执业兽医师考试培训-免疫部分学习

第一节抗原一、概念凡是能刺激机体产生抗体和效应性淋巴细胞，并能与之结合引起特异性免疫反应的物质称为抗原，又可称为免疫原。抗原刺激机体产生抗体和效应淋巴细胞的特性——免疫原性。抗原与相应抗体或效应淋巴细胞发生特异性结合的特性——反应原性。二、影响免疫原性的因素抗原分子的特性宿主生物系统免疫剂量与途径异源性分子大小化学组成与结构物理状态三、抗原决定簇抗原决定簇又称抗原表位。抗原分子中与淋巴细胞特异性受体和抗体结合，具有特殊立体构型的免疫活性区域。表位类型——线性表位/顺序表位构象表位/不连续表位含有多个表位的的抗原称为多价抗原；只有一个抗原表位的抗原称为单价抗原。四、抗原的交叉性不同物种间存在共同的抗原组成不同抗原分子存在共同的抗原表位不同表位之间有部分结构相同五、抗原的分类依据抗原性质——完全抗原和不完全抗原。根据抗原加工提呈途径——外源性抗原和内源性抗原。根据抗原来源——异种抗原、同种异型抗原、自身抗原、异嗜性抗原。超抗原——如金黄色葡萄球菌肠毒素等。六、佐剂先于抗原或与抗原混合同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅佐作用，这类物质称为佐剂或免疫佐剂。PS：盐类佐剂——铝盐油乳佐剂——弗氏佐剂……佐剂主要用于灭活疫苗等！属于同种异型抗原的物质是A、血型抗原B、免疫球蛋白C、灭活的细菌D、异嗜性抗原E、病毒衣壳蛋白抗原特异性取决于（）A.抗原的物理性状B.抗原的分子量C.抗原决定簇 D.抗原结构的复杂性E.抗原的化学性质抗原与相应的抗体或效应淋巴细胞发生特异性结合的特性称为（）A.免疫原性B.反应原性C.抗原性D.异原性 E.特异性金黄色葡萄球菌分泌的肠毒素是一种（）A.异种抗原B.自身抗原C.半抗原 D.同种异型抗原E.超抗原第二节抗体一、免疫球蛋白与抗体存在于动物血液、组织液及其他外分泌中的具有相似球形结构域的蛋白，称为免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）。抗体是动物机体收到抗原物质刺激后，由B淋巴细胞转化为浆细胞分泌的、能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。PS:如果没有特殊说明，提到免疫球蛋白往往指代抗体。二、抗体的基本结构Ig单体的结构模式图J链J链与分泌片IgG——血清中含量最高，半衰期长，抗感染免疫主力IgM——初次免疫应答最早产生的免疫球蛋白，在抗感染免疫早期发挥重要作用IgA——主要以分泌形式存在，粘膜局部免疫发挥作用IgE——血清含量很少，与嗜碱性粒细胞或肥大细胞高亲和力结合，介导Ⅰ型超敏反应，在抗寄生虫免疫中发挥重要作用多克隆抗体——将抗原物质经不同途径注入动物体内，经数次免疫后，采集动物血液，分离出血清，由此获得的抗血清即为多克隆抗体。单克隆抗体——由一个B细胞分化增殖的子代细胞产生的针对单一抗原决定簇的抗体。在机体抗感染免疫早期，发挥最主要作用的抗体是A、IgAB、IgDC、IgED、IgGE、IgM参与凝集试验的抗体主要是A、IgA和IgMB、IgA和IgGC、IgG和IgMD、IgG和IgEE、IgM和IgE在抗寄生虫感染中起重要作用的抗体是A.IgGB.IgMC.IgAD.IgDE.IgE体液免疫初次应答特点不包括A.具有潜伏期B.抗体维持时间短C.