2015生物竞赛详解

2015生物竞赛详解

1.细胞分化发生在细胞周期哪一阶段：（单选）（B）

A.细胞分裂前期B.细胞分裂间期

C.细胞分裂中期D.细胞分裂末期

【解析】细胞分化：在个体发育中，由一种

相同的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、

结构和功能上形成稳定性差异，产生不同的

细胞类群的过程称为细胞分化（cell

differentiation）,细胞周期包括长时间

的分裂间期和短时间的分裂期，细胞分裂结

束后进入细胞分裂间期，新生的子细胞进入

细胞生长期，开始合成生长所需的各种蛋白

质，糖类，脂质等构建新细胞。如果还要进

行分裂，则步入下一个分裂周期；如果不再

分裂，则步入G。期执行特定生物学功能。

2.细胞骨架是由一系列结构蛋白装配而成

的纤维状网架结构，在细胞运动、物质运输、

能量转换、信息传递、细胞分裂、免疫行为、

细胞分化以及细胞形态维持等过程中发挥

重要作用。下面不属于细胞骨架的是：（单选）（D）

A.微丝B.微管C.中间纤维D.内质网

【解析】细胞骨架（cytoskeleton）主要包括微丝（microfilament,MF）、微管（microtubule,MT）

和中间丝（intermediatefilament,IF）3种结构组分。内质网（endoplasmicreticulum,ER）是真

核细胞中最普遍，最多变的细胞器，是由封闭的管状或扁平囊状膜系统及其包被的腔形成的互相沟通的三

维网络结构。

3.下列哪种细胞最适合用来研究溶酶体：（单选）（C）

A.肌肉细胞B.神经细胞C.具有吞噬作用的白细胞D.细菌细胞

【解析】溶酶体（lysosome）是单层膜围绕，内含多种酸性水解酶类的囊泡状细胞器，主要功能是行使细

胞内消化作用。进行吞噬作用来消化衰老细胞碎片等等的白细胞是最佳选择。

4.ICM（内细胞团）属于：（单选）（B）

A.人工诱导干细胞B.胚胎干细胞

C.多能干细胞D.化学诱导干细胞

【解析】内细胞团(innercellmass,ICM)

是大多数真兽类哺乳动物在胚胎发生中的

一个早期阶段，又称胚细胞

(embryoblast)。是一团位于初期胚胎中

的一个细胞团块，也是最后将会发育成为

胎儿的部位。内细胞团是早期干细胞的来

源之一。胚胎干细胞(embryonicstem

cells,ESC)即是从囊胚期的内细胞团和

早期胚胎的原始生殖细胞(primordial

germcell,PGCs)中分离到一类具有自我

更新能力的多潜能性细胞。

5.下列哪种特征是癌细胞特有的：(单选)

(D)

A.细胞进行频繁分裂B.血管新生C.基因突变D.进行组织浸润

【解析】癌细胞的基本特征：1.细胞生长与分裂失去控制；2.具有浸润性和扩散性；3.细胞间相互作用改

变；4.表达谱改变或蛋白质活性改变：5.失去接触抑制，不再贴壁生长(体外培养)。本题中，A选项也

是一些分化程度低的细胞(如干细胞)会有的特点；B选项：新生血管，就是从一般血管新伸出的螺旋状

毛细血管。人体在怀孕等一定条件下，可以出现新的血管，除此之外如果出现新生血管时，即会引发特定

的疾病，这些疾病总称为“血管新生疾病”，如癌症、类风湿性关节炎、退行性关节炎、糖尿病性视网膜

病变等等。假如是癌症的话，新生血管就会将癌细胞误认为一般细胞，积极地输送氧气与养分，使癌细胞

扩大到免疫力无法控制的阶段。此外，新生血管也成为癌细胞转移到新地方的途径。而其他病症，如慢性

类风湿性关节炎或者退行性关节炎的则是，原来应该没有血管存在的关节软骨因某种异常变化，而形成新

的血管，使得软骨受到侵蚀，造成关节变

形或疼痛。所以血管新生并不是癌细胞特

有的；C选项基因突变可以发生于任何受

到严重物化等刺激的细胞中；而D中具有

局部浸润和远处转移能力是恶性肿瘤细胞

特有的性质。

6.受体是细胞膜上或细胞内能识别生物活

性分子并与之结合的物质，能与受体结合

的生物活性物质统称为配体。下列有关受

体的描述中，不正确的是：(单选)(C)

