高考生物6年高考璞题精解精析13生物技术实践

一、选择题

1.（2012年高考全国卷5）关于细菌的叙述中，正确的是

A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源

B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落

C.细菌大量培养过程中，芽抱形成于细菌生长的调整期

D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选

【答案】D

【解析】自养型细菌可以利用无机碳源，异养型细菌只能利用有机碳源，A错误.分事

细菌并获得单菌落需要固体培养基，B错误.芽泡是细菌为适应不利的环境而产生的休眠体，

而调整期资源丰富，不会产生芽胞，C错误.金黄色葡萄球菌有耐高浓度盐的特点，D正确,

【考点定位评题主要考查微生物培养和分离的相关知识，考查学生的分析和理解能力，

难度中等.需要学生在平时识记常见微生物的生活特征和生活史，理解几种常见的培养基的

一般作用.2

.（2012江苏高考21）下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是（）

A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长

B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸

C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小

D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时、底层和近瓶口处需加大用盐量

【答案】ABC

【解析】在果酒发酵后期，由于瓶中的营养物质瀛少，单位时间内产生的CC：的量减少，

所以拧开瓶盖的间隔时间可以延长，A正确；在糖源、氧气充足的条件下，酯酸菌可将葡萄

汁中的糖分解成酯酸，B正确；果酒发薛过程中，营养物质消耗，并且有水的生成，密度会

逐渐减小，C正确；将长满毛雷的豆腐装瓶腌制时，近瓶口表面的盐要铺厚一些，但底层不

需要大量用盐，D错误.

【考点定位】本题考查发酵食品加工的基本方法这一知识点，涉及果酒、果酯和腐乳制

作过程的原理和方法.属于了解层次.

3.（2012江苏高考18）下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是

A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度

B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝

C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取

D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少

t答案】C

【解析】洗涤剂能够瓦解细胞膜，但不能噌加DNA的溶解度，A错；将DNA丝状物放

入二忝胺试剂中沸水浴中变蓝，不需要冷却，B错；常温下菜花勺浆中有些酶类可破坏DNA,

而影晌DNA的提取，C正确；用玻棒缓慢搅拌港液并不影响DNA的含量，而在粗提取时，

缓慢撑拌有利于DNA附着，。错

【考点定位】本题主要是对实验内容的考查，主要是涉及“DNA粗提取与鉴定实验这

一实嗡中的原理、方法和操作步骤等内容.属于实晚考查中比较基础的内容.

4.（2012江苏高考17）下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是

A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小

B.作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药

C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用

D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCk和杂菌

【答案】C

【解析】化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影

响酶的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，8正确；尿糖试纸由于使用后不能将

反应物和酶分开，而不能再次使用，C错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗

去CaCI；和表面的杂菌，D正确

【考点定位】本题考查酶的应用，涉及固定化酶中的原理、操作和应用等知识.属于了

解层次.

5.（2012北京高考5）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大

的一项是

A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中

B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上

C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上

D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上

【答案】C

【解析】植物组织培养中的外植体必须在严格的无菌环境中进行培养，而且操作的各环

节都要注意严格火苗，必须尢菌操作，c对；葡萄酒的制作原理是利用酵母菌尢氧发酵时产

生酒精，在无氧条件下，大部分微生物都不能生存，随着发酵的进行，酒精度噌大，也有杀

菌的作用；而制作腐乳时，主要是将毛霉等微生物接种在豆腐上，此过程的加盐、加卤汤等

操作均有一定的杀菌作用；选择培养基只能允许目的菌生长，会抑制其他杂菌生长，因此不

是严格无菌操作时A、小。选项的情况下比C选项的受影响要小.

