临床免疫学与检验重要知识点汇总

免疫应答主要分为哪几个阶段.

1〕识别阶段2］活化和增值阶段3〕免疫效应

中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成.各有什么功能.

1〕中枢免疫器官：免疫细胞发生、分化、成熟的场所，如骨髓，胸腺2）外周免疫

器官：免疫细胞产生应答的场所。如脾脏，淋巴结，黏膜，扁桃体等。

T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么.

1〕T细胞：介导细胞免疫，辅助体液免疫。2〕B细胞：产生体液免疫3〕NK细

胞：介导天然免疫，发挥细胞毒作用。

根据作用方式及其特点的不同，机体存在两类免疫简述各自的概念和特征.

1）先天性免疫或固有性免疫，是个体出生是就具有的天然免疫，可通过遗传获得，

是机体在长期进化过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。其

主要特征是反响迅速，针对外来异物的围较广，不针对某个特定异物抗原，也称非

特异性免疫。2）适应性免疫，是个体出生后，接触到生活环境中的多种异物抗原，

并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫，也称获得性免疫。其主要特征是针对某

个特定的异物抗原而产生免疫应答，开场的应答过程比较缓慢，一旦建立去除该抗

原的效率很高，特异性很强，也称特异性免疫。

简述抗原抗体反响的原理。

答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的构造互补性

与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗

原表位与抗体超变区沟槽分子外表的结合

简述抗原抗体反响的类型。

答：抗原抗体反响分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反响；

②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反响；③抗原抗体结合后激活补体所致

的细胞溶解反响；④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反响；⑤免疫标

记的抗原抗体反响等。

什么是带现象”

答：在抗原抗体反响等价带前后，由于抗体或抗原过量（形成前带或后带），上清液

中可测出游离的抗体或抗原，形成的沉淀物少，不出现可见反响，这种现象在做血

清学试验时称为带现象。

影响抗原抗体反响的环境条件有哪些”在实验中如何控制这些条件因素”

答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：①电解质：常用O.85%

氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反响液；②酸碱度：pH过高或过低都

将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反响一般在pH为6〜8时进展；③温度：一

般以15,

40℃为宜，最正确反响温度为37℃。

简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。

单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进展制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、

亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体接

种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。

试述免疫血清应如何进展纯化。

免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗

体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法

提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse4B制成层析柱。另夕卜，

还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二

醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交

联于sephamse4B上，通过亲和层析去除杂抗体。

表达杂交瘤技术的根本原理。

杂交瘤技术是在细胞融合技术的根底上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞

和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种

亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个

细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。

简述间接血凝试验的根本原理。

间接血凝试验是将可溶性抗原（或抗体）吸附于人的。型红细胞或绵羊、家兔的红细胞

制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体（或抗原）作用，在有电解质存在的条件下，经

过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验

简述抗人球蛋白试验的原理（又称Coombs试验）、类型及其在临床上的应用。

Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7s的IgG类抗体，能

与相应的抗原结实结合，但在一般条件下不出现可见反响，利用抗球蛋白抗体作为

第二抗体，连接与红细胞外表抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。Coombs试

验有二种类型：⑴直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。⑵间接

Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。

抗球蛋白试验主要应用于那些方面.

①输血：对于“危险"受体〔指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的

妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人〕的配血试验必须包括各种不完全抗体的检

查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型抗原抗体的检查：主要检查Rh一者，其体是否

有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D阴性的供体血液作常规检查。最可靠和

灵敏的方法是将待检D阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D血清混合，然后加抗

球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体

产生的最常见的免疫性抗体为Rh抗体和ABO抗体，一般为7s的IgG,可通过胎盘

屏障，作用于胎儿红细胞，引起新生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取

预防性措施。④对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法

证实有自身红细胞的抗体存在。⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs

试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG血清、抗IgM、抗IgA以及

抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。

什么是协同凝集试验.主要用于何种检测.