A.一般为糖蛋白B.与

配体的结合具有特异性和亲和性

C.通过共价键与配体结合D.具

有饱和效应

【解析】A：受体(receptor)是一类能够

识别和选择性结合某种配体的大分子，已

经鉴定的绝大多数受体都是蛋白质且多为

糖蛋白，少数受体是糖脂。B：特异性

(specificity)：受体至少有两个功能域,

一个是结合配体的功能域，一个是产生效

应的功能域，分别具有结合特异性

(bindingspecificity)和效应特异性

(effectorspecificity)。C：细胞受体

与胞外配体通过结构互补机制以非共价键

结合，形成受体-配体复合物。D：受体和

配体的结合具有饱和性和可逆性的特征。

7.如果一种质膜糖蛋白是通过膜泡分泌途径来自于高尔基复合体，该蛋白寡糖链和N端都面向高尔基体腔

内，那么质膜上，该糖蛋白的寡糖链和N端面向：（单选）（A）

A.胞外面B.胞质面C.寡糖链在胞外面，N端在胞质面D.寡糖链在胞质面，N端在胞外面

【解析】高尔基体（Golgibody）的膜泡运输模型：如下图所示，寡糖链和N端都位于高尔基体腔内，通

过小泡运输到细胞膜后，小泡膜与细胞膜融合，蛋白质的寡糖链和N端都会面向细胞膜外侧。

8.以下哪项描述与马达蛋白的功能不相关：（单选）（C）

A.鞭毛和纤毛的运动B.肌肉收缩C.蛋白质的折叠D.有丝分裂中染色体的移动

【解析】马达蛋白（motorprotein）利用ATP水解酶释放的能量驱动自身沿微管或微丝定向运动的蛋白，

可分为3类：沿微管运动的驱动蛋白、动力蛋白和沿微丝运动的肌球蛋白。A：鞭毛和纤毛的运动与微管

有关；B：肌肉收缩与微丝有关（肌球蛋白）；C：分子伴侣是胞内蛋白折叠、组装与转运的帮助蛋白，与

马达蛋白无关；D：染色体的移动与纺锤体有关，由微管组成。

9.以下脂质分子中，具有乳化作用的是：（单选）（B）

A.甘油三酯B.棕柳酸钠C.甘油磷脂D.胆固醇

【解析】本题有争议。乳化作用：乳化作用是将一种液体分散到第二种不相溶的液体中的过程。使本来不

能互相溶解的两种液体能够混到一起的现象称为乳化现象。乳化机理：乳化剂既亲水又亲油的性质，使之

易于在油水界面上吸附并富集，降低了界面张力。在人体中胆汁可以乳化脂肪形成较小的脂肪微粒。

只要具有亲水和亲油两种性质的物质就可以有乳化作用，所以其实本题BCD都对！

10.以下几种不同碱基组成比例的DNA分子，哪一种DNA分子的Tm值最高：（单选）（A）

A.A+T=15%B.G+C=25%C.G+C=40%D.A+T=80%E.G+C=35%

【解析】Tm值是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同序列的DNA,Tm值不同。

DNA中G-C含量越高，Tm值越高，成正比关系。选项中经计算，G+C的比例分别是：A=l-15%=85%;B=25%；

C=40%;D=l-80%=20%；E=35%,,

11.蛋白质组学是：（单选）（A）

A.研究一个基因组所表达的全套蛋白质B.研究蛋白质序列以发现新的蛋白质

C.研究DNA与蛋白质的复合物D.研究蛋白质合成过程中的能量消耗

【解析】蛋白质组学（proteomics）,又译作蛋白质体学，是对蛋白质，特别是其结构和功能的大规模研

究，意指“一种基因组所表达的全套蛋白质”，即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。蛋白

质组学本质上指的是在大规模水平上研究蛋白质的特征。是在90年代初期，由MarcWikins和学者们首

先提出的新名词。

12.大肠杆菌DNA复制过程中，下列哪种酶不参加该生物学过程：（单选）（E）

A.DNA聚合酶B.RNA聚合醐C.DNA连接酶D.RNA酶E.端粒酶

【解析】上图示DNA复制过程,

DNAprimaseJJNA啤i施

A：DNA聚合酶将相应的去氧核DNA速郎，RNAprimer\

DNA聚合瓶DNAligaseRNA3子\\

