筛选样品对MDA-MB435的IC50（µg/mL）菌株编号IC50（µg/mL）菌株编号IC50（µg/mL）ZH251ZH135＜＜11ZH436ZH151＜＜11ZH938ZH154＜＜11ZH1065ZH17315ZH1427ZH177＜＜11ZH15＜＜11ZH17849ZH30＜＜11ZH18266ZH44＜＜11ZH208205ZH4598ZH209201ZH5052ZH21848ZH58＜＜11ZH22256ZH88＜＜11ZH228＜＜11ZH97＜＜11一共筛选得16株有强烈肿瘤细胞毒作用的海洋真菌。19株代谢物对hTopoⅠ有较强抑制作用的海洋真菌中，有ZH228、ZH116、ZH151、ZH58、ZH30、ZH44、ZH71、ZH15、ZH154共9株真菌的代谢物能强烈抑制肿瘤细胞的生长。据此可以确定这9株真菌的代谢物中含有以hTopoⅠ为靶位点的强效抗肿瘤化合物，其中以ZH228、ZH116、ZH151、ZH58四株真菌的作用效果最好，应该作为优先研究的对象。另外的10株对hTopoⅠ有较强抑制作用的海洋真菌尽管在肿瘤细胞毒