协同凝集试验与间接凝集反响的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这

种细菌的细胞壁中含有A蛋白〔SPA〕，SPA能与特异性抗体IgG的Fc段结合［IgG3

除外〕。抗体的F(ab')2段暴露在葡萄球菌的外表，仍保持与相应抗原特异性结合

的特性。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体致敏的载体颗粒，假设与

相应抗原接触，即出现反向间接凝集反响。可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性

抗原的检测。

何谓间接凝集反响.

将可溶性抗原〔或抗体〕先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒外表，使之成

为致敏载体颗粒，然后与相应抗体〔或抗原〕作用，在适宜电解质存在条件下，出

现特异性的凝

集现象，称为间接凝集反响

间接凝集反响如何进展分类.各试验的原理是什么

根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验；根据

载体种类，分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验；根据反响方式分为间接凝集试

验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。间接凝集试域用抗原致敏载体检测标本

中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合，再与标本中的抗体反响，通过抗体

桥联，形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块，为阳性反响。反向间接凝集谒佥选用特

异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏颗粒，与样品中的待

检抗原反响，通过抗原桥联，形成肉眼可见的凝集为阳性。临床上用于检测HbsAg、

AFP等。间接凝集抑制幡诊断试剂为抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体，用于检

测标本中与致敏抗原一样的抗原。将标本与抗体试剂相反响，然后参加致敏抗原，

假设出现凝集现象，说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象，那么说明待检

标本中含有相应抗原，凝集反响被抑制。同理，用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作

为诊断试剂，检测标本中的抗体，称为反向间接凝集试验协同凝集试幽间接凝

集反响的原理相似，但所用载体为金黄色葡萄球菌，该菌细胞壁上的SPA能与特异

性抗体的IgG的Fc段结合〔IgG3除外〕，抗体的F(ab')2段暴露在葡萄球菌的外

表，仍能与相应抗原特异性结合。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体

致敏的载体颗粒，假设与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反响。间接血凝试验

是以红细胞作为载体的间接凝集试验，用的抗原或抗体致敏红细胞，然后与样品中

的抗体或抗原在适宜条件下反响，出现红细胞凝集者为阳性。根据红细胞凝集的程

度判断阳性反响的强弱。胶乳凝集试龌以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集

试验。

HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么.

答：1.淋巴细胞：不能生长，5到7天死亡；DNA的主要合成途径被A阻断2.骨髓瘤细

胞：不能生长，5到7天死亡；HGPRT缺乏，DNA合成的旁路途经受阻3.骨髓瘤细胞

和脾细胞融合形成杂交瘤细胞，可长期生长繁殖。利用淋巴细胞的HGRT将H合成

为嚓吟碱并最终与T一起合成DNA从淋巴细胞获得产生某种抗体的遗传信息，从

骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力

简述免疫系统的三个生理功能。

答：免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御：是机

体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。该功能正常时，机体可抵御病原微生

物及其毒性产物的感染和损害，即抗感染免疫；异常情况下，反响过高会引起超敏

反响，反响过低或缺失可发生免疫缺陷。免疫自稳：是机体免疫系统维持环境稳定

的一种生理功能。该功能正常时，机体可及时去除体损伤、衰老、变性的细胞和免

疫复合物等异物，而对自身成分保持免疫耐受；该功能失调时，可发生生理功能紊

乱或自身免疫性疾病。免疫监视：是机体免疫系统及时识别、去除体突变、畸变细

胞和病毒感染细胞的一种生理功能。该功能失调时，有可能导致肿瘤发生，或因病

毒不能去除而出现持续感染。

决定抗原抗体最正确配比的方法有几种”

⑴抗原稀释法：将可溶性抗原作一系列倍比稀释，然后向各管中参加一定浓度的适

量抗血清，37℃反响后，产生的沉淀量随抗原量变化而不同，以沉淀物最多的管为

最适比例管。⑵抗体稀释法：是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反响，出现沉

淀物最多的管为抗体最适比例管。(3)棋盘格法：亦称方阵法。抗原抗体同时稀释，

可一次完成抗原和抗体的滴定，并找出抗原、抗体的最适比。是前二法的结合

简述单向免疫扩散试验的根本原理和技术要点。⑴原理：待测抗原从局部含有定量

抗体的凝胶自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例适宜的部位，形成

白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。⑵技术要点：将抗体和热融化

琼脂（约50%）混合，倾注成平板。待凝固后在琼脂板上打孔，孔中参加已稀释的抗

原液，和不同浓度的抗原标准品，置37〜12温箱，24〜48h后观察孔周围沉淀环。量

取沉淀环直径，通过抗原标准品，计算待测抗原的浓度。

在双向免疫扩散试验中，如何判定结果”