抗体效价低D.IgM最早产生E.IgG最早产生第三节免疫系统免疫器官免疫细胞免疫分子免疫系统中枢免疫器官外周免疫器官黏膜相关淋巴组织/黏膜免疫系统免疫器官中枢免疫器官免疫细胞发生和发育成熟的器官骨髓、胸腺、禽类的法氏囊骨髓——动物体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。淋巴干细胞经血流迁入胸腺后，分化发育成为成熟的T淋巴细胞。胸腺颈叶胸腺中间叶胸腺胸叶法氏囊是鸟类特有的结构，位于泄殖腔后上方，囊壁充满淋巴组织。法氏囊是禽类的中枢免疫器官，是B淋巴细胞发育成熟的场所。外周免疫器官免疫应答的发生部位脾脏和淋巴结脾脏——动物体中最大的淋巴器官，是血循环中重要的滤过器，能清除血液中的异物、病菌以及衰老死亡的细胞，特别是红细胞和血小板。牛的脾脏淋巴节——遍布于淋巴循环系统的各个部位。可以过滤和清除异物，同时也是免疫应答的发生场所。哈德尔氏腺——禽类眼窝内的腺体之一，又称瞬膜腺。在抗原刺激下，产生免疫应答，分泌特异性抗体。对禽呼吸道免疫很重要。黏膜相关淋巴组织黏膜相关淋巴组织/黏膜免疫系统分布于全身各黏膜附近，无包膜的弥散样淋巴组织。具有功能独特的细胞。功能相对独立。免疫细胞骨髓是所有血细胞的来源化验血液时报告中的三项——红细胞、血小板、白细胞具体来说红细胞血小板中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞肥大细胞浆细胞T细胞单核细胞巨噬细胞髓系树突状细胞淋巴系树突状细胞B细胞介导特异性免疫应答的细胞T淋巴细胞——胸腺依赖性淋巴细胞，在胸腺中发育成熟。在血液、淋巴液及外周免疫器官中不断循环，参与细胞免疫应答。重要的表面标志包括TCR、CD3、CD4、CD8等。B淋巴细胞——骨髓依赖性淋巴细胞或囊依赖性淋巴细胞。在哺乳动物骨髓或禽类法氏囊中发育成熟。大量分泌抗体，介导体液免疫应答。重要的表面标志包括BCR、Fc受体、补体受体等。K细胞和NK细胞无T和B细胞表面标志，具有非特异性杀伤功能。形态学上难以与淋巴细胞相区分。K细胞——主要粗在于腹腔渗出液、血液和脾脏。NK细胞——主要存在于外周血和脾脏。两种细胞均可通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC作用）杀伤靶细胞，也可通过表面杀伤抑制受体（KIR）或杀伤活化受体控制（KAR），非特异性杀伤靶细胞。辅助性细胞一类在免疫应答过程中将抗原提呈给抗原特异性淋巴细胞的免疫细胞，又称为抗原提呈细胞（APC）。表面组成型表达MHCII类分子。抗原提呈细胞单核吞噬细胞（吞噬杀伤、抗原加工提呈、

分泌生物活性物质）树突状细胞（最强大的抗原提呈细胞）B细胞免疫分子免疫细胞分泌或表达的多肽、蛋白质执行免疫识别、免疫调节、免疫效应细胞因子、补体、急性期蛋白以及免疫球蛋白等。补体——存在于正常动物和人血清中的一组不耐热具有酶活性的球蛋白。热不稳定。（56℃，30min完全灭活）激活途径分为经典途径、旁路途径以及MBL途径。激活后介导细胞溶解、细胞粘附、调理作用、免疫调节、炎症反应、病毒中和以及免疫复合物溶解等效应。细胞因子——由免疫细胞和某些非免疫细胞合成和分泌的一类高活性多功能蛋白质多肽分子，介导和调节免疫应答及炎症反应，刺激造血功能，并参与组织修复等。细胞因子分类白细胞介素（IL）：白细胞间起免疫调节作用。干扰素(IFN)：干扰病毒复制，免疫调节，可分为I型干扰素（IFN–α、IFN–β，病毒感染的白细胞）和II型干扰素IFN-γ（抗原激活的T细胞）。肿瘤坏死因子（TNF）：促炎症因子和免疫调节分子。