甘酸连接到新生DNA链上；B：DNAPolymerase(Pokx)»I\\

合成RNA引物需要用到RNA聚

.3/

合酶；C：DNA连接酶连接DNALagging

链3'-0H末端和另一DNA链的strand

5'-P末端，把两段相邻的DNA同崎片区Okazakifragment

5,

链连成完整的链；D：RNA酶水Leading

的暹股

解引物RNA；E：端粒酶strandIbpoi&omerase

3,貂横哭横胸

（Telomerase）把端粒修复延DNA聚合侑DNAPolymerase(Pol8)///

缘族醒Helicase，/

Singlestrand.,

里段祐台索臼Bindingproteins

BaitProtein-ContainingSolution

SketchforStreptavidin

(Purple)-Biotin(Red)Bond

长，填补DNA复制的缺陷，使得细胞分裂的次数增加。但是端粒是存在于真核细胞中的结构，不存在于

大肠杆菌细胞中。

13.在亲和层析中，如果使用链霉亲和素制备亲

和吸附剂，则目标蛋白质需要具有：（单选）（C）

A.多聚His标签B.HA标签C.生物素

标签D.泛素标签

【解析】亲和层系的过程：将具有特殊结构的亲

和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被

分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有

亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱

中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直

接流出。这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层

析。链霉亲和素-生物素复合物（streptavidin-biotin

complex,SABC)法,是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。链霉亲和素

是一种从链霉菌中提取的蛋白质，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍（我

在基因工程那节课讲过）！所

以SABC是专为免疫组化和其

他免疫检测而设计的，用以显

示组织和细胞中抗原分布。其

它选项中多聚组氨酸标签（HisInvivocloningandamplificationInvitroadaptorligation

tag）一般为6个组氨酸，可与

多种金属离子发生特殊的相互

作用,包括Ca包Mg*、Ni*、

Co?’等，其中以银离子使用最为

CyclesequencingGenerationofpolonyarray

2

广泛，故一般用NF（CU'）3a•…GACTAGATACGAGCGTGA..-5*(tempiAt«>

Q(prtmeO

亲和层析纯化；（禽流感病毒）CTGAYC'Q

.CTGATCT-^^

血凝素标签（HAtag）,..CTQATC1

CTGATCTAT

N-YPYDVP-C,用HA抗体纯化CTGATCTATG

...CTGATCIATGC)

（如下图）；泛素标签PotymGraso...CTGATCTATGCT

dNTPsCTGATCIATGCTC

（ubiquitin）与蛋白质降解有LabeledckSNrp$CTGATC7ATGCTCGK

关。

EloctrophorscsisCyclicarraysoquoncing

14.Sanger终止法测序中，用(1read/capillary)(>10®reads/array)

于使DNA合成反应终止的是：Cycle1Cycle2Cycte3

（单选）（D）

A.dNDPB.ddNDP

C.dNTPD.ddNTPWhatisbas«1?Wliai»2?Whatitbase3?