双向免疫扩散中，出现沉淀线，说明存在相应的抗原、抗体，不出现沉淀线那么说

明缺乏抗原或抗体。沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致，沉淀线靠近抗原

孔，提示抗体含量高；靠近抗体孔，提示抗原含量较多

免疫电泳技术的优点是什么”免疫电泳有哪些用途”

1）优点：免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术，既有抗

原抗体反响的高度特异性，又有电泳别离技术的快速、灵敏和高分辨力，广泛应用

于牛物医学领域。（2）用途：①纯化抗原或抗体的成分分析，分析其纯度；②正常及

异常体液中蛋白质成分的分析，如无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症、多发性骨髓

瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析，多发性骨髓瘤

血清M蛋白的检测和鉴定；③免疫后不同抗体组分的动态变化研究

对流免疫电泳时，抗体为什么流向负极”

大局部蛋白质抗原在碱性溶液中带负电荷，电泳时从负极向正极泳动，而抗体IgG

分子量大，暴露的极性基团较少，在缓冲液中解离的也少，向正极的泳动速度较慢，

电泳时由电渗引向负极的液流速度超过了IgG向正极的泳动，带动抗体流向负极，

使抗原和抗体定向对流并发生反响，出现肉眼可见的沉淀线。

简述火箭免疫电泳的原理和主要用途。

⑴原理：火箭免疫电泳是将单向免疫扩散和电泳相结合的技术。抗原在电场作用下，

在含有适量抗体的琼脂糖凝胶中向正极泳动，逐渐形成梯度浓度，在抗原抗体比例

适当时形成沉淀，随着抗原量的减少，沉淀带越来越窄，形成火箭峰样沉淀，峰形

上下与抗原量呈正相关。用量标准抗原作对照，绘制标准曲线，根据检测样品沉淀

峰的高度可算出待测抗原的含量。（2）主要用途：①抗原蛋白定量，如IgA、IgG、IgM

和slgA检测；②C3、C4及其裂解产物检测；③AFP等检测。

免疫浊度测定的根本原理是什么”有哪些类型”

⑴根本原理：免疫浊度测定是将液相的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相

结合的一项分析技术。当可溶性抗原与相应的抗体特异结合，在二者比例适宜、并

有一定浓度的电解质存在时，可以形成不溶性的免疫复合物，使反响液出现浊度。

这种浊度可用肉眼或仪器测知，并可通过浊度推算出复合物的量，即抗原或抗体的

量。（2）类型：按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。按测定速度可

分为速率比浊法和终点比浊法。

散射免疫比浊法的根本原理是什么”

沿水平轴照射的一定波长的光，在通过溶液时，光线可被其中的免疫复合物粒子颗

粒折射，发生偏转，产生散射光。根据Rayle培h散射方程，散射光强度与粒子（免疫

复合物）的浓度和体积成正比，通过测量散射光的强度，可计算出待测抗原的浓度。

速率散射比浊法中的“速率”是指什么"

所谓速率是指单位时间抗原与抗体反响的速度。抗原与抗体结合形成免疫复合物的

速度，在每个单位时间是不一样的，在抗体过量的情况下，随着反响时问的延长，

免疫复合物的总量逐渐增加，通常在25s时出现一个反响最快的速率峰。峰值与抗原

量呈正相关。

免疫浊度测定的反响体系中，为什么必须始终保持抗体过量

抗原和抗体的比例是浊度形成的关键因素，抗原和抗体必须在一个适当的浓度才会

出现最高结合率。当抗原过量时，由于钩状效应，形成的免疫复合物分子小，而且

会发生再解离，使浊度下降，光散射减少。当反响液中抗体过量时，免疫复合物的

形成随着抗原量的增加而递增，光散射的强度也随之递增，因此，免疫浊度测定的

反响体系中必须始终保持抗体过量，以保证免疫复合物的生成量与浊度的改变一

致，这是免疫浊度测定的根本原那么。

单向琼脂扩散试验有那些影响因素.

