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文档简介

1.简述单克隆抗体技术的基本原理和步骤。[答案]1)基本原理:通过融合剂将抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞进行融合,获得融合细胞,再利用选择培养基筛选出合适的“脾_瘤”融合细胞,通.过检测其上清中的表达,最终获得既能分泌抗体又能保持细胞体外无单项可获得大量高效价、高纯度的特异性抗体。(2)基本步骤:①抗原纯化与动物免疫②骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备③细胞融合④选择培养⑤阳性杂交瘤克隆的克隆化⑥单克隆抗体的保存和扩增2.请从免疫学检验技术层面简述乙型肝炎病毒感染常用检验项目和检测方法及其临床意义。[答案]HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五项俗称乙肝五项或乙肝两对半。①HBsAg:常用双抗夹心法检测,HBV感染后首先出现HBsAg,是早期诊断的指标,HBsAg转阴并出现抗-HBs是HBV感染治疗的最终目标。②抗-HBs:常用双抗夹心法检测,抗-HBs是HBV保护性抗体的一种,阳性反应见于HBV感染恢复期、既往感染或乙肝疫苗接种后③HBeAg:常用双抗夹心法检测,HBeAg-般仅见于HBsAg阳性者,阳性反应表示HBV传染性较强,患者处于高感染低应答期。④抗-HBe:常用竞争抑制法检测,抗-HBe可长期存在,无保护作用。HBeAg消失伴抗-HBe出现称为HBeAg的血清转换。⑤抗-HBc:抗-HBcIgM常用捕获法检测,是HBV急性感染的早期指标和病毒复制标志。抗-HBclgG常用竞争抑制法检测,是既往感染的标志,现症感染也可出现。3.在生物素亲和素系统中,每个亲和素分子最多可以结合的生物素分子数量(C)A|5B4C|3D|2[答案]B4.IV型超敏反应的常见免疫学检测方法是A皮肤试验.B激发试验C自身抗体检测DPEG比浊试验[答案]A5.请简述流式细胞仪的分析原理和分选原理。[答案]①分析工作原理在荧光染色的待测单细胞悬液加载于进样器系统后,在液流驱动系统作用下,细胞流与鞘液在交汇处形成一-定角度进入流动室,经液流聚焦作用,鞘液裹挟着细胞流高速流动。通过调节液流的压力,使细胞成单排列逐一通过检测区域。激光束在光束形成器调整下垂直照射在细胞流上,细胞.上的荧光标记物被激发出荧光。同时,细胞因大小和胞内颗粒的不同产生不同的散射光。这两种光信号被PMT和PD检测器接收,信号经放大和转换输送给计算机。计算机将数字信号转换、储存和分析。②分选工作原理当细胞液流通过流动室时,流动室耦合的超声压电晶体产生稳定的高频振动,将液流断裂成连续、均匀的含单细胞液滴。根据检测到的散射光和荧光信号,仪器对细胞群体特征进行Ficoll[答案]Ficoll分离液法主要用于分离外周血中的单个核细胞,是一种单次差速密度梯度离心的分离法。聚蔗糖-泛影葡胺是一种较理想的细胞分层液,商品名为Ficoll,分离人外周血淋巴细胞以密度1.077士0.001的分层液最佳。7.亲和力[答案]抗原抗体结合的亲和力是指抗体单价Fab片段与单价抗原表位的结合能力。8.混合淋巴细胞反应[答案]又称混合淋巴细胞培养,当两个无关个体的淋巴细胞在体外混合培养时,可相互刺激,使淋巴细胞向母细胞转化,产生分裂增殖及混合淋巴细胞反应。9.补体的50%溶血试验(CH50)[答案]在一个适当的、稳定的反应体系中,以血清为横坐标,溶血百分率为纵坐标绘图,补体的溶血程度与补体剂量呈一个“S”形曲线,在30%-70%范围内,曲线接近于直线,溶血程度与补体量的变化非常敏感,SRBC溶血程度与补体总活性成正相关,故以50%溶血作为最敏感的判断终点。10.应用免疫学测定方法可以检测细胞因子和黏附分子的ADNA表达水平BmRNA表达水平C生物学活性D蛋白含量[答案]D11.