【考点定位】本题考查对传统发酵技术的应用、微生物的培养和植物培养技术中无菌操

作的掌握.重点要求考生熟悉相应操作过程中的注意事项，这种类型的题目考查的内容相时

固定，重点放在细节，难度中等。

二、非选择题

6.（2012重庆高考30—11）11.乙醉可部分替代石油燃料，利于纤维素酶、酵母菌等可

将纤维素转化成乙醇、耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解，从而有利于酵母菌发酵

产生乙醇。

（1）某研究小组将产纤维素酶的菌株，通过诱变和高温筛选获得新菌株，为探究新菌株

所产纤维素能能否耐受80C高温，进行了以下实验。

试管1试管2

第•步加入适量缓冲液加入等量纤维素酶溶液（缓冲液配制）

第二步30min

第三步加入—

第四步60℃水浴保温lOmin

第五步加入—

第六步沸水浴中加热2min,观察实验现象

结果与结论：①若，则表明该纤维素酶能耐受80℃高温;

②若，则表明该纤维素酶不能耐受80C高温；

（2）酵母菌发酵产生的乙醇属于（填“初级”或“次级”）代谢

产物。

【答案】n⑴8CC水浴保温适量纤维素液斐林试剂或班氏糖定性试剂

①试管1内呈蓝色，试管2内有传红色沉淀产生

②试管1和2内均呈蓝色:来源：中，教悯z*z*s*：ep]

⑵次级

【解析】II⑴根据实验是探究纤维素酶能否耐受8CC高温，所以应先对纤维素酶用8CC

高温处理，常用方法为水浴80C保温.对酶进行高温处理后，然后再加入适量的纤维素的

作用的底物一一纤维素，利用纤维素酶能使纤维素水解为还原糖，来检验经高温处理的酶是

否还有活性，还原糖可用斐林试剂或鹿氏糖定性试剂检测.

①如果纤维素酶能耐受8CC高温，则经8CC高温处理后，依然能使纤维素水解，经斐

林试剂检测能出现使红色沉淀

②反之，不能出现传红色沉淀.

⑵乙醇对酵母菌无明显生理功能，并非是酵母菌生长和鳖殖所必需的物质，这样的物质

为次生代谢产物.

【考点定位】此题考查光合作用和书上第一个实嗡的变式买晚，联系的知识点较多，要

求学生有一定的数据函数图冢处理分析能力，难度较大.光合作用在教学中仍为教学重点.

教学中应加以重视.

7.（2012山东高考34）【生物一生物技术实践】

辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。

--------»囱_______,,______,

[H3—愈伤组织I，■^康F—

I细胞分阔

弹由胞］—―隔产细胞系|画论培界物］

（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的和过程。

（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是O培养基中的生长素和细胞

分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭

菌时，应采用的灭菌方法是。

（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是。用酶解法将愈伤组织分离成

单细胞时，常用的酶是和纤维素酶。

（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是。

【答案】（1）脱分化（或去分化）；再分化

（2）琼脂低高压蒸汽灭菌

（3）70%果胶酶

（G防止有机溶剂的挥发

【解析】U）由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程称为脱分化，脱分化产

生的愈伤组织继续进行培养，又可重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化.

（2）培养基中常用的瀚固剂是琼脂.同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比

例登响植物细胞的发育方向.生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；反之

则利于根的分化.培养基应用高压蒸汽灭菌锅灭菌.

（3）外植体消毒所用酒精的体积分数是70大曲解法将愈伤组织分离成单细胞所用的

酶是果胶酶和纤维素的.

（G用萃取法提取植物有效成分时，应在加热瓶口安装冷凝回流装置，目的是防止加

热时有机溶剂挥发.

【试题评价】本题以辣椒素为切入点，考查了植物组织培养的过程，组织培养培养基的

成分，植物激素对组织培养过程的随响，对外植体消毒的方法及萃取过程的注意事项等内容，

基础性强，难度不大.8

.（2012广东高考29）食品种类多，酸碱度范围广•生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范

围较广的蛋白酶，查阅相关文献，得知：

（1）pH对不同蛋白酶的活力影响有差异。据图12可知，更适宜作为食品添加

剂，理由是。蛋白酶的活力可用的量来表示。

图12

（2）该蛋白酸的提取工艺流程如下:

加牌保扶剂加65%乙晶调提取液理

,,,,..(0.10-ol/L)（5。〜9.0）.沉淀物—训笠活力

•4P组织匀浆f上L清液----------------

（粗酹置荆）（单位：门

兴趣小组分别对酶保护剂浓度、提取液pH进行了探究实验。结果显示，酶保护剂浓度在

0.02〜0.06mol/L范围内，酶活力较高；提取液pH在6.0〜8.0范围内，酶活力较高。他们认

为，要进一步提高粗酶制剂的酶活力，以达到最佳提取效果，还需对酶保护剂浓度和提取液

pH进行优化，并确定以此为探究课题。请拟定该课题名称，设计实验结果记录表。

【答案】（1）木瓜蛋白酶由图可以看出，木瓜蛋白的的活性不随pH的变化而变化

单位时间内底物消耗（产物产生）

（2）课题：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH

单位时间内底提取液的pH

物的消耗量6.06.2E-6.66.87.0r27.47.67.88.0

0.02

酶保

0.03

护剂

0.04

的浓

0.05

度

0.06

【解析】（:）审题结合图形和文字，在题目中已经提供了信息•食品种类多，酸碱度范

围厂'，所以选择的食品添加剂应该有较广的酸碱适应范围.从图形中，可以看出木瓜蛋白

酶的适应范围最广，所以可以选作食品添加剂.酶的活力，一般用的催化的底物消耗量或者

产物生成量来表示.

（2）实验设计，应该明确实嗑目的：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适p卜值，

所以可以将酶保护剂的浓度和提取液的p卜值作为自变量，因变量为单位时间内底物的消耗

JSLo

【考点定位】本题以蛋白酶在食品方面的应用为背景，考查了蛋白酶的应用、活力测定、

蛋白酶的提取流程等内容和学生绘制表格的能力，难度不大.9

.（2012高考全国新课标卷39）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影

响，某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制成四种培养基（见下表），火菌后分别

接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计

再生从芽外植体的比率（m）,以及再生从芽外植体上的从芽平均数（n）,结果如下表。

浓度mg]?】

培养基编号m%n个

6-BAIAA

1076.73.1

20.177.46.1

0.5

30.266.75.3

40.560.05.0

回答下列问题：

（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养

基中，6-BA属于类生长调节剂。

（2）在该实验中，自变量是，因变量是，自变量的取值范围是。

（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。

（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入（填“6-BA”或“IAA”）。

【答案】（I大量元素微量元素细胞分裂素

（2）IAA的浓度菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数0-0.5mg.L-

（3）1（4）6-BA

【解析】（：）根据植物的需求量，元素可以分为大量元素和微量元素，6-BA属于细胞

分裂素类的生长调节剂.

（2）根据实嗡目的和实境中的步骤中的数据，可以看出的浓度是自变量，菊花再

生丛芽外植体的比率和外植体上的M芽平均数是因变量；由图表数据可以看出NA的浓度范

围是0—0.5mg.L--.

（3）再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数，所以最少的是：号

培养基.

U）诱导试管苗生根需要生长素用量和细胞分裂素用量的比值比较高，所以培养基中

不需要加e-BA.

【试题评价阵题主要是对植物组培知识的考查，提问涉及必修一和必修三的一些知识，

再加上以实验分析的形式考察中学生物实嗡的基础知识，综合性强.难度较小.1

0.（2012海南卷30）【生物——选修I：生物技术实践】（15分）

回答下列关于腐乳制作的问题：

（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主

要作用的微生物是,其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为和—

;其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和o

（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制生长。

（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作

用外，还能使腐乳具有独特的。

【答案】（15分j

（：）毛毒肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（每空2分，共：2分）

（2）微生物（2分）

（3）风味（：分，其他合理答案也给分）

【解析】

（1）酵过程中起作用的微生物有多种，如青雀、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作

用的是毛毒，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能

够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸.

（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物

（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或

香味）.

【考点定位】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均

为课本上理解识记内容，难度不大.

11.（2012上海卷四）回答下列关于微生物和酶的问题。（10分）

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高

温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。

44.①过程称为,②过程是为了。

45.I号培养基称为（按功能分）；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入

另一种重要的营养成分_____o

A.琼脂B.葡萄糖C.硝酸镂D.碳酸氢钠

46.一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了o

在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线①

表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,

再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，山此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图16中

的曲线②。

S16

47.根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是。

A.40℃—50rB.50℃—60℃C.60℃—70℃D.70℃-80℃

48.据图判断下列叙述错误的是。

A.该酶只能在最佳温度范围内测出活性

B.曲线②35℃数据点是在80℃时测得的

C.曲线①表明80C是该酶活性最高的温度

D.曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降

【答案】

■H.稀释单个菌落的啼选（或啼选）

先选择培养基C

46.杀死培养基中的细菌芽泡

47.C

4S.A

【解析】

44由图中显示，在①前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为播释，②过程后使用

划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分离纯化嗜热菌.