单向扩散试验有以下影响因素：①抗血清的亲和力、特异性、及效价。要求亲和力

强，特异性好、效价高。注意存放的方法，防止效价下降。②标准曲线必须在每

次测定时同时制作，绝不可一次作成，长期应用。③测定时必须加测质控血清，以

保证定量的准确性。④有时出现扩散环呈现两重的双环现象，这是出现了抗原性一

样的两个组分，其扩散率不同，例如a重链病血清中出现的a重链和正常的IgA两种

成分并存，皆与抗IgA抗体发生反响，就形成外两重环。⑤在单扩试验时，有时回

出现结果与真实含量不符，这主要出现在1g测定中。如用单克隆抗体或骨髓瘤纯

抗原免疫动物获得的抗血清，都存在单一结合价的现象，假设用此作为单扩试剂测

量正常人的多态性抗原，那么抗体相对过剩，是沉淀圈直径变小，测量值降低。⑥

测得假阳性升高现象与上面相反，如用多克隆抗体测定单克隆病，那么抗原相对过

剩〔单一抗原决定簇〕，致使沉淀圈呈不相关扩大，从而造成某一成分的伪性增加。

沉淀反响可应用在那些方面.

沉淀反响主要应用于体液包括血液、尿液、脑脊液、胸水、泪液、关节腔液等的蛋

白质〔如MW10000〜50000,标本浓度为lmg/L〜100g/L〕测定，应用最广泛的是可

以准确定量的免疫浊度法，也可用于药物的测定。

双向琼脂扩散试验的原理是什么.

双向琼脂扩散试验的原理为可溶性抗原和抗体在含有一定电解质的琼脂凝胶板的

对应孔中各自向对方扩散，在最适当的比例处形成抗原抗体沉淀线，根据沉淀线的

位置、形状及比照关系，可作出对抗原或抗体的定性分析

试对沉淀反响各类试验方法进展评价。

沉淀反响可分为单向免疫扩散试验、双向免疫扩散试验、絮状沉淀试验、免疫浊度

测定

等试验。单向免疫扩散试验是一种稳定、简便、不需要特殊设备、一般试验室都可

使用的常规方法。双向免疫扩散试验简单易行，结果可靠，特异性高，分辨率高于

对流免疫电泳，本钱低廉，结果可经染色枯燥后长期保存；缺点是敏感性较低、扩

散缓慢，不能准确定量。

免疫浊度法①快速、②敏感，最小检出量可达ng水平。③检测围广④缺点是所用

抗血清质量要求高，仪器须装电脑，价格较贵。絮状沉淀试验较实用、简便、不需

要特殊设备一般试验室都可使用，但须稀释标本比较麻烦。

放射免疫分析技术有何应用.

答：放射免疫技术由于其测定的灵敏度高，特异性强，精细度好，而且可对半抗原

和抗原测定以及测定仪器设备条件要求不高，因此广泛用于生物医学检验。常用于

各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、药物等微量物质的测定。由于大多数检验

工程均有RIA或IRMA试剂盒供应，目前仍是基层单位对超微量物质测定的主要

手段。

试述放射免疫分析与免疫放射分析。

答：放射免疫分析〔RIA〕是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记

抗原与反响系统中未标记抗原竞争性结合特异性抗体为根本原理来测定待检样品

中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析〔IRMA〕是用放射性核素标记的过量

抗体与待检测抗原直接结合，采用固相免疫吸附载体别离结合与游离标记抗体的非

竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下：①标记物RIA以放射性核素标记抗原；

IRMA那么是标记抗体。②反响速率IRMA反响速度比RIA快。③反响原理

RIA为竞争抑制性结合，反响参数与待检抗原量成反相关；IRMA为非竞争结合，

反响参数与待检抗原成正相关。④特异性IRMA特异性较RIA高。⑤灵敏度和

检测围IRMA测定的灵敏度明显高于RIA,IRMA标准曲线工作围较RIA宽1〜2

个数量级。⑥其他RIA所用抗体为多克隆抗体，对亲和力和特异性要求较高，但

用量很少；IRMA为试剂过量的反响，对抗体亲和力的要求不及RIA,但用量大。

此外，RIA可以测量半抗原，但IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。

试述用于标记的荧光素应具备什么条件”