TNF-α，单核巨噬细胞，TNF–β，活化的T细胞集落刺激因子：促进造血干细胞增殖、分化、成熟。细胞因子特性理化特性：低分子量分泌型糖蛋白，多数以单体形式存在。分泌特性：多细胞来源、短暂的自限性分泌、自分泌与旁分泌特点。细胞因子生物学作用特性激素样活性作用：低量高效。通过受体发挥作用：需与靶细胞表面受体结合。多效性：一种细胞因子作用多种靶细胞，表现不同效应。冗余性：多种细胞因子作用同种靶细胞，介导相似的效应。协同性：两种细胞因子对细胞活性的联合作用大于单个细胞因子效应的累加。颉抗性：一种细胞因子的效应抑制或抵消其他细胞因子的效应。细胞因子的网络性细胞因子之间可相互诱生。细胞因子可调节受体的表达——多数细胞因子对自身受体的表达呈负调节，对其他细胞因子受体表达呈正调节。细胞因子间生物学活性相互影响。细胞因子的主要生物学功能参与免疫应答与免疫调节。刺激造血功能。细胞因子参与神经-内分泌-免疫网络信号传递。属于中枢免疫器官的是A、脾脏B、胸腺C、淋巴结D、扁桃体E、哈德氏腺T细胞和B细胞发生免疫应答的场所是A.骨髓 B.外周免疫器官C.中枢免疫器官 D.胸腺E.血液递呈初次接触抗原最有效的细胞是A、巨噬细胞B、B淋巴细胞C、树突状细胞D、胸腺上皮细胞E、血管内皮细胞TNF-α主要由（）产生A.树突状细胞B.单核-巨噬细胞C.B细胞 D.红细胞E.K细胞介导体液免疫应答的免疫分子是能够作用于正常细胞使之产生抗病毒蛋白的免疫分子是由细胞毒性T细胞释放，能够溶解靶细胞的免疫分子是具有酶原活性，活化后可清除免疫复合物的免疫分子是A、抗体B、补体C、抗菌肽D、穿孔素E、干扰素动物机体抗病毒感染免疫中，在消化道、呼吸道黏膜免疫中起主要作用的免疫分子是动物机体抗病毒感染免疫中，在特异性免疫阶段具有中和病毒和调理作用的免疫分子是动物机体抗病毒感染免疫中，在病毒感染初期起主要的非特异性抗病毒作用的免疫分子是A、IgGB、干扰素C、趋化因子D、白介素-2E、分泌型IgA第四节免疫应答什么是免疫应答？动物机体对进入体内的病原微生物和一切抗原物质所产生的复杂的生物学过程，最终清除病原微生物和外来抗原物质，并建立对病原微生物的特异性抵抗力。一、免疫应答的概念先天性免疫应答获得性免疫应答相互依赖、相互促进、不可分割本部分内容重点介绍获得性免疫应答二、免疫应答的类型产生的部位动物机体的外周免疫器官及淋巴组织是免疫应答产生的部位，其中脾脏和淋巴节是免疫应答的主要场所。三、获得性免疫应答免疫应答的基本过程致敏阶段反应阶段效应阶段致敏阶段——抗原提呈抗原提呈由抗原提呈细胞完成。表面组成型表达MHCII类分子的细胞为专职抗原提呈细胞，包括巨噬细胞、树突状细胞和B淋巴细胞。受刺激后表达MHCII类分子的细胞为非专职抗原提呈细胞，包括血管内皮细胞、胰腺β细胞以及胸腺上皮细胞等。另外，所有有核细胞均表达MHCI类分子也可提呈抗原。提呈外源性抗原给CD4+T淋巴细胞提呈内源性抗原给CD8+T淋巴细胞外源性抗原和内源性抗原。外源性抗原和内源性抗原加工与提呈。T细胞对抗原的识别T、B淋巴细胞对抗原的识别B细胞对抗原的识别B细胞可识别胸腺依赖性抗原（TD抗原）和非胸腺依赖性抗原（TI抗原）。TD抗原——抗原激活B细胞过程中需要Th细胞辅助。TI抗原——抗原激活B细胞过程中不需要Th细胞辅助。TD抗原激活B细胞TI1——高浓度时与丝裂原受体结合，活化大多数B淋巴细胞，活化B细胞与BCR特异性无关。TI2——具有适当间隔、高度重复的决定簇，呈线性排列，能够使特异性B细胞的BCR交联，活化B细胞反应阶段——T、B淋巴细胞活化、增殖与分化T细胞的活化、增殖与分化Th细胞活化后表达高亲和力IL-2受体，同时高效分泌表达一系列细胞因子。