生物学抗体免疫技术

生物技术---免疫学技术基本概念抗原（antigen）：进入动物体内能刺激动物的免疫系统发生免疫应答，从而引起动物产生抗体或形成致敏淋巴细胞，并能和抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质分完全抗原和半抗原抗体(antibody)：抗原刺激动物免疫系统，由免疫系统产生分泌的能和相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白第三章免疫学技术基本概念抗原的制备：颗粒抗原、半抗原、人工抗原抗体的制备：多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体第三章免疫学技术--抗原抗体反应可对抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测抗体抗原以非共价键结合不可见反应：几秒-几分钟可见反应：数分钟（小时、日）影响因素电解质温度酸碱度第三章免疫学技术酶联免疫法放射免疫法荧光免疫法其他第三章酶联免疫法（enzymeimmunoassay)以酶标记抗体或抗原进行的抗体抗原反应酶结合物应具有双功能：高度特异的免疫反应、生物催化放大作用基本方法间接法双抗体夹心法竞争法生物素-亲和素系统（biotin-avidinsystem，BAS）某些新进展酶联免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）间接法1、将已知可溶性抗原吸附于载体2、温育后清洗3、加入可能含特异性抗体的待检液4、温育后清洗5、加入酶标记的二抗6、温育后清洗7、加入酶作用底物8、测定反应颜色深浅双抗体夹心法1、将已知抗体吸附于载体上2、温育后清洗3、加入可能含特异性抗原的待检液4、温育后清洗5、加入酶标记特异性抗体6、温育后清洗7、加入酶作用底物8、测定颜色反应深浅酶联免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）竞争法1、将已知抗体吸附于载体上2、温育后清洗3、加入可能含特异性抗原的待检液和酶标记的已知抗原液4、温育后清洗5、加入酶作用底物6、测定颜色反应深浅酶联免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）生物素-亲和素系统（biotin-avidinsystem）基本概念生物素：是一种维生素H，经活化后，可与抗体、抗原、酶以多配一的方式共价结合，且不影响它们的活性亲和素：从卵蛋白中提取的一种碱性糖蛋白，可与酶偶合，以1配多的方式对生物素有很强的亲和力BAS用于检测的基本方法：BAB法或BRAB法BA法ABC法酶联免疫吸附（enzymelinkedimmunosorbentassay）酶联烤免疫冠吸附（e岭nz乞ym源e拾li览nk面ed膛i究mm举un牵os蚂or阴be升nt功a的ss倍ay兼）均相辅酶免邪疫测春定法无需代“固余定在跑载体斜上”罚；无绣需“旷温育役后清江洗”斑点设免疫喇结合足试验以微吩孔薄飞膜为安载体浓，酶凤免疫愤反应章阳性有结果监在膜刺上出切现色恒斑点胶体少金标恳记较热酶标嚼记更闭为简递便酶联河免疫驳吸附（e饭nz肿ym锤e造li榜nk保ed册i笑mm脾un页os管or柴be喝nt穷a悠ss械ay础）猪肉朴和尿餐液盐锐酸克啊伦特飞罗的免疫茄胶体害金法守快速缠检测瘦肉圈精中扎毒事态件20总00涛年以它来，昆内地漂相继击发生寇18暴起瘦饥肉精趴中毒把事件先，中侄毒人扫数达盐17筋00者多人共，死帖亡1欣人（坐不包雅括上奥海2古00酿6年岩集体仔中毒泡事件赴）瘦肉次精残捡留及源危害雅不容弄忽视修，瘦网肉精视替代如品暗误潮涌巧动上海鼻9.叔13蚂瘦肉冻精食托物中刘毒事鸭件（巴20去06悼年）“瘦某肉精摔”学喉名为拳盐酸甘克伦列特罗继，医摸学上脑又称饮克喘丢素，巷常用亡于治女疗哮罪喘。由于胳盐酸茂克伦呜特罗仆添加阻于饲蒙料饲卫喂动排物后彩可明产显促伤进动挤物生师长,提高瘦肉骆率,所以踩养殖房诚户称朋其为猾“瘦贩肉精欢”，取曾在灰国内冈外广幻玉泛用资于动宪物饲负养生猪弊食用潜瘦肉截精后晚皮毛满光亮在，呼蹄吸急物促，俘个别挽会出辱现腿喝抽搐黎，站焦不稳，葱爬坡间困难鸣；宰努后猪差的肌统肉特场别鲜现红，跨后臀旗肌肉友饱满棍，肥馆肉非训常薄瘦肉昆精介语绍瘦肉怖精介槽绍“瘦浓肉精克”化马学性毛质特拣别稳种定，胳加热液到17算0℃时才扣能被具分解勾，故合一般冈家庭它厨房条加热毕不能经将其隔分解沉破坏食用研后在脊胃肠谱道吸拿收快矿，作野用维氧持时接间持序久。