【解析】Sanger终止法测序：利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物，直到掺入一种

链终止核甘酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核甘酸三磷

酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核昔三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3'-OH

基团，使延长的寡聚核甘酸选择性地在G、A、T或C处终止。

15.蛋白质泛素化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰调控方式，以下关于蛋白质泛素化修饰的说法，错

误的是：(单选)(B)

A.蛋白质上特定的Lys侧链与泛素之间形成共价连接

B.蛋白质泛素化修饰是不可逆的

C.蛋白质泛素化修饰可调节蛋白质的降解D.泛素是一种低分子量的蛋白质

【解析】蛋白质泛素化：是识别并降解错误折叠或不稳定蛋白质的机制。A：在蛋白质分子的氨基酸序列

中，除了有决定蛋白质在细胞内定位的信号与修饰作用有关的信号外，还有决定蛋白质寿命的信号，这种

信号存在于蛋白质N端的第一个氨基酸残基，若N端的第一个氨基酸是Met、Ser、Thr、Ala、Vai、Cys、

Gly或Pro,则蛋白质是稳定的；如是其他12种氨基酸之一，则是不稳定的(N-terminalrule)»这种蛋

白质降解依赖泛素(ubiquitin)的存在。蛋白质的泛素化酶级联系统由3种蛋白组成：泛素活化酶(E1)、

泛素结合酶(E2)和泛素连接酶(E3)。首先在ATP供能的情况下泛素激活酶E1激活泛素，然后将其转移到

泛素结合酶E2上通过硫酯键与E2的活性位点的Cys相连。E2可以直接将泛素转移到靶蛋白的Lys残基

上，但一般靶蛋白的泛素化需要一个特异的泛素连接酶E3。在所有泛素化修饰的类型中，通过48位赖氨

酸(K48)连接和63位赖氨酸(K63)连

接的泛素修饰研究得最为透彻。因此，

蛋白质的泛素化修饰在蛋白质的Lys(K)

残基位点，泛素本身也有多个Lys残基

与泛素分子末端竣基结合，故蛋白可以

连有多个泛素。

B：泛素化修饰过程是一种可逆的共价

修饰过程(泛素化-去泛素化)。去泛

素化酶属于蛋白酶体超家族，据估计，

在人类基因组中有561个成员。C：泛

素化修饰能够调节被修饰蛋白的稳定

性、功能活性状态以及细胞内定位等情

况。D：泛素是由76个氨基酸残基组成

的分子量为8.5X103的小分子球蛋白。

16.染色质DNA的碱基可被甲基化，DNA甲基化的作用是：(单选)(B)