免疫印迹试验(IBT)[答案]是一种将高分辨凝胶电泳和免疫反应相结合的免疫检验技术,又称为Westernblot。12.简述单克隆抗体技术的基本原理和步骤。[答案]1)基本原理:通过融合剂将抗原免疫的小鼠牌细胞和小鼠骨髓瘤细胞进行融合,获得融合细胞,再利用选择培养基筛选出合适的“脾-瘤”融合细胞,通过检测其.上清中的表达,最终获得既能分泌抗体又能保持细胞体外无单项可获得大量高效价、高纯度的特异性抗体。(2)基本步骤:①抗原纯化与动物免疫②骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备③细胞融合④选择培养⑤阳性杂交瘤克隆的克隆化⑥单克隆抗体的保存和扩增13.M蛋白[答案]是浆细胞或B淋巴细胞单克隆大量增殖时所产生的种异常免疫球蛋白,其氨基酸组成及排列顺序十分均一,空间构象、电泳特征也完全相同,本质为免疫球蛋白或其片段(轻链、重链等),大多无抗体活性,所以又称为副蛋白。14.在排斥反应中,常发生于移植器官与受者血管接通后数分钟质24小时的是A移植物抗宿主反应B慢性排斥反应C急性排斥反应.D超急性排斥反应[答案]D15.在PAP中第二抗体作为A被测抗体B桥联抗体C特异性识别抗体D抗酶抗体[答案]B16.电化学发光免疫分析技术常以下列哪种物质作为标记物A吖啶酯B三丙胺C三联吡啶钌D碱性磷酸酶[答案]C17.将实际患病者正确地判断为阳性的百分率为A敏感性B特异性C阳性预测值D阴性预测值[答案]A18.测定尿液中hCG最常用的免疫技术是ADIGFABDICACELISADCLIA[答案]B19.与弗氏不完全佐剂相比,弗氏完全佐剂含有A水B卡介苗C液体石蜡D羊毛脂[答案]B20.下列不用作固相载体的是A微孔板B金颗粒C磁微粒D膜载体[答案]B21.检测T细胞增殖反应的试验不包括A形态学检查法B3H-TdR掺入法CMTT比色法D滤膜渗透法[答案]D22.胃泌素释放肽前体主要用于下列哪一个疾病的检测A胃癌B结直肠癌C肝癌D肺癌[答案]D23.下列哪一项免疫试验利用镧系元素标记抗原或抗体A荧光偏振免疫试验B流式荧光免疫试验C|间接荧光免疫试验D时间分辨荧光免疫试验[答案]D24.荧光免疫组织化学技术使用的标本不含A血清B组织切片C细胞培养标本D活细胞染色[答案]A25.下列不是双向扩散试验特点的是A定性分析B定量分析C|特异性高D灵敏度低[答案]B26.请从免疫学检验技术层面简述乙型肝炎病毒感染常用检验项目和检测方法及其临床意义。[答案]HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗HBc五项俗称乙肝五项或乙肝两对半。①HBsAg:常用双抗夹心法检测,HBV感染后首先出现HBsAg,是早期诊断的指标,HBsAg转阴并出现抗-HBs是HBV感染治疗的最终目标。②抗-HBs:常用双抗夹心法检测,抗-HBs是HBV保护性抗体的一种,阳性反应见于HBV感染恢复期、既往感染或乙肝疫苗接种后③HBeAg:常用双抗夹心法检测,HBeAg-般仅见于HBsAg阳性者,阳性反应表示HBV传染性较强,患者处于高感染低应答期。④抗-HBe:常用竞争抑!制法检测,抗HBe可长期存在,无保护作用。HBeAg消失伴抗HBe出现称为HBeAg的血清转换。⑤抗-HBc:抗-HBcIgM常用捕获法检测,是HBV急性感染的早期指标和病毒复制标志。抗-HBcIgG常用竞争抑制法检测,是既往感染的标志,现症感染也可出现。27.根据标记物和反应原理的不同,化学发光免疫试验的分类中不包括A电化学发光免疫试验B化学发光酶免疫试验C间接化学发光免疫试验D发光氧通道免疫试验[答案]C28流式细胞仪数据显示方式中能够显示两个独立参数与细胞相对数之间关系的是A单参数直方图.B双参数图C假三维图D三参数点图[答案]A29.下列常用于SCLC检测的是ACEABCYFRA21-1.CSCCADProGRP[答案]D30.