漫中毒付后主绿要症捏状表轨现为美头疼况、头优晕、技心悸绞、心阿慌、创面色域潮红纳、四苍肢发铃抖等揪症状违法获者使绒用该巧物质状以提居高猪框的瘦容肉率纹和颜妈色鲜歇艳程苹度，渴不知东情的挪市民箩错惠误地雪认为鼓这样蓄的肉绩才是订“好宝肉”俭而特咬别喜皂欢选谜购《食品影卫生委法》《食品汪添加傅剂卫腔生管昆理办抚法》（GB游27购60）《动物许性食紧品中碎兽药嫩残留纳最高混限量》（农锐业部刚公告佩第23顺5号，20粱02年12月24日）竹规定动：禁哪用药状物，占动物幅性食逃品中释不得摩检出可：瘦肉删精、虚沙丁潜胺醇叙、西秧马特开罗等31种违法淘者的妄法律叶责任械：民刮事赔堵偿、考行政歉处罚幼、刑奸事处腊罚法律科规定盐酸波克伦畜特罗此残留肺检测挺方法《动物违性食侮品中据克伦耍特罗差残留庸量的寺测定》（GB锋50此09复.1贞92净-2艺00游3）第一陶法：虎气相匠色谱——质谱妄法，坏检出悬限：0.快5p违pb第二止法：匠高效许液相饱色谱蜡法，迹检出胶限：0.酬5p杯pb第三另法：卧酶联制免疫萌法（EL么IS蔑A筛选松法），检切出限者：0.今5p豆pb《动物蔑组织遍中盐卵酸克产伦特形罗的辟测定——气相绘色谱/质谱萄法》（NY风/T拨4桑68－20击06），穷检出畜限：2.怪0p荡pb《动物阀尿液醋中盐画酸克州伦特锋罗的着测定——气相香色谱/质谱映法》（NY晶/X吹Q魔42浅1－20伏03），吓检出斑限：1.强0p糠pb《尿液阻中盐奶酸克考仑特悟罗的诱测定刃胶体牌金免汽疫层衫析法（NY伐/T赛93另3-海20级05），宣检出汇限：3.际0p卧pb猪肉锄全程铺监控叨中瘦妨肉精屈检测倚方法裳的选巾择生猪吗饲养屠宰基场大型蛋批发羽市场零售舰市场饲料紧检测猪尿唱检测猪尿易检测猪肉脆检测猪肉检测猪肉检测酶联浇免疫牌法免疫猎胶体送金免疫哭胶体拉金酶联汉免疫周法免疫挽胶体泡金筛检服阳性GC鹅-M稻S确饼认大型痰仪器究确认政府考部门监督现抽检GC遍-M钳S餐饮抚业猪肉检测免疫露胶体敏金销毁夸和溯洋源阳性GC果-M店S确展认大型妨仪器费确认阳性免疫贸胶体甘金快妨速检忠测板把的外拖观图免疫躲胶体末金快旱速检庄测板挡(试长剂)医的结窄构图检测碌原理盐酸唯克伦吐特罗井快速拥检测陆试剂胳板的画中央便膜面娃上固砌定有裕两条浸隐形蚕线，父克伦鸭特罗素抗原涛固定窝在测塑试区衡作为翁检测贤线（钓T线捐），猪二抗煌固定拴在质钞控区摄作为康对照户线（色C线耕）。当待基检样飞品溶也液滴诵入试归剂板权加样含孔后殖，样期品溶金液因钱层析匆作用柔往上偏扩散颠。如觉果样垦品溶惜液含放有相渣应药偶物的诊残留度，药慢物将易和胶结体金杯颗粒厘上的宝抗体食先行分反应泻，因买此当晃胶体袋金颗雨粒随续样品满溶液弯扩散冻至T遭线时末，胶碑体金挂颗粒蜓上抗捐体活洋性位移点将粗因被粒样品专溶液结中的站药物斤占据掏而无变法与皇T线占上药农物抗疮原结赏合；铺所以货当样龟品中柜盐酸阴克伦触特罗踢含量大1p脑pb葛(检烧测限两)以扩上时聚，试浸剂板线上的申T线此将较森C线扎显色倘淡或售甚至陶无显哪色，钟判定塔为阳伤性。聚反之幸，当寒样品掠中盐距酸克壤伦特哈罗含边量在据1p虑pb汁以下啊或无捧残留恭时，崇试剂尼板上篇的T凭线显拦色与疯C线机相近车或偏躺深，肃判定端为阴泡性灵敏沃度肉样纽奉或组稠织样脱：1猾pp乔b(淡标准考前处作理)环或5强pp纲b（部简单使前处裕理）尿样霞：愧1p株pb膛(标页准前捧处理跌)特异涨性：慈与沙梅丁胺烘醇等铁苯乙械胺类炕药物洪没有与交叉乡丰反应归；准确攻性：泻与瘦也肉精算EL甘IS封A试瓦剂盒农的检间测结吧果符担合率此>9痕0％有效植期：剂半年恨（冷紧藏闭霞光保番存）胶体始金免绢疫层扮析法病检测讯瘦肉塌精的似技术盒指标操作叼步骤于5拘ml镇离心遣管中遵加入燥5g且左右棒剪碎抱或是氧高速畜匀浆过变的猪始肉组匹织样想，盖协紧管则盖1将装忠有样侵品的层离心腔管在殿90俩℃以迁上水漫浴锅润中加刃热1遥0鼻分钟加热右完成谢后取序出冷貌却至恋室温鹊；可屈以明抗显看到底灯部有监溶液琴渗出32吸取誓3滴带（约你10悟0u磨l）适煮出秒的样为品渗右出液百到1疤.5傍ml月的离嘱心管控中4操作呀步骤吸取依3滴胳（约昂10恩0u吓l）肌盐酸愈克伦暑特罗竟组织评样专合用稀武释液那到1怖.5志ml抛离心扛管中惹。充稠分混堤合均秧匀从包饭装铝犯箔袋甘中取款出检岸测卡甲平放背。吸御取3得滴（肌约1惰00仙ul有）混堵匀溶脆液加部入到虫试剂英板加扇样孔累中567