TET2与动脉粥样硬化的研究进展(全文)

TET2与动脉粥样硬化的研究进展（全文）动脉粥样硬化（aeo,As）多发生于大、中型动脉，是心脑血管疾病的主要病理学基础。血管内皮细胞是衬于血管内表面的单层细胞，直接与血液接触，感受并响应局部微环境的变化。在生理情况下，血管内皮细胞通过紧密连接排列于血管内表面，一方面通过屏障作用阻滞血液中脂蛋白进入内皮下沉积以及氧化；另一方面通过产生一氧化氮等分子促进血管舒张，维持血管稳态。血管内皮细胞功能障碍是As发生、发展的早期重要环节。近年来，大量研究表明表观遗传调控异常与As的发生、发展过程密切相关。表观遗传调控包括组蛋白修饰、DNA甲基化修饰、非编码RNA调控染色重等调方式，DNA甲基化修饰是最早被发现也是最重要的一种表观遗传方式1999年Newman首次提出DNA甲基化修饰与As相关，后续大量的研究表明DNA甲基化修饰异常早于As病理形态改变并且与As的发生、发展进程密切相关。DNA的甲基化修饰包括DNA甲基化以及DNA的去甲基化为动态可逆的生物学过程DNA甲基化主要是在DNA甲基转移酶的作用下在DNA的CpG胞嘧啶结合一个甲基，从而抑制相关基因的活化和表达；DNA去甲基化则在DNA去甲基化酶催化下进行促进相关基因的活化和表达。2009年，Tahiliani等发现人类Ten－Eleven易位甲基胞嘧啶双加氧酶（TET1）催化－甲基胞嘧啶（5m）转化为－羟甲基胞嘧啶（5hmC），介导DNA的去甲基化过程。TET家族包括TET1、TET2以及TET3三个成员其中TET2下调或缺失参与调控As进程我们的研究发现TET2在As病变中下调，TET2过表达升高高脂饮食apoE－/－小鼠基因组DNA5hmC水平、降低5mC水平降低，抑制As病变；TET2shRNA降低高脂饮食apoE－/－小鼠基因组DNA5hmC水平、升高5mC水平降低As病进为有的质心巨细积和炎症因子大量表达的不稳定斑块。我们课题组的研究表明，TET2可能通过以下几种方式参与对As进程的调控。TET2上调血管内皮细胞CSE/H2S抗As（H2（NO（CO后的第三个气体信号分子广泛涉及各种生理和病理过程在心血管系统中，H2S（CSE产生具有内皮保护功能内源性CSE/H2S系统障碍促As，上调内源性CSE/H2S抗As。我们的研究表明TET2过表达的高脂饮食apoE－/－小鼠As斑块中CSE表达上调，血浆中H2S含量明显增加。细胞学实验表明TET2过表达上调血管内皮细胞CSE/H2S系统并抑制N－活化，下调黏附分子ICAM－1和VCAM－1的表达，并减弱THP－1细胞与氧化低密度脂蛋（d,L的HUVEC的粘附，CSEsiRNA明显削弱TET2对ox－LDL处理的血管内皮细胞保护作用。对其调控机制的研究表明，TET2通过促进CSE基因启动子CpG岛的去调CSE表达，增加H2S胞。TET2通过改善血管内皮细胞自噬抗As自噬是通过溶酶体降解衰老的蛋白质和细胞器以维持细胞内蛋白质和细胞器的质量和代谢，维持细胞稳态，血管内皮细胞自噬障碍与As的发生、发展密切相关。OxLDL以及低剪切应力为As的危险因素ox－LDL以及低剪切应力下调血管内皮细胞的自噬以及TET2的表达。我们发现，TET2shRNA加剧ox－LDL以及低剪切应力处理的内皮细胞自噬受以及自噬流障碍。TET2过表达上调自噬相关基因n1启动子去甲基化水平改善ox－LDL以及低剪切应力处理的内皮细胞自噬受以及自噬流障碍，改善血管内皮细胞功能。－KG）是由异柠檬酸通过氧化脱羧和谷氨酸通过氧化脱氨作用产生的三羧酸循环的中间体，为TET2发挥催化作用的底物分子。我们的研究表明，补充KG的高脂饮食apoE－/－小鼠TET2表达上调As病变减轻炎症因子表达下调斑块内自噬增加在培养的血管内皮细胞中－KG上调TET2表达以及自噬流降低炎症因子表达；2A－KG诱导的内皮细胞自噬和自噬通流并且炎症因子－KG通过上调TET2，增强内皮细胞自噬和自噬流，抑制血管内皮细胞炎症因子的表达，改善血管内皮细胞的功能，抗As。TET2抑制血管内皮细胞焦亡（Pyroptosis速破裂，随后释放细胞内容物以及IL－和IL－18等促炎介质，参与As的发生和发展并且与As斑块的稳定性密切相关微小RNA转录后水平调节靶基因的表达，miR－125a－5p在高脂血症－高血糖条件下表达上调并参与细胞凋亡。我们发现，ox－LDL下调TET2的表达并促血管内皮细胞焦亡TET2过表达抑制ox－LDL诱导的血管内皮细胞线粒体功能障碍以及活性氧产制NF－子IL－β和IL－18的释放TET2为miR－125a－5p的下游调控基因miR－125a－p通过下调TET2增加NF－B活化、激活NLRP3和caspase－1，促血管内皮细胞的焦亡。维生素C通过TET2依赖的方式抑制apo(a)的表达（a（o（a为（a浆L（a浓度与As的发生发展密切相关维生素C缺乏促As并增加小鼠L（a）和ap（ac的抗氧化作用可将铁离子维持在二价状态（Fe2+），从而维持并增强TET2的催化活性。我们的研究结果表明，维生素C上调HepG2细胞中TET2的表达以及ELK1启动子的羟甲基化水平抑制ap（a的表达和分泌ELK1siRNA和Tet2siRNA减弱制维生素对ap（a素C过Tet2依赖性DNA去甲基化下调apo（a）表达。As进程中DNA甲基化异常且TET2在As病变进程中表达下调，我们的研究表明TET2通过上调CS、Beclin1以及ELK1启动子的去甲基化，增加血管内皮细胞H2S的生成、自噬流以及抑制肝细胞ap