Tc细胞活化后分化为CTL。B细胞的活化、增殖效应阶段——活化后的T、B淋巴细胞执行免疫效应CTL、TDTH、B细胞分泌的抗体以及活化T、B淋巴细胞分泌的各种细胞因子发挥细胞免疫和体液免疫效应，这些效应细胞和效应分子共同作用清除抗原物质。细胞免疫细胞免疫效应主要表现在杀伤被感染细胞和肿瘤细胞，也可引起机体的免疫损伤。效应性T细胞CTL：识别被感染、肿瘤细胞等提呈的内源性抗原，通过释放穿孔素、颗粒酶溶解靶细胞，也可通过释放肿瘤坏死因子或通过膜表面Fas分子诱导靶细胞凋亡。TDTH：释放多种可溶性细胞因子，引起局部单核细胞浸润为主的炎症反应。体液免疫体液免疫效应是由B细胞分化成浆细胞后分泌的抗体介导的，在清除细胞外病原体方面非常有效。抗体产生的一般规律潜伏期较长最早产生IgM抗体总量低持续期短潜伏期显著缩短抗体含量高，持续期长抗体大部分为IgG，IgM少抗体的免疫学功能第五节超敏/变态反应概念免疫系统对再次进入机体的抗原（变应原）做出过于强烈或不适当的反应，而导致组织器官损伤。过敏反应型（I型）变态反应细胞毒型（II型）变态反应免疫复合物型（III型）变态反应迟发型（IV）变态反应I型超敏反应过敏原IgE肥大细胞和嗜碱性粒细胞组胺、5-羟色胺、白三烯、前列腺素等。毛细血管扩张、通透性增加、皮肤黏膜水肿、血压下降、呼吸道及消化道平滑肌痉挛。临床表现呼吸困难、腹泻、腹痛、全身性休克。常见青霉素过敏、花粉过敏等。兽医临床上，疫苗、蠕虫感染会引起超敏反应。II型超敏反应致敏原抗体（IgM和IgG）补体补体激活，溶解细胞。常见输血反应。兽医临床上，新生幼畜溶血性贫血。III型超敏反应致敏原抗体（IgM和IgG）补体吞噬细胞常见血清病、Arthus反应、葡萄球菌性心内膜炎。IV型超敏反应致敏原TDTH免疫细胞常见结合菌素变态反应、接触性变态反应。输血反应属于典型的A、移植物排斥反应B、迟发型变态反应C、细胞毒型变态反应D、过敏反应型变态反应E、免疫复合物型变态反应属于典型的细胞毒型（II型）变态反应是A、血清病B、青霉素过敏反应C、结核菌素肉芽肿D、新生畜溶血性贫血E、自身免疫复合物病124. 结核菌素变态反应属于典型的（)A.移植物排斥反应B.迟发型变态反应C.细胞毒型变态反应D.过敏反应型变态反应E.免疫复合物型变态反应抗感染免疫是动物机体抵抗病原体感染的能力。涉及先天性免疫和获得性免疫。先天性免疫——第一道防线动物体内的非特异性免疫因素介导的对所有病原微生物和外来抗原物质的免疫反应。是机体在种系发育和进化过程中逐渐建立起来的一系列天然防御功能，智能识别自身和非自身，对异物无特异性区别作用。物理性屏障皮肤角化层和黏膜表面的上皮细胞。分泌物皮肤和黏膜表面分泌物（唾液、泪液、汗液、肠液），这些分泌物中含有抗微生物物质（如酶类、防御素以及脂肪酸等）。微生物代谢产物及营养竞争定殖在皮肤和黏膜表面的非致病性细菌，可以产生一些对病原微生物具有毒性的代谢产物，同时也可以通过占位效应和竞争营养成分抑制病原性微生物的定殖。PS：另外还包括血脑屏障、血胎屏障等。可溶性分子与膜结合受体补体——通过旁路途径和MBL途径激活溶菌酶乙型溶素干扰素抗菌肽C-反应蛋白模式识别受体炎症反应红：炎症初期由于动脉性充血，局部氧合血红蛋白增多，故呈鲜红色。肿：主要是由于渗出物，特别是炎性水肿所致。慢性炎症时，组织和细胞的增生也可引起局部肿胀。热：热是由于动脉性充血及代谢增强所致，部分细胞因子也可引起发热。