A.关闭某些基因B.可关闭某些基因，同时活化另一些基因

C.与基因表达调节无关D.活化某些基因

【解析】DNA甲基化（DNAmethylation）与基因表达的阻遏有关。非活跃转录的DNA甲基化程度普遍高

于活跃转录的基因。但是，DNA甲基化和去甲基化与基因活性的关系并不是绝对的，在某些情况下，甲基

化不足的基因是有活性的，在另一些情况下，含有额外甲基的基因是有活性的，而甲基化不足的模板是无

转录活性的。具体而言，启动子的DNA甲基化对基因的表达有抑制作用，而基因本体的DNA甲基化与基因

的表达关系因物种或细胞类型不同而异。增强子的DNA甲基化状态与基因活性呈反比关系，沉默子则相反

呈正相关（下图黑圈甲基化，白圈去甲基化）。转座子的DNA高度甲基化抑制其转座活性，从而维持基因

组的稳定性等等。

17.以下四个代谢反应中，没有焦磷酸生成的反应是：（单选）（D）

A.生成UDP-葡萄糖的反应B.生成脂酰CoA的反应

C.生成精胺琥珀酸的反应D.生成谷氨酰胺的反应

【解析】A：GT-P和UTP在UDPG焦磷酸化酶催化下生成UDPG与PPi,这是糖原合成（动物）和蔗糖合成

（植物）的第一步；B：脂肪酸在氧化分解前，必须先转变为活泼的脂酰CoA,需要消耗一个ATP,生成脂

酰CoA和PPi；C：鸟氨酸循环中，在ATP与Mg2+的存在下，精胺琥珀酸合成酶催化瓜氨酸与天冬氨酸缩

合为精胺琥珀酸，同时产生AMP及

PPi;D：氨基酸脱氨作用形成的氨

除了以尿素这样的含氮物排出体

外，还可以以酰胺的形式储存，存

在于脑，肝及肌肉等细胞组织中的

谷氨酰胺合成酶，能催化谷氨酸与

氨作用合成谷氨酰胺，消耗ATP生

成ADP和Pi。注意,如果是天冬酰「A.TP

aa

胺的话，生成的就是PPi了。另外,

之前泛素化的过程生成的也是焦磷

酸，当然还有蛋白质翻译中的氨基

酸活化，DNA的合成磷酸二酯键的

形成等都是常见的产焦磷酸的反

应。焦磷酸迅速水解使得反应具较

高不可逆性。

18.质粒是一种存在与微生物细胞染色体外的

DNA分子，它们：（单选）（A）

A.大多数是双链、环状DNA分子

B.大多数是单链、环状DNA分子

C.大多数是线性的DNA分子

D.大多数是线性的RNA分子

【解析】质粒（plasmid）是细胞染色体外能够自

主复制的很小的环状双链DNA分子，存在于许多

细菌以及酵母菌等生物中，乃至于线粒体等细胞Fis.

器中。线性的质粒在原核生物中也有发现，如玉

米线粒体中的SI和SII质粒,子囊菌（Ascobolus

immersus）中的质粒，链霉菌中p$LA1和pSLA2质粒以及酵母中的pGKL1和pGKL2质粒等。有同学马

上就会质疑复制缺失的问题，然而这类质粒往往具有特殊的结构和功能（如下图），能以类似腺病毒的末

端机制进行无损复制。

19.与革兰氏阴性菌相比，革兰氏阳性菌细胞壁中特有的组分是：（单选）（D）

A.肽聚糖B.脂多糖C.蛋白质D.磷壁酸

【解析】磷壁酸（teichoicacid）是革兰氏阳性菌细胞壁的特殊组份，是由核糖醉（ribitol）或甘油

（glycerol）残基经由磷酸二键互相连接而成的多聚物。革兰氏染色的结果取决于细菌细胞壁的结构。

革兰氏阳性菌细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故

保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。革兰氏阴性菌细胞壁肽聚糖层薄，交联松散，乙醵脱色不能

使其结构收缩，且细胞壁上的脂溶解，缝隙加大，将结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。

2O.GenBank主要收集：（单选）（C）

A.基因化学样品B.遗传物质化学样品C.遗传物质的序列信息D.蛋白质的结构信息

【解析】基因银行（GenBank）是一个开放获取的序列数据库，对所有公开可利用的核甘酸序列与其翻译

的蛋白质进行收集并注释。1982年，由美国国立卫生研究院、美国国家科学基金会、美国能源部和国防

部共同出资，LANL与BBN科技公司合作，成立了GenBank。到1983年底，已有超过2,000个序列被存储

在GenBanko截至2013年7月8日，GenBank的版本196.0己有165,740,164个基因座,152,599,230,112

个碱基，165,740,164个报导序列。

21.高通量测序方法在下面哪种实验中没有应用：（单选）（D）

A.基因表达谱检测B.全基因组变异检测C.基因组甲基化检测

D.蛋白质表达检测E.非

编码RNA表达检测

【解析】高通量测序技术

（High-throughput

sequencing）又称"下一代"