4、由图示可知表示过程是嗜热菌分离纯化的过程，I号培养基为选择培养基.在培养

微生物的培养基中，碳源和氮源必不可少，所以除淀粉外还应加入硝酸钱.

46细菌芽胞是在极端环境中产生的，具有耐高温等特点，只有用高温高压，才能杀死

细菌芽泡，防止培养基污染.

■R在使用该酶时，应保证活性较高、酶的热稳定性较好的温度范围。由图中数据可知,

符合要求。

4S.酶活性受温度影响，在不同的温度下，都可以测定酶的活性，A错误；由曲线①可知，

该酶的最适温度是SCC,曲线②中的数据是将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶

活性最高的温度下测其残余酶活性，对于B选项而言是将该函在3iC下上时间保存，然后

在下测定该酶活性，B、C正确.曲线②显示，甑的热稳定性从MC开始不断下降，

在后，急剧下降，D正确.

【考点定位】本题综合考查了微生物的培养、分离、纯化的方法步骤，培养基的成分，

常用的灭菌方法及其适用情况，酶发挥作用的适宜温度及温度与酶活性的关系等嫩荣，同时

考查了学生的识图能力和分析问题的能力，难度不大.

[2011年高考试题】

1、（2011江苏卷）下列果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是

A.腐乳制作所需要的适宜温度最高

B.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵

C.使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌

D.使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA

答案：D

解析：果酒制作酵母菌繁殖适宜温度及度左右，酒精发酵时适宜温度在1825度，果醋

制作适宜温度32-35度，腐乳制作适宜温度15度、度，所以A选项错误；醍酸菌为好

氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，所以2选项错误；果酒、果醋和

腐乳制作使用的菌种分别是是酵母菌、醍酸菌、毛雷等.所以C选项错误；D选项正确.

2.（2011江苏卷）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是

A.酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶

B.透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化

C.棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤

D.多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心

答案：A

解析：曲解法去除细胞壁，吸水涨破法使细胞破裂释放出胞内酶，所以A选项正确；酶

的分离和纯化不可以用酸解法，所以B选项错误；纤维素酣本身不能去除衣物上的污垢，它

的作用主要是去除棉纺织品表面的浮毛以及表面附着的沉积性顽渍，同时可以使纤维的结构

变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去

污效果，所以C选项是错误的；蛋白酶在胃液中发挥作用，应在多酶片的最外层，所以D

选项错误.

3.（2011江苏卷）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是

A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞

B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株

C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子

0.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得

答案：D

解析：愈伤组织是处于未分化的状态，所以没有特定结构和功能，所以A选项错误；二倍

体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的植株是单倍体，高度不育，所以B选项错误：人

工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜

包装得到的种子，所以C选项错误；可通过添加适量NaCl的培养基培养淘汰不耐盐个体，

筛选出耐盐个体，所以D选项正确。

4、（2011江苏卷）在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是

A.用蒸储水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,滤去析出物

B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质

C.将丝状物溶解在2moi/NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色

0.用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同

答案：B

解析：用蒸圈水将NaCl溶液浓度调至二二二mcl；L,析出物就是不能淳去，所以A选

项错误；2选项正确；将丝状物溶解在2mcl/WCl溶液中，加入二笨胺试剂后需水浴加热

才呈蓝色，所以C选项错误；鸡血细胞可直接加入蒸修水使细胞破裂释放DNA,而菜花

做材料时需加入洗涤剂溶解细胞膜，使DNA释放，所以D选项错误.

5.（2011广东卷）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不色砸的是

A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂

B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少

C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢

答案C:

解析：本题考查血红蛋白的提取，属于对识记、理解层次的考查.在凝胶色谱柱中，分

子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，分子量小的分子穿过多孔凝胶颗

粒内部，路程长，流动慢，血红蛋白比分子量小的杂蛋白移动快，D错误.A正确，洗涤的

目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化，加入的是生理盐水，缓慢搅拌10ms,低速

短时间离心，重复洗涤三次，直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净.B正确，

哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少.C正确，血红蛋白

是有色蛋白，因此在益胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液（如

果操作都正确能清楚的看到血红蛋白的红色区带均包狭窄、平整随着洗脱液缓慢流出）.