痛：局部炎症病灶内钾离子、氢离子的积聚，尤其是炎症介质诸如前列腺素、5-羟色胺、缓激肽等的刺激是引起疼痛的主要原因。免疫细胞的参与中性粒细胞单核巨噬细胞树突状细胞自然杀伤细胞获得性免疫——中坚力量三大特点：特异性；具有一定免疫期；具有免疫记忆。1、抗胞外细菌感染抗毒素性免疫溶菌杀菌作用调理吞噬作用一、抗细菌、真菌感染主要依靠抗体2、抗胞内细菌感染巨噬细胞Tc细胞NK细胞Th细胞3、抗真菌感染吞噬细胞NK细胞细胞因子二、抗病毒感染病毒感染初期通过干扰素等细胞因子和NK细胞执行抗病毒作用。获得性免疫应答启动后，IgG成为抗病毒主要抗体，通过中和作用、调理作用和ADCC作用清除病毒及被感染细胞；CTL成为细胞免疫的中坚，担负消灭胞内病毒的作用，在病毒性疾病康复过程中发挥重要作用。三、抗寄生虫免疫1、抗原虫感染单细胞动物，免疫反应与细菌类似。1、抗蠕虫感染IgE嗜酸性粒细胞肥大细胞对于成虫，通过I型超敏反应，促排对于幼虫，利用单核吞噬细胞或CTL来杀伤。第七节免疫防治主动免疫——动物机体免疫系统对自然感染的并与微生物或疫苗接种产生免疫应答，获得对某种病原微生物特异性抵抗力。天然主动免疫——感染。人工主动免疫——疫苗接种。被动免疫——动物机体免从母体获得特异性抗体或经人工给予免疫血清，从而获得对某种病原微生物特异性抵抗力。天然被动免疫——母源抗体（胎盘、初乳、卵黄）。人工被动免疫——抗血清或卵黄抗体接种。疫苗

Vaccine影响疫苗免疫效果的因素遗传因素营养状况环境因素疫苗质量病原的血清型与变异疾病的影响母源抗体病原微生物之间的干扰作用可用于人工主动免疫的免疫原是A、佐剂B、类毒素C、内毒素D、外毒素E、抗毒素规模化鸡场禽流感灭活疫苗免疫首选途径是A、滴鼻B、点眼C、饮水D、刺种E、注射新生动物通过母源抗体而获得对某种病原的免疫力属于A、先天性免疫B、天然被动免疫C、天然主动免疫D、人工被动免疫E、人工主动免疫从细菌或病毒中提取蛋白成分制备的疫苗属于A、重组疫苗B、弱毒活疫苗C、基因缺失苗D、亚单位疫苗E、合成肽疫苗传染病病愈后获得的对这种疾病的抵抗力为A.人工主动免疫B.人工被动免疫C.天然主动免疫 D.天然被动免疫E.非特异性免疫126. 常用于制备灭活疫苗的化学药物是A.乙醇B.甲醛C.乙醚D.3%盐酸 E.50%甘油生理盐水第八节免疫学技术利用免疫反应的特异性原理，建立各种检测与分析技术，以及建立这些技术的各种制备方法。免疫学技术免疫检测技术/免疫血清学技术细胞免疫技术免疫制备技术主讲教师：郑先哲免疫血清学技术免疫血清学技术凝聚性反应标记抗体技术凝集试验沉淀试验补体参与的反应中和反应免疫印迹技术免疫荧光抗体技术免疫酶标记技术放射免疫测定化学发光标记技术抗原与相应抗体结合形成复合物，在有电解质存在下，复合物相互凝聚形成肉眼可见的凝聚小块或沉淀物，根据是否产生凝集现象来判断相应抗体或抗原，称为凝聚性试验。一、凝聚性反应1、凝集试验细菌、红细胞等颗粒性抗原，或吸附在红细胞、乳胶颗粒性载体表面的可溶性抗原，与相应抗体结合，在有适当电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的凝集团块，称为凝集试验。一、凝聚性反应凝集试验直接凝集试验间接凝集试验协同凝集试验一、凝聚性反应直接凝集试验颗粒性抗原与相应抗体直接结合并出现凝集现象的试验成为直接凝集现象。玻片法可做定性试验；试管法可做定量试验。间接凝集试验将可溶性抗原（或抗体）先吸附于一种与免疫无关的、一定大小的不溶性颗粒（统称为载体颗粒）的表面，然后与相应抗体（或抗原）作用，在有电解质存在的适宜条件下，所出现的特异性凝集反应称为间接凝集反应。