测序技术

（“Next-generation“sequenc

ingtechnology）,能一次并

行对几十万到几百万条DNA分

子进行序列测定，然后对每一

步反应所产生的信号进行同时

的检测，以此来获取测序的数

据，经过计算机分析获得完整

的DNA序列信息。同时，高通

量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌的分析成为可能，所以又被称为深度测序

（deepsequencing）。高通量测序技术主要在基因组测序、转录组测序、遗传疾病谱的测序、基因表达调

控、转录因子结合位点的检测、甲基化的研究以及针对细胞全部转录产物如smallRNA等研究领域应用。

高通量测序可以检测基因表达谱;检测基因组上未知变异位点中新的SNP；检测基因组甲基化;通过IncRNA

（长非编码RNA）芯片检测还可以快速高通量的获得与特定生物学过程或者疾病相关的IncRNA的表达变

化。故ABCE都正确。蛋白质表达谱检测一般使用高通量抗体芯片技术。

22.用超声波处理烟草基因组DNA后，用下列哪一个工程酶处理可以获得平末端片段，用于后续克隆：（单

选）（B）A.限制性内切酶B.大肠杆菌DNA聚合酶C.Klenow片段D.反转录酶

【解析】超声波打断的DNA片段，可能是平末端或者粘末端，获得平末端片段才方便连接T载体进行后续

克隆。A：限制性内切酶处理后的切口，如果是从回文序列中间切的话是平末端，也可能是从回文序列两

边切，结果是粘末端。并且随便用限制性内切酶，万

一把自己的目的基因切断了更无法进行后续克隆了；DNApoljimeiaseI

B：大肠杆菌DNA聚合酶是Klenow片段的来源，含有Holoenzyme

"Laigefiagnent

5'-3'外切酶活性，其实不太适合填补末端；C：KlenowPioleolysis

片段，又名DNA聚合酶I大片段（克列诺片段，Klenow(Klenowliagmenl)

fragment,或称克列诺酶，Klenowenzyme）,是完整

的DNA聚合酶I的一个片段。该片段保留了DNA聚合

酶I的5'-3'聚合酶和3'-5'外切酶活性，但缺少完dofiiainexonuclease

整酶的5'-3'外切酶活性，可用于填补DNA单链末端5'-)3'exonuclease

31-)5'exonucleasedomain^11

使之成为双链。当用交错切割的限制酶切成带有单链

粘性末端的DNA片段，而要用被切成平头末端的

abmKlenowFragment

DNA片段连接时，可以先用Klenow片段使粘性末

端的单链补齐成为平头，然后在DNA连接酶作用

下把两个片段连接起来。D：反转录酶

（Reversetranscripatase）是以RNA为模板指导

三磷酸脱氧核甘酸合成互补DNA（cDNA）的前。IabmKlenowFfOQment

[RoomTemperature

除了Klenow片段以外还可以使用T4DNA

Polymerase,即T4DNA聚合酶。这也是一种模板5*-»3*Polymerasefillsin

S^-overhang.-5'

依赖的DNA聚合酶，可以在结合有引物的单链DNA

3'"»5'Exonuclease

模板上，从5'-3'方向催化DNA合成反应。T4DNA3'-overhang

Polymerase具有3'-5'外切酶活性，但也不具有

5'-3'外切酶活性。

23.下列哪个指标能证明大肠杆菌中成功表达了外源酶蛋白质：（单选）（D）

A.核酸杂交证明蛋白质表达B.在蓝白筛选中菌落呈现蓝色

C.RT-PCR能扩增外源基因D.纯化目的蛋白质具有酶活性

【解析】A：核酸杂交：双链的核酸分子在某些理化因素作用下解开，在条件恢复后依据碱基配对原则形

成双边结构。用于检测DNA或RNA分子的特定序列o

这种方法可以检测外源基因是否成功定居于大肠

杆菌体内，但并不能检测是否成功表达。B：蓝白

crra

prc<iso°°O\_Z6M喃O°Covcis

1:,P

细苗在含'翼蒯级予蛆箔在含、的阑卜舟纵子

妙n语导剂瞬趾断卷n询导剂械妣培养

筛选:是在指示培养基上用颜色筛选重组克隆的方

法。原理：野生型大肠杆菌产生的B-半乳糖昔酶可以将无色化合物X-gal（5-澳-4-氯-35引躲-64>半

乳糖甘）切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溟-4-靛蓝。有色物质可以使整个培养菌落产生颜色变化，而颜