胶体金[答案]是由氯金酸与一定比例的还原剂反应,形成一-定大小的金颗粒。其在弱碱性条件下带负电荷,可形成稳定的胶体状态,带负电的胶体金可通过静电引力与带正电的蛋白分子结合,从而将金颗粒标记于抗体等。31亲合力[答案]多价抗体与抗原分子间的结合能力称为亲合力。33.下列免疫技术中是利用膜的渗滤特性的是AELISABDICACDIGFADCLIA.[答案]C34.下列可以用于细胞内细胞因子检测的测定方法是A酶联免疫吸附试验B化学发光酶免疫试验C流式细胞术D胶体金免疫层析试验[答案]D35.对于抗原抗体的结合最重要,提供作用力最大的是A静电引力B氢键C范德华力D疏水作用力[答案]C36.下列自身免疫性疾病中不具有器官特异性的是A类风湿性关节炎B重症肌无力C|多发性硬化症D自身免疫性溶血性贫血[答案]A37.利用吸光度建立标准曲线的免疫浊度测定试验是A终点散射免疫比浊B速率散射免疫比浊C絮状免疫沉淀D透射免疫比浊[答案]B38.免疫散射比浊测定为保证检测质量,采用A抗原过量B抗体过量C抗原恒量D抗体恒量[答案]B39.带现象[答案]在等价带两侧,由于抗原或抗体过量,形成的沉淀物较少,-上清液中可检测到游离的抗体或抗原,称为带现象。抗体过量时为前带,抗原过量时为后带。40.钩状效应[答案]在ELISA的双抗体夹心法中,当标本中待测抗原浓度过高时,过量的抗原可分别同固相抗体和酶标抗体结合而抑制双抗体夹心复合物的形成,出现钩状效应,导致底物显色降低,可出现假阴性。41.下列哪一项的血清水平升高提示有I型超敏反应的可能AlgGBIgACIgEDIgMEIgD[答案]C42.室间质量评价(EQA)[答案]为客观地比较某一实验室的测定结果与靶值的差异,由外单位机构,采取一-定的方法,连续、客观地评价实验室的结果,发现误差并校正结果,使各实验室之间的结果具有可比性。43.下列哪一项不是免疫放射分析的特点A|固相吸附法分离B标记抗体C测定大分子抗原D竞争性分析[答案]D44.下列哪一项不属于原发性免疫缺陷病ABruton综合征BDiGeorge综合征CAIDSDPNH[答案]C45.酶联免疫斑点试验检测的最终数据是A细胞频率B发光强度C放射性强度D颜色深浅[答案]A46.免疫组织化学技术[答案]是指用荧光素等标记的特异性抗体对组织切片中的相应抗原进行特异性染色,通过荧光显微镜或普通显微镜,实现对未知抗原定性、定位、定量分析的标记免疫方法。47.间接荧光免疫试验(IFA)[答案]用特异性抗体与标本中相应抗原反应,再用荧光素标记的第二抗体(抗抗体)与抗原抗体复合物中第抗体结合,洗涤、干燥后在荧光显微镜下观察特异性荧光,检测未知抗原或抗体。48.CP-CH50的测定的是A|总补体活性B|总补体含量C|部分补体活性D部分补体含量[答案]A49.Th细胞的典型表面标志是A|CD3-CD16+CD56+B|CD3+CD4CD8+CD4+CD25+Foxp3+D|CD3+CD4+CD8-[答案]D50.经典的免疫学技术不包括A|免疫标记试验B免疫沉淀试验C补体结合试验D免疫凝集试验[答案]A51.APAAP是下列哪种物质代替HRP建立的与PAP法类似的技术Aβ-GalBFITCCEu3+DALP[答案]D52.M蛋白常见于下列哪--种疾病A肝硬化B多发性骨髓瘤C肾病综合征D自身免疫病[答案]B53.对异常免疫球蛋白的检测,下列常作为确证试验的是A尿本周蛋白定性B免疫球蛋白亚型定量C血清蛋白电泳D免疫球蛋白定量[答案]B54.下列哪一项不作为辣根过氧化物酶HRP的底物A邻苯二胺B四甲基联苯胺C对羟基苯乙酸D对硝基苯磷酸盐[答案]D55.间接免疫荧光试验的缺点是A敏感性强,B一种荧光二抗可检测多种抗原或抗体C操作简便D容易产生非特异性荧光[答案]D56.抗原与抗体.上带有相反电荷的氨基和羧基集团之间相互吸引的作用力是A范德华力B氢键C静电引力D疏水作用力[答案]C57.