DA用于标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化

学基团，结合后不易解离，而未结合者易去除；②荧光效率高，与蛋白质结合后，

仍能保持较高的荧光效率；③荧光色泽与背景组织的色泽比照鲜明；④与蛋白质结

合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质；⑤标记方法简单、平安无毒；⑥与蛋

白质的结合物稳定，易于保存。

试述荧光免疫显微技术根本原理。

DA荧光免疫显微技术是以荧光显微镜为检测工具，用荧光素标记特异性抗体或抗

抗体，检测固定组织细胞上的抗原或血清中的抗体，常用于定性和定位检查的一门

技术。

试述荧光免疫显微技术的临床应用。

DA临床常应用于：①血清中自身抗体的检测；②各种微生物的快速检查和鉴定；

⑧寄生虫感染的诊断；④白细胞分化抗原的检测。

时间分辨荧光免疫测定法具有哪些优点”

DA时间分辨荧光免疫测定法具有特异性强，灵敏度高，标准曲线围宽，分析速度

快，标记物制备较简便、有效使用期长，无放射性污染等优点，因此是很有开展前

途的超微量物质免疫分析技术。

目前临床检验中常用的荧光物质有哪些.

DA目前临床检验中常用的荧光物质有：四乙基罗丹明、异硫氨酸荧光素、四甲基

异硫氨酸罗丹明、Eu3+的螯合物等。

简述荧光抗体的制备及纯化方法。DA荧光抗体的制备方法纯化方法有透析法、凝

胶过滤法、有撑搅拌法及透析法。

荧光抗体技术有哪些优缺点，在临床上有哪些应用.

荧光抗体技术的优点：〔1〕能做到快速、敏感、定位。〔2〕Ag和Ab的特异性与

形态的检查结合在一起；缺点：⑴对组织细胞进展微细构造的观察做不到；⑵标本

不能永久保存，荧光有自然消退现象，需及时观察及对照相；⑶有非特异性荧光的

干扰。荧光抗体技术的应用：⑴病毒学方面：病毒鉴定和病毒在感染ell的定位；⑵

寄生虫学方面：用于寄生虫的诊断〔鉴定、分型〕；⑶免疫学方面：研究、用于自

身免疫病的诊断；⑷细菌学方面：菌种鉴定和Ag构造的研究。

用于标记的酶应符合哪些要求”

DA⑴酶活性高，能对低浓度底物产生较高的催化反响率。⑵具有可与抗原、抗体

共价结合的基团，标记后酶活性保持稳定，而且不影响标记抗原与抗体的免疫反响

性。⑶酶催化底物后产生的信号产物易于判定或测量，且方法简单、敏感和重复性

好。（4）酶活性不受样品中其他成分（源性酶、抑制物）的影响；用于均相酶免疫测定

的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。（5）酶、辅助因子

及其底物均对人体无危害，理化性质稳定，且价廉易得。

简述酶免疫技术的分类。

DA⑴酶免疫技术按实际用途，分为酶免疫组化和酶免疫测定两大类。⑵按抗原抗

体反响后是否需将结合的和游离的酶标记物别离,分为均相酶免疫测定和异相酶免

疫测定，异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。

简述均相酶免疫测定的原理。

DA酶标抗原（AgE）与Ab结合形成AbAgE后，其中的酶（E）活性将减弱或增强。因此，

不需对反响液中的AbAgE和AgE进展别离，直接测定反响系统中总酶活性的变化，

即可推算出被测样品中Ag的含量。

简述双抗体夹心法的原理。

DA连接于固相载体上的抗体和酶标抗体，与待检抗原上两个不同的抗原决定基结

合，形成固相抗体一抗原一酶标抗体复合物。由于反响系统中固相抗体和酶标抗体

的量相对于待检抗原是过量的，因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。测

定复合物中酶作用于参加的底物后生成的有色物质量，即可确定待检抗原含量。

斑点-ELISA有哪些优点”