这使得血红蛋白的分离过程非常直观，筒化了操作.

6.（2011山东卷）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的

提取及应用如图所示。

柚皮―►糊状液体―►|柚皮精油、

—）抑菌试验

乳酸菌A]——>|培养液|——►|乳酸菌素|/

（1）柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过

—除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种。对新配制的培养基灭菌时所

用的设备是。实验前需对超净工作台进行处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供。电泳法纯化乳酸菌素时，若

分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度一

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测

定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

答案：（1）压榨过港（2）稀释涂布平板法高压蒸汽灭菌锅紫外线消毒

（3）碳源和氮源越慢（4）大小

解析:本题考查选修1相关知识，对于柚皮精油的提取一般用压榨法，再采用过滤去除

基因固体杂质；对于筛选菌种一般用固体选择培养基，通常接种方法是平板画线法和稀释涂

布平板法，培养基灭菌通常用高压蒸气灭菌，对于工作台一般消毒的方法处理，通常用紫外

线消毒，尿素为微生物提供氮源和碳源，电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋

白质，则其分子量越大，电泳速度越慢；抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑

菌物质为中心的透明圈.可通过测定透明圈的大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果

7.（2011新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某

同学欲从含原油的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体

培养基土，从功能上讲，该培养基属于培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和o

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能

力。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、

和-无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进

行，以避免周围环境中微生物的污染。

答案原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（力强

（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰

解析：本题综合考查了微生物的培养、筛选等相关知识。（£）选择培养基是在培养基中加

入某一化学物质或改变某一理化性质，使某一微生物正常生长，而其他微生物则

被杀灭或抑制,从而选出所需要的微生物;本小题就是利用该细菌能高效降解原油的特性，

用选择培养基将其筛选出来的.（2）纯化菌种的方法包括平板划线法和稀释涂布平板法.

（3）（4）见答案.

【2010年高考试题】

1.（2010江苏卷）25.右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵

母细胞进行酒精发酵的示意图.下列叙述正确的是

1/一注酎器

盆离展的与

前理通配合液

同定化M理

A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液-

B.图1中X溶液为CaC，2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠

C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触

D.图1中制备的凝胶珠用蒸镭水洗涤后再转移到图2装置中

【答案】BCD

【解析】本题考查了固定化细胞技术的操作过程.熔化的海藻酸钠应冷却后与活化的酵母

细胞混合，A项错误；图:中氯化钙溶液可使海藻酸钠形成瀚胶珠，B项正确；图二中要

进行搅拌以使培养液与细胞充分接触，C项正确；图1中制备的凝胶珠要以过洗涤再移到

图2装置中，D项正确.

2.(2010新课标)37.【生物——选修模块1：生物技术实践】(15分)

下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：

(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸储法提取，其理由是玫瑰精油具有的性质。蒸储时

收集的蒸储液(是、不是)纯的玫瑰精油，原因是。

(2)当蒸镭瓶中的水和原料量一定时，蒸镭过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸储时

间和。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸镭时间的变化趋势是。

(3)如果蒸储过程中不进行冷却，则精油提取量会,原因是。

(4)密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度的地方，目的是。

(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油

时采摘花的最合适时间为天左右。

上花蕾期+卜开放期+衰老期T

时间/d

（6）从薄荷叶中提取薄荷油时（能、不能）采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，

理由是。

【答案】⑴易挥发、难溶于水、化学性质稳定，不是；攻瑰精油随水蒸气一起蒸溜出来，

所得到的是油水混合物；3）蒸圈温度在一定时间内提取量随蒸留时间的延长而增加，

一定时间后提取量不再噌加；（3）下降部分精油会随水蒸气挥发而流失；（;）较低减

少挥发；（5）6；（6）能薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似

【解析】植物芳香油的提取方法有蒸僵、压榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原

料的特点来决定.而水蒸气蒸遛法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气

将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油

层和水层.政魂精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸僵，

所以次用水蒸气蒸播法提取.