色变化是鉴定和筛选的最直观有效的方法。实验中使用是--种B-半乳糖昔酶缺陷型菌株，它有一段基因

突变造成编码的B-半乳糖甘酶失去一个短肽，从而失去活性。我们把外源DNA装载到质粒上运输进大肠

杆菌。如果没加载上，质粒基因编码的a-肽链可以与这种缺失短肽的B-半乳糖普酶互补，具有和正常B

-半乳糖昔酶一样的活性，即可以生成蓝色物质；如果加载上了，那外源DNA就破坏了我们载体质粒上的

a-肽链，细菌不能成功表达这种酶，菌落呈现白色。所以蓝白筛选是大肠杆菌是否成功加载重组基因的

直接检测方法。C：RT-PCR逆转录PCR,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行

DNA扩增。此方法可以说明外源基因已经成功加载并转录成RNA了，但由RNA到蛋白质的表达过程是否成

功我们仍不知。D：大肠杆菌表达外源酶蛋白质，直接可以想到大肠杆菌能够吸收外源基因产生蛋白质（酶）

产物，我们纯化该产物蛋白，具有酶活性的话说明大肠杆菌表达成功。

24.革兰氏染色是重要的细菌鉴别染色，影响革兰氏染色结果的关键因素是：（多选）（AE）

A.菌株培养时间B.菌液稀释倍数C.涂片时间D.固定方式E.酒精脱色时间

【解析】A：菌龄影响染色，菌龄老、陈旧的细菌培养物，以及菌体死亡或自溶，往往会由阳性菌转变成

阴性菌，一般使用18小时左右的细菌培养物，不要超过24小时。B：菌液稀释倍数也会影响涂片薄厚，

如果菌液很浓，很容易涂片过厚，使得阴性菌大量聚集，菌体明显堆积在一起，不易脱色，呈现假阳性反

应。例：大肠杆菌密集不易脱色或脱色不完全而呈G+反应，故稀释倍数也有一定影响。C：涂片时间应无

大碍，但染色时间会有关系，过短则染色不完全，过长则可能破坏细菌结构。D：固定方式，目前革兰氏

染色只查到微火烘烤一种固定方式，有一个教学实验文献将固定方式分为：自然干燥固定，自然干燥+微

火固定，微火干燥固定，稍重火焰干燥固定，染色结果是有很大差异的，尤其对于革兰氏阴性菌来说［3］。

但本题题目上为关键因素，所以个人认为可以不考虑。E：脱色是染色是否成功的关键，脱色过度，阳性

菌也可能被脱色而成为假阴性；时间过短，阴性菌也可能被染成假阳性。

25.可以由RNA聚合酶HI转录的RNA包括：（多选）（ACD）

A.5SrRNAB.mRNAC.tRNAD.部分miRNA

【解析】真核细胞三种RNA聚合酶的某些性质

酶定位相对活性产物

RNA聚合酶I核仁50-70%5.8SrRNA18SrRNA

RNA聚合酶II核质20-40%mRNAsnRNA

RNA聚合酶III核质10%tRNA5SrRNAU6snRNAscRNA

microRNA简称miRNA,是一种内源性非编码单

链小分子RNA,大小约为22个核甘酸。在结构上，

编码miRNA的基因由RNA聚合酶II转录，只有少

数由RNA聚合醐III转录。所以本题选择ACD,

26.核仁中存在的生物成分是：（多选）（ABE）

A.rDNAB.28SrRNAC.16SrRNA

D.RNA聚合酶IIE.RNA聚合酶I

【解析】A：rDNA是指核DNA中编码核糖体蛋白

的DNA序列；B：rRNA-一般存在于细胞核的核仁

组织区，在转录完毕后结合成核糖体的大小两个

亚基并在细胞质中与mRNA结合形成核糖体。由

于题目是核仁中存在的生物成分，所以真核生物

的28srRNA是对的；C：16SrRNA存在于原核生

物核糖体中，原核生物无核仁结构；D：由上题

的表格反应，RNA聚合酶H存在于核质中；E：由上题的表格反应，RNA聚合酶I存在于核仁中。

27.以下哪些蛋白质与其配体之间的相互作Ti

二

0二-

del毕s

of一

si毕g

用中存在明显的诱导契合效应：（多选）（AC）id甲e

一

All毕o

、

Ali甲n

甲

甲

一

A.抗体与抗原B.氧结合蛋白与氧分子一

一

一

军

毕

甲

C.己糖激酶与葡萄糖D.蛋白激酶A与:一

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【解析】1958年,Kosh析nd提出“诱导契型

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合”假说，认为酶分子的结构并非与底物分一

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