用于检测结合于红细胞表面的不完全抗体的试验是.A正向凝集试验B反向凝集试验C直接Coombs试验D间接Coombs试验[答案]C58.不属于常有的化学发光剂的是A吖啶酯B三联吡啶钌C鲁米诺D异硫氰酸荧光素[答案]D60.系统性红斑狼疮患者体内AC3↑,C4↑BC3↓,C4↓C|C3↑,C4↓DC3↓,C4↑[答案]B肿瘤标志物(TM)[答案]指在肿瘤发生和增殖过程中,肿瘤细胞生物合成、释放或者宿主对癌类反应性的一类物质,用于肿瘤的诊断、治疗监测、预后判断。62.请简述流式细胞仪的分析原理和分选原理。答案]①分析工作原理在荧光染色的待测单细胞悬液加载于进样器系统后,在液流驱动系统作用下,细胞流与鞘液在交汇处形成--定角度进入流动室,经液流聚焦作用,鞘液裹挟着细胞流高速流动。通过调节液流的压力,使细胞成单排列逐-通过检测区域。激光束在光束形成器调整下垂直照射在细胞流上,细胞.上的荧光标记物被激发出荧光。同时,细胞因大小和胞内颗粒的不同产生不同的散射光。这两种光信号被PMT和PD检测器接收,信号经放大和转换输送给计算机。计算机将数字信号转换、储存和分析。②分选工作原理当细胞液流通过流动室时,流动室耦合的超声压电晶体产生稳定的高频振动,将液流断裂成连续、均匀的含单细胞液滴。根据检测到的散射光和荧光信号,仪器对细胞群体特征进行判断,确定某-特征群体为目的群体,随即产生控制信号,给细胞液滴充电使其带上正或负的电荷。当期流经偏转高压静电场时,带电液滴分别向负极或正极偏转,进入分选收集管中,没有充电的液滴垂直下落,落入废液收集器中,从而实现细胞分选。63.下列符合性联无丙种球蛋白血症特点的是A细胞数量正常B淋巴结有生发中心,C|各类lg含量降低D|T细胞数量降低[答案]C64.室内质量控制(IQC)[答案]是由实验室工作人员采取一-定的方法和步骤,连续评价本实验室工作的可靠性程度,旨在监测和控制本实验室常规工作的精密度,提高本实验室常规工作中批内、批间标本检验的一致性。65.免疫系统的基本功能不包括A|免疫调节B免疫防御C|免疫监视D免疫自稳[答案]A66.不常用作抗精子抗体检测的方法是A精子凝集试验.B精子制动试验C流式细胞术DELISA.[答案]Cl67.放射免疫分析的分离技术不包括A聚乙二醇法B双抗体法C双抗体-PEG法D双抗体夹心法[答案]D68.固相膜免疫分析技术[答案]是以微孔膜为固相载体,包被已知抗原或抗体,加入待测样本后,经微孔膜渗滤作用或毛细管虹吸作用使样本中的抗体或抗原与膜.上包被的抗原或抗体结合,再通过胶体金标记物或酶标记物与之反应形成肉眼可见的显色结果。69.效价[答案]在微生物检验中,常用标准定量已知颗粒性抗原与-系列倍比稀释的受检血清混合,保温后观察每管内抗原凝集程度,通常以产生明显凝集现象的血清最高稀释度作为血清抗体的效价,亦称滴度。70.下列可以在不分离结合标记物及游离标记物情况下确定待测物含量的是A酶放大免疫试验B放射免疫分析C酶联免疫吸附试验媒体D免疫渗滤试验[答案]A71.下列哪一项不常用于可溶性抗原的纯化A超速离心法B研磨法C选择性沉淀法D亲和层析法[答案]B72.类风湿因子(RF)[答案]是一种以变性lgG的Fc片段为靶抗原的自身抗体,常见于类风湿性关节炎。RF主要为19S的IgM,也有7S的IgG和IgA,它与天然lgG结合的能力较差,最易与人和动物变性lgG或免疫复合物中的IgG结合。73.下列不适用于特异性IgE检测的方法是A|Coobms试验B放射变应原吸附试验C|免疫印迹D荧光酶免疫试验[答案]A74.系统性红斑狼疮患者的特异性标志抗体不包含A抗dsDNA抗体B抗Scl-70抗体C抗核小体抗体D抗Sm抗体[答案]A75.下列哪一项不属于直接免疫凝集试验A肥达试验B外斐试验C|自身红细胞凝集试验D交叉配血试验[答案]C下列哪一项不是流式细胞仪检测的信A后向散射光B侧向散射光C|前向散射光.D荧光[答案]A77.

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