3.（2010新课标）38.［生物——选修模块3：现代生物科技专题］（15分）

请回答：

（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的，繁

殖种苗的速度o离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植

株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部«

（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作舍上进行，其原因是避免—的污染。

（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗—，而与配比

适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需尊使用的

生长调节剂是（脱落酸、2,4-D）。

（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上段时间后，单株鲜重和光合作用

强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势

是，单株鲜重的变化趋势是。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试

管苗光合作用产生的有机物的量__________（能、不能）满足自身最佳生长的需要。

m卜y；光合作用嘴度博

能单株蚌重g

。123°

蔗精浓度/%

（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应（降低,

增加）培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。

t答案】⑴遗传性、快、遗传信息；（2）微生物；（力下生根、细胞分裂素、;；-D；（G

逐渐植小先噌加后下降、不能；（5）降低

【解析1®物组织培养技术是利用植物细胞全能性的原理进行的，是植物细胞工程的基础.

在操作过程应注意无菌操作,避免杂菌污染，因为培养过程中使用的培养基营养物质丰富，

适宜浓度的生长素可以诱导试管苗生根，而如果要促进愈伤组织形成芽，则需要与细胞分

裂素配比，促进愈伤组织产生和生长，应使用Z4Q.4

（2010北京卷）1.在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是

A.让发酵装置接受光照B.给发酵装置适时排气

C.向发酵装置通入空气D.酵母菌装置放在45c处

【答案】B

【解析】在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装苴不需要接受光照，发酵时也不

能通入空气，一般将发酵温度控制在〜25c.

5.（2010山东高考理综）34.【生物一生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源,

其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂

肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

［工，也MJ

油料作物蚣T而犷）

脂肪邂楞丽

用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_、_____方法从油料作物中提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供

培养基灭菌采用的最适方法是—法。

（3）测定培养液中微生物数量，可选用法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶

通常需要检测,以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用技术

使脂肪酶能够重复使用。

（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的技术。

【答案】（1）压榨；萃取（注：两空顺序无先后）

（2）碳源高压蒸汽灭菌

（3）显微镜直接计数酣活性（或：酶活力）固定化酶（或：固定化细胞）

（-）PCR（或：多聚解式反应，聚合酶睫式反应）

【解析】3）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸留法提取，应用压榨法或萃取法提取.

（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源.培养基适合用高压蒸汽灭菌发进

行灭菌.（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数.分离出的脂肪酶要对其活性进

行检测，以确定其实用价值.可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶.（二）利用PCR技术

可以扩增基因.

7.（2010广东卷）25.小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验

（见图10）,恰当的做法是

A.加入适量的酵母菌

B.一直打开阀b通气

C.一直关紧阀a,偶尔打开阀b几秒钟

D.把发酵装置放到4c冰箱中进行试验

【解析】本题主要考查学生的理解能力.果酒的制备过程中先让酵母菌在有氧条件下迅速

扩噌，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精.

【答案】AC

8.（2010江苏卷）7.右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是

A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下

B.过程①和都③只发生在酵母细胞的线

粒体中

C.过程③和④都需要氧气的参与

D.过程①~④所需的最适温度基本相同

【答案】c

【解析】本题考查果酒果醛制作过程的反应条件等的区别.①过程有氧无氧条件均可以发

生，②过程只能发生在无氧条件下，A项错误.①在酵母菌细胞质基质中进行，③在酵母

菌线粒体内进行，2项错误.③为有氧呼吸第二、三阶段，需要氧气参与，④需要氧气参

与，C项错误.过程①、②、③为酵母菌的呼吸作用，最适宜温度约为：丁C左右；④的

最适宜温度为北一35>C,D项错误.9,

（2010浙江自选模块）题号：17科目：生物

“生物技术实践”模块（10分）

请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，每空1分，共10分。某

同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。

（1）图中用KM“。」的溶液浸泡苹果的目的是①。黑曲霉提取液中含

有的_____②一可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过一③

一方式将酶固定化，酶被固定在用蒸储水洗涤固定化柱是为了除去④

_____________________O

（2）实验中，操作流程A和B的先后顺序为⑤o在苹果汁澄清过程中，

应关闭的流速调节阀是⑥。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有

果胶，可取一定量的果汁与等量的⑦混合，如果出现⑧—

现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调—⑨o试验

后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验,

说明固定化前可被一⑩使用。“生物技术实践”模块（10分）

题号：17科目：生物

【答案】（D①消毒②果胶酶③吸附④未被固定的酶等

（2）⑤A3⑥阀1⑦乙防⑧浑浊（沉淀）⑨慢

（3）⑩重复

【解析】本题考查苹果汁制作过程的反应条件注意事项，操作过程中需注意的细节.