DA⑴NC膜吸附蛋白力强，微量抗原吸附完全，故检出灵敏度可较普通的EusA高6〜

8倍；⑵试剂用量较EusA省10倍；⑶操作简便，试验及结果判断不需特殊设备条件；

⑷吸附抗原（抗体）或已有结果的NC膜可长期保存（-20℃可达半年）。

简述ELISA的根本原理、方法类型及应用。

DA⑴根本原理：抗原或抗体预先结合到某种固相载体外表；测定时，将受检样品（含

待测抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体

起反响形成抗原或抗体复合物；反响终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量

（免疫复合物）即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例；经洗涤去除反响液中其

他物质，参加底物进展显色，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中

待测物质含量。（2）方法类型及应用：①双抗体夹心法：用于检测抗原，适用于检测

两个或两个以上抗原决定基的多价抗原；②间接法：用于检测抗体；③竞争法：用

于抗原和半抗原的定量测定，也可对抗体进展测定；④捕获法：用于血清中某种抗

体亚型成分（如IgM）的测定。

简述酶增强免疫测定技术的原理。

DA具抗原及酶活性的Ag-E与Ab结合形成AgAb后，所标的酶（E）因与Ab接触

严密，空间位阻影响了酶的活性中心，酶活性受到抑制。参加未标记抗原（标准或样

品

中的Ag）后，Ag即与Ab叫竞争结合反响系统中限量的Ab形成AgAb复合物，从而使反

响液中AgAb*（酶活性被抑制）的比例减少，具酶活性的游离AgE增多。最终测得的酶

活性随着反响体系中未标记抗原（Ag）浓度升高而增强。

简述免疫印迹法的原理。

免疫印迹法由SDS、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成。抗原等蛋

白样品经SDS处理后带负电荷，SDS时从阴极向阳极泳动，分子量小者，泳

动速度快；将凝胶中已经别离的蛋白质条带在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上；

将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用，参加能

形成不溶性显色物的酶反响底物，使区带染色；根据电泳时参加的分子量标准，可

确定各组分的分子量。

何谓金免疫测定技术”简述其技术类型及原理。

DA金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进展抗原抗体反响的一类免疫学

测定技术，其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验。1）斑点

金免疫渗滤试验：在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中，依

次滴加标本、免疫金及洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材料上，故溶液流经渗滤装

置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用，到达快速检测目的，阳性反响

在膜上呈现红色斑点。2）斑点金免疫层析试验：是将胶体金标记技术和蛋白质层析

技术相合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分析技术，滴加在膜一端的标本溶

液受载体膜的毛细管作用向另一端移动，犹如层析一般，在移动过程中被分析物与

固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化，无关物那么越过该区域而

被别离，然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。

免疫溶血试验的原理和用途。

DA原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成

分有补体，抗原（SRBC）及抗体（溶血素），这三种成分中如有两种是的就可测知第三

个成分，稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定，溶血空斑试验，CH50

试验，补体结合试验，抗补体试验等。

如何进展补体单个成分的测定”

DA补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个

成分的“补体试剂”。而后利用免疫溶血试验的原理，将致敏红细胞与“补体试剂”混

合，再参加待测血清，孵育后，溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有

关。测定含量可用抗体以单向琼脂扩散等方法进展。

血清免疫球蛋白测定方法有那些.

答：单向免疫扩散法：原理，优点：简单，条件要求低，但抗体需要高效价高特异

性，灵敏度：mg/ml免疫比浊法:原理，优点：检测结果准确，精细度高，耗时短,

灵敏度高ug/ml

免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定有何意义.