敏感性由于直接凝集试验，但特异性较差。协同凝集试验葡萄球菌A蛋白（SPA）能与多种哺乳动物IgG分子的Fc片段结合。SPA与IgG结合后，后者的Fab片段暴露于外，并保持抗体活性。覆盖有特异性抗体的金黄色葡萄球菌与相应抗原结合时，就可产生凝集反应，该方法称为协同凝集试验。2、沉淀试验可溶性抗原（如细菌外毒素、内毒素、菌体裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、组织浸出液等）与相应的抗体结合，在适量电解质存在下，形成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀试验。一、凝聚性反应沉淀试验环状沉淀试验琼脂凝胶扩散试验免疫电泳技术一、凝聚性反应双向双扩散双向单扩散免疫电泳对流免疫电泳火箭免疫电泳环状沉淀试验在小口径试管内先加入已知抗血清，然后缓慢沿管壁加入待检抗原于血清表面，使之成为分界清晰的两层，作用数分钟后，观察两层液面交界处是否出现白色环状沉淀，从而判定相应的抗原或抗体。琼脂凝胶扩散试验利用可溶性抗原和抗体在半固体凝胶中进行反应，当抗原抗体分子相遇，并达到适当比例时，就会相互结合、聚集，出现白色沉淀线，从而判定相应的抗体和抗原。琼脂凝胶扩散试验双向双扩散：抗原抗体在琼脂凝胶内相向扩散，在两孔间比例最合适的位置上出现沉淀带，如抗原抗体的浓度基本平衡时，此沉淀带的位置主要决定于两者的扩散系数。但如抗原过多，则沉淀带向抗体孔增厚或偏移，反之亦然。琼脂凝胶扩散试验双向单扩散：在含有特异抗体的琼脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合，即形成白色沉淀环，其直径或面积与抗原浓度呈正相关。同时用标准抗原制成标准曲线，即可用以定量检测未知标本的抗原浓度。免疫电泳技术免疫电泳技术是凝胶扩散试验与电泳技术相结合的免疫检测技术，在抗原抗体凝胶扩散的同时，加入电泳的电场作用，使抗体或抗原在凝胶中的扩散移动速度加快，缩短了试验时间；同时限制了扩散移动的方向，使集中朝电泳的方向扩散移动，增加了试验的敏感性。免疫电泳技术免疫电泳：先将抗原加到琼脂板的小孔内进行电泳，然后在琼脂板中央挖一横槽，加入已知相应的免疫血清，两者经一定时间相互扩散后，就会在抗原、抗体比例最适处形成沉淀弧。根据沉淀弧的数量、位置和外形，即可分析样品中所含成分。免疫电泳技术对流免疫电泳：在琼脂板上,使抗原和抗体在电场作用下定向移动,当抗原抗体相遇且二者浓度比例合适时,即可出现白色沉淀线。免疫电泳技术火箭免疫电泳：电泳时，含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动，而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时，形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉淀峰，峰的高度与样品中的抗原浓度呈正相关。病毒可刺激机体产生中和抗体，中和抗体与病毒结合后使病毒失去吸附细胞的能力，从而丧失感染力，病毒与其特异性中和抗体相遇之后发生的作用，类似于化学反应中的相应酸碱相遇之后发生的中和反应，所以这种作用称为中合作用。二、中和反应中和试验是以测定病毒的感染力为基础，以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力。