需要学生对课本知识熟悉，培养学生学以致用的学习态度，从现在生物学在生活中的应用

区激发学生的学习兴趣.

在制作工艺中必须对原材料消毒，这样才能保证后续试验的成功.KM，?。,是强氧化剂,

可以起到对苹果的消毒作用.

10.（2010海南卷）25.（18分）］选修模块1：生物技术实践］

葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：

注：着发酹鱼的古催代为允气管

右18管为博气管

（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是。

（2）该微生物通过无氧呼吸可分解,产生的终产物是和。

（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件

下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同

学的操作有误，其中甲同学的错误是，导致发酵中出现的主要异常现象是一

.丙同学的错误是,导致发酵中出现的主要异常现象是_

。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是_

（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开,

该操作错误是______________

【答案】25.（18分）

（1）酵母菌（2分）

⑵葡萄糖乙醵CC；（每空1分，共3分）

（3）未夹住发酵瓶的充气管（2分）发酵液从充气管流出，发酵液变酸（二分瓶中

发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口（2分）

葡萄醋（或果醋）（2分）葡萄酒（或果酒）（;分）葡萄酒（或果酒）（二分）

（4）未及时排气（2分）

[2009年高考试题】

1.（2009理综1卷）下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是

A发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸

日发酵时常采用的培养基为液体天然培养基

从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产

D当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量

【答案】C

2.（2009宁夏）.【生物——选修1生物技术实践】（15分）

（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑、和渗透压等条

件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、、等优点，因

此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行（消

毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和「静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其

原因是紫外线能使蛋白质变性，还能。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除

应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检

测方法是。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢

弃，以防止培养物的扩散。

答案：（1）温度酸碱度易培养生活周期短

（2）灭菌消毒损伤DNA的结构

（3）比例合适

（4）鉴定，或分类1

（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生

（6）灭菌3.

（10分）（2009全国理综2）

利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化

效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。

（1）实验步骤：

①配置_.（固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为_。

②将接入已灭菌的培养基平板上。

③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是。

④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现

现象的菌落即为初选菌落，经分离、纯化后即可达到实验目的。

（2）若已得到二株变异菌株I和II,其淀粉转化率较高，经测定菌株1淀粉酶的催化活性

高，菌株H的淀粉酶蛋白含量高，经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或

非编码区，可推测出菌株I的突变发生在________区，菌株II的突变发生在

区。

答案：（1）①固体、玉米淀粉；②野生菌株；③（诱发野生菌株发生基因突变）对野生菌

株进行诱变；④（透明圈）浅色范围大；（2）编码区、非编码区

二（20。9安徽）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实嗡操作的叙述，其中错误的是

A用蒸僵水配制牛肉营蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B取10•、:炉、倍的土壤稀释液和无菌水各。二ml,分别涂布于各组平板上

C.将实嘛组和对照组平板倒置，37：C恒温培养24j8小时

D.确定对照组无菌后，选择菌落数在3。0以上的实验组平板进行计数

答案：D

5.（2009重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是

A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是•个环状DNA分子

B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源

C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时.应及时添加核酸等生长因子

D处于对数期的大肠杆菌.常作为生产用的菌种和科研的材料

答案：C

6.（2009山东）（8分）（生物一生物技术实践）

人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂甘。利用细胞培养技术生产人参皂普的

大致流程如下：

人参根切块|卫^]愈伤纲织|必细胞或小细胞用闻些|细胞培弄物

收集

培养物干粉

[»«

I人参皂.|

请回答：

（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行。

接种前，要对人参根进行。

（2）用于离体培养的根切块，叫做。培养几天后发现少数培养基被污

染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于

污染。

（3）用少量酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行

悬浮培养，可有效提高人参皂昔合成量。

（4）人参皂甘易溶于水溶性（亲水性）有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂甘宜选用_

方法，操作时应采用加热。

t答案】G）灭菌消毒

（2）外植体真菌（意菌）细菌

（3）果胶

（i）萃取（浸取）水浴

7.（2009江苏多选）加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去中果皮（橘络），会产生严重污染。

目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物，可以大量

产生所用酶的有

A.生长在麦秋上的黑曲霉B.生长在