答：IgG、IgA、IgM均升高那么慢性疾病，IgG升高那么多为细菌感染导致，新生

儿血清IgM升高那么常为宫感染。单一Ig显著升高那么多为免疫增殖病：多发性

骨髓瘤，重链病、恶性淋巴瘤。坨降低那么体液免疫缺陷或联合免疫缺陷。

某患者临床疑为细胞免疫功能缺陷，应做哪些检查以协助诊断.

答：从以下几个方面检测1)皮肤试验，显示有迟发超敏反响能力，表示受试验者

细胞免疫功能完善2)T细胞及其亚群检测，常采用荧光抗体检测T细胞外表标志分

子CD3,CD4等

3)T细胞功能检测，利用PHA刺激淋巴细胞增殖，转化来判断T细胞的功能

简述原发性吞噬细胞缺陷病的发病机制主要包括哪几种.

主要包括：①吞噬细胞趋化和〔或〕粘附功能障碍。②吞噬和杀菌功能障碍。③单

核吞噬细胞的特殊异常，如IgGFc受体缺陷。

简述AIDS的主要免疫学特征.

①免疫系统的CD4T淋巴细胞受HIV感染，使CD4T细胞受损而减少。②单核-巨噬细

胞、滤泡树突状细胞和朗格汉斯细胞亦可受HIV感染而受损。③进展性细胞免疫缺

陷，继而体液免疫缺陷。④B淋巴细胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。

简述体液免疫缺陷的检测方法.

有①血清Ig的测定，常用免疫扩散法和免疫比浊法。②分泌型IgA的测定，用单向

免疫扩散或ELISA等。③同种血细胞凝集素测定。④特异性抗体产生能力测定，疫

苗接种后抗体产生的测定。⑤抗IgA抗体的测定，测自身抗体。⑥Smlg测定，检测B

细胞数量和其成熟程简述细胞免疫缺陷的检测方法.

有①迟发性皮肤过敏反响试验，常为初筛试验。②T细胞及其亚群的检测，为主要

的试验测定CD3、CD4、CD8分化抗原进展分类鉴定。③E玫瑰花结试验，现常用

CD2测定所代替。④淋巴细胞增殖反响试验，为体外免疫功能试验，方法有形态法

和同位素法。⑤T细胞分泌产物功能测定，测定激活的T细胞和单个核细胞分泌的细

胞因子。

简述IDD的共同临床特点.

.①对病原体的易感性强、常发生反复感染、严重感染，难以治愈。T细胞缺陷易发

生病毒真菌和寄生虫感染。余缺陷病易发生细菌感染，尤以化脓感染为主。②易发

生恶性肿瘤和并发自身免疫病。③临床表现和病理损伤有明显的多样性，病症各异，

复杂多样，主要是累及多系统和多器官所致。

简述IDD的常见发病原因.①遗传基因异常，常表现为X连锁隐性遗传和常染色体隐

性遗传，显性遗传亦有，少见。②中枢免疫器官发育障碍，由遗传或其他原因所致。

③免疫细胞在酶的缺陷，如ADA、PNP、G-6-PD缺乏所致。④免疫细胞间调控机

制异常，辅助缺乏或抑制过剩均可导致免疫缺陷。

简述原发性B细胞缺陷病的主要免疫学和临床特征.

.本组疾病有三种主要免疫学和临床特征：①全部Ig缺失或极度降低，如Bruton综

合征。②局部Ig缺失，如选择性Ig缺陷。③Ig量正常，但在抗原刺激后无免疫应答，

功能缺陷。

表达AIDS三大标志的主要免疫学检测.

