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LOGO高效液相色谱培训糸列液相色谱柱的应用目录、液相色谱分离原理、液相色谱柱的结构液相色谱柱的选择色谱柱的使用国分析条件的影响色谱柱的维护HPLC分离原理样品组分在流动相和固定相之间进行分配,由于不同组分在流动相和固定相之间的交互作用能力(吸附分配离子交换分子尺寸等)不同,使得不同组分在色谱柱上的移动速率不一样,从而产生色谱分离。(必要条件)分配过程XmYmKD4=[YS]/[YIKD=distributioncoefficient.KDiKDthereforecompoundXelutesfirst分配系数-KKK=常数(T恒定)Cm=组分在流动相中的浓度Cs=组分在固定相中的浓度容量因子k是指在一定条件下,组分在两相间达到分配平衡时的质量比。在实际工作中,常应用另一表征色谱分配平衡过程的重要参数容量因子(capacityfactor),也称分配比(partitionratio),以k表示。k=Ms/Mms为组分在固定相中的质量,Mm为组分在流动相中的质量k由保留时间计算出容量因子,即可由实验测定容量因子k色谱理论:塔板理论柱分离效能指标LEtR=554()=16(x)￥1有缴5542本B16Yuzwb日效有效色谱理论:速率理论-影响柱效的因素速率理论是荷兰学者范·弟姆特于1956年提出的,表述了影响柱效的因素及提高柱效的多种途径,其核心是速率方程(也称范·弟姆特方程式)。速率方程H=A+B/u+CuH:理论塔板高度流动相的线速度c色谱理论:速率理论影响柱效的因素H=A+B/u+CUB/u+Cu1--B色谱理论:分离度分离度:两个相邻组分的保留值之差与其平均峰宽之比R=2(Ta2Tp1)/w2+W1)计算表明1:R<0.8时,两组分不能完全分离2:R=1时,两组分峰重叠约2%3:R=1.5时,两

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