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文档简介
实验二植物染色体制片及有丝分裂观察第1页,课件共15页,创作于2023年2月实验目的:学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法;
观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色体行为;第2页,课件共15页,创作于2023年2月预习要求实验目的预习要求学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法;
观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色体行为流程:材料要求,取材方法,实验流程和各操作步骤实施原因发根→预处理→固定→解离→低渗→软化→染色→压片→镜检间期,前期,中期,后期,末期第3页,课件共15页,创作于2023年2月实验原理
植物的生长旺盛的分生组织(如根尖、茎尖、幼叶等)都在进行着有丝分裂。取这些组织为材料,经过固定后迅速杀死细胞,并使细胞内的物质和生活状态得以保持,再经过解离、染色、压片等过程,在显微镜下就可以看到大量处于有丝分裂各个时期的细胞,并进行染色体行为的观察。有丝分裂中期的染色体具有典型的形态特征,并容易计数。为了获得更多的中期染色体装片,可以采用常用的药物处理方法,阻止纺锤体的形成,使细胞分裂停止在中期,便于进行观察。第4页,课件共15页,创作于2023年2月实验材料洋葱、大蒜的鳞茎,玉米、蚕豆的种子等。本实验选用大蒜。实验用品用具:显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。药品:蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品红染液等。第5页,课件共15页,创作于2023年2月实验步骤:1根尖培养:将大蒜瓣放在盛有清水的培养皿(烧杯)中,让根部接触水,在20-25℃光照下培养,待根尖长到1-2cm时,剪下备用。剪取根尖的时间以上午9时左右为好。2
预处理:将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶液中室温下处理3-4h。为什么要限制取材时间?预处理的目的?还有其他方法吗?第6页,课件共15页,创作于2023年2月实验步骤:
3
固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理24h。水洗放入70%乙醇中保存。
4
解离:将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl中,60℃下处理8-10min(可视具体情况而定)。固定的作用?固定剂的组成?对固定剂配制的要求?解离的目的?如何判断解离的效果?其他的解离方法?第7页,课件共15页,创作于2023年2月
5软化:将解离好的根尖冲洗后,放入45%醋酸中软化10min左右。请问解离与软化的目的是什么?
6
染色:切取1-2mm的分生区,用改良苯酚品红染液染色10-20min。为保证染色的充分要注意哪些问题?第8页,课件共15页,创作于2023年2月
7
压片:盖上盖玻片,在酒精灯上烤片。然后固定盖玻片,用铅笔垂直、用力敲击盖片几下,将材料压成一层细胞。
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镜检:先在低倍镜下找到细胞,再换成高倍镜仔细观察有丝分裂过程中染色体的行为。压片时应注意的问题有哪些?请注意比较经过预处理和未经预处理的材料有何不同?第9页,课件共15页,创作于2023年2月实验报告要求:
1说明实验过程中每步的作用是什么?
2绘图表示各时期染色体的行为。
3比较经过预处理和未经预处理的两个装片的不同,为什么会不同?第10页,课件共15页,创作于2023年2月第11页,课件共15页,创作于2023年2月间期前期第12页,课件共15页,创作于2023年2月中期第13页,课件共15页,创作于2023年2月后
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