AIDS检测主要是病毒标志、免疫标志和相关标志二大类。病毒标志主要是直接别

离培养检测病毒或检出HIV组分，P24、gpl20和gpl60的免疫印迹检测；免疫标

志主要是检测HIV的抗原或抗体及T细胞，HIV抗体用ELISA测定为初筛试验，确认

试验用免疫印迹法，亦可用PCR法。我国判定标准为：①HIV抗体阳性：至少有两

条膜〔gp41/gpl20/gpl60〕或至少有一条膜带与P24带同时测定；②HIV抗体阴性：

无HIV抗体特异性条带出现；③HIV抗体可疑：出现特异性抗体带，但带型缺乏

以确认阳性者，T细胞检测减少，常V1.5X109/L。CD4+T细胞绝对值下降至〔2〜4〕

X109/L,CD4/CD8比值＜1,还有Ig、免疫复合物等测定；④相关标志是指与HIV

感染、AIDS病情有关的检测，如有关微生物检测、白细胞、ESR等。

表达AIDS的主要发病机制.

AIDS的主要发病机制：HIV感染后，主要是损伤CD4+T细胞减少和功能缺陷而

导致机体细胞免疫功能继而体液免疫功能全面障碍为其主要的发病机制。同时还损

伤巨噬细胞、树突状细胞、B细胞和脑组织小胶质细胞，导致相应的功能障碍。HIV

损伤T细胞是通过HIV外膜蛋白gpl20和gp41与T细胞发生拈附、溶解、使病毒核心

进入靶细胞，在靶细胞进展复制，繁殖，最后以芽生方式破坏细胞膜而移出，进展

感染扩散，从而破坏CD4+T细胞，导致免疫缺陷。

论述流式细胞术在免疫学中的应用。

1.淋巴细胞及其亚型的分析2.淋巴细胞功能的分析3.淋巴造血系统及白血病免疫分

型4.肿瘤耐药基因分析5.AIDS检测中的应用6.自身免疫病相关HLA分析7.移值免疫

中的应用

何谓重链病.

重链病是由于浆细胞发生突变和异常增生，致使血清和尿中出现大量游离的无免疫

功能的免疫球蛋白重链所导致的疾病。

何谓轻链病.

轻链病是突变的单克隆浆细胞产生的大量轻链，血浆中轻链含量异常增加，增加的

轻链从肾脏排泄，血和尿中可查及大量的轻链蛋白。

何谓免疫球蛋白异常增生性疾病.

免疫球蛋白异常增生性疾病是指由于浆细胞的异常增殖而导致的免疫球蛋白异常

增生造成机体病理损伤的一组疾病。

何谓浆细胞异常增殖.

浆细胞异常增殖通常是指单克隆浆细胞异常增生并伴有单克隆免疫球蛋白或其多

肽链亚单位合成异常。

何谓ANA,简述荧光免疫组化法（间接法）检测血清总ANA的原理。

ANA即抗核抗体，指各种成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体，可与不同的

细胞核反响，无器官特异性和种属特异性间接法检测ANA原理：用小鼠肝切片或

印片或HEP2细胞作为细胞核基质抗原，加待测血清，假设含有ANA,那么与细胞

核基质抗原反响，再加荧光素标记的抗抗体（二抗），结合一抗，在荧光显微镜下见

到细胞核有荧光着色为阳性反响。

ANA有哪些种类，它们在SLE诊断中的价值如何.

答：抗核抗体是一种广泛存在的自身抗体，主要包括，抗DNP抗体，抗DNA抗体，

抗ENA抗体，抗组蛋白抗体。约99%〔86%〜100%〕的活动期SLE病人ANA阳

性，ANA阴性几乎可除外SLE的诊断。

你知道哪些自身抗体，临床应用价值如何.

答：1〕ANA:在未经治疗的SLE患者中阳性率可达90%以上，其他自身免疫病也

可阳性。可作为自身免疫病，尤其是SLE的筛选指标。2〕抗Sm抗体：SLE的特

征性标志抗体，是SLE重要诊断指标。3〕抗dsDNA抗体：SLE的特征性标志抗

体，是SLE重要诊断指

试述自身免疫病的防治原那么。

答：自身免疫病的防治原那么大致为：〔1〕预防和控制病原体的感染，防止因自

身组织细胞的抗原性发生改变和穿插抗原诱发的免疫应答，同时也防止感染引起的

抗原提呈细胞和T细胞的激活。〔2〕使用免疫抑制剂如环抱霉素A、FK-506、皮

质激素、中药雷