中和试验常用的有两种方法：一种是固定病毒量与等量系列倍比稀释的血清混合，另一种是固定血清用量与等量系列对数稀释(即十倍递次稀释)的病毒混合。二、中和反应利用补体能与抗原-抗体复合物结合的性质，建立检测抗原或抗体的免疫学试验，即所谓补体参与的检测技术。一类是补体与细胞的免疫复合物结合后，直接引起溶细胞的可见反应；另一类是补体与抗原-抗体复合物结合后不引起可见反应，但可用指示系统来测定补体是否已被结合，从而间接地检测反应系统是否存在抗原-抗体复合物。三、补体参与的反应补体参与的检测技术补体结合试验免疫黏附血凝试验被动红细胞溶血试验三、补体参与的反应补体依赖性细胞毒试验单向辐射红细胞溶解试验补体结合试验利用抗原抗体复合物同补体结合，把含有已知浓度的补体反应液中的补体消耗掉使浓度减低的现象，以检出抗原或抗体的试验，为高敏度检出方法之一，特别是根据抗原物质的特性，抗原抗体反应不能用沉淀反应或凝集反应观察时也可以利用此法。该试验包括两个反应系统，一为检测系统，即已知抗原（或抗体）、被检抗体（或抗原）以及补体；另一系统为指示系统，包括绵羊红细胞溶血素和补体。被动红细胞溶解试验将已知抗原吸附到红细胞上，在有相应抗体及补体存在时，出现红细胞溶解，该方法称为被动红细胞溶解试验。该试验比间接血凝试验更敏感。标记抗体技术是将已知抗体标记上易显示的物质，通过检测标记物来反应抗原抗体反应的情况，从而间接地测出被检抗原的存在与否或量的多少。免疫标记技术的优点：特异性强、敏感度高、检测速度快、能定性和定量甚至定位、且易于观察。四、标记抗体技术标记抗体技术免疫荧光抗体技术免疫酶标记技术放射免疫测定化学发光标记技术四、标记抗体技术荧光抗体技术、放射免疫测定法和酶免疫测定法，通常被称为三大标记技术。金免疫技术常用的免疫标记物质类别标记物用途荧光素FITC、RB200、TRITC镧系元素螯合物免疫组化、免疫分析测定放射性核素3H、14C、32P、57Gr、125I、131I免疫分析测定酶HRP、AP免疫组化、免疫分析测定化学发光物Luminol、lucigenin免疫分析测定金属颗粒胶体金、铁蛋白免疫组化、免疫分析测定四、标记抗体技术免疫荧光抗体技术荧光抗体技术的基本原理是，将合适的荧光素，以化学方法与特异抗体共价键牢固结合，此结合荧光的抗体，不仅保留原有的特异反应，而且显示荧光。除可用荧光显微镜对结果进行观察，还可将荧光抗体技术与激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等设备配合使用。四、标记抗体技术免疫荧光抗体技术直接法：用特异荧光抗体直接滴加于待检抗原标本上，由于标记抗体与抗原发生特异结合，使之呈荧光，根据荧光分布和形态确定抗原性和部位。炭疽杆菌24h培养物直接荧光抗体检测免疫荧光抗体技术间接法：间接法可用于检测抗原和抗体。抗原或标本加上抗体或标本（第一抗体）混合后，加荧光抗体（第二抗体）。在荧光显微镜下检测荧光分布。本法灵敏度高，可对多种抗原进行试验。免疫荧光抗体技术双标记法：采用不同荧光标记物分别标记不同的抗体，进行同一标本的荧光染色，若有相应的两种抗原存在便同时见到两种或多种荧光色泽。免疫荧光抗体技术流式细胞术：是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点。免疫酶标记技术酶标记抗体技术是根据抗原抗体反应的特异性和酶催化反应的高敏感性而建立起来的检测技术。四、标记抗体技术免疫酶标记技术酶联免疫吸附试验(ELISA)：将