胚胎移植注意事项

I丕胎移植注意事项胚胎移植是一项操作严谨，要求高的技术。胚胎移植每个操作环节都十分重要，都直接影响胚胎移植成败。因此作为手术人员，我们应该有很强的责任意识，正规的操作理念，严格的无菌操作观念。为了使胚胎移植技术严谨、规范，提高胚胎移植成功率，现将胚胎移植中的注意事项归纳如下：一、同期发情及超排处理1、供体超排处理供体放栓（撤栓）时间：19-00;超排处理的时间为早7:00,晚19:00;第一次试情时间为撤栓后第二天早5：00,配种时，每间隔6h配1次。2、受体同期发情处理“PG”法，注射时间为处理当天下午16：00；“海绵栓+PG”法，撤栓和PG处理时间为处理当天下午16：00；受体试情时间为PG处理后的第二天早8:00,下午16：00,晚20:00；④试情时，记录具体的发情时间,认真做好发情记录,按照《受体羊发情记录表》的要求填写。二、超排的具体要求1、严格遵守超排时间,按照超排方案的剂量要求注射,做到剂量准确,注射完全；2、超排所用的注射器，用于PMSG的注射器要求1批换1次，用于FSH的注射器，每天要求换1次；3、超排所用的注射器、CIDR栓、药瓶统一收回,统一处理,严禁乱扔,乱放；4、超排时人员安排,要求每批由专人负责,即注射PMSG1人,注射FSH1人；5、符《胚胎移植所用药品跟踪单》；6、符《胚胎移植人员安排表》；7、符《受体羊发情记录表》。三、手术前的准备工作1、羊只手术部位的消毒用肥皂温水将手术部位剃干净，擦干；清水冲洗干净；0.1%新洁尔灭消毒手术部位，擦干；5%的碘酊消毒和75%酒精脱碘。2、手术器械的准备手术器械在使用之前在0・1%新洁尔灭溶液中浸泡30min,并打开器械开关；②使用时浸泡在生理盐水中（注意及时更换）；与PBS液接触的注射器及冲卵管在使用之前，用PBS液清洗1次。3、手术人员手臂的消毒手臂要严格消毒，先剪短磨光指甲，用肥皂水清洗手臂；在0.1%新洁尔灭消毒盆中浸泡5min；③在生理盐水盆中清洗干净；注意消毒液和生理盐水的及时更换。4、手术后手术器械及器械盘的清洗与灭菌①手术后，手术器械需认真、彻底的清洗，以便下次使用；②用清水及洗涤液将手术器械和器械盘上的污垢或斑点清洗干净；用流水冲洗5次；用蒸馏水冲洗5次；放入恒温干燥箱，将干燥箱的温度调至160C，处理1・5h。四、手术时操作要求1、手术时，必须戴医用手套；2、手术要求仔细、规范、准确、迅速、手法轻柔、配合默契，及时喷洒生理盐水，尽可能的缩短冲胚时间、移植时间；3、手术缝合要仔细、认真、保证缝合质量，促进伤口愈合。五、黄体鉴别1、供体采卵时黄体的鉴别正常黄体黄体情况（直径）黄体级别标记方法5-6mm1nA3-4mm2nB2mm3nC<2mm4nD注：“n”表示黄体个数，A、B、C、D分别表示黄体级别异常黄体A、中间有“红心”周围包裹发白的组织，用nm表示（“n”表示个数）；B、类似于黄体退化后形成的白体，凸起，用n表示（“n”表示个数）。2、受体羊卵巢情况及处理办法卵巢情况黄体级别处理方法表示方法两侧大黄体或冋侧两个大黄体，没有卵泡1选择较大黄体侧移植iA—侧大黄体，没有卵泡2移植黄体侧iB—侧大黄体，一侧小卵泡3刺破卵泡移植在黄体侧iC同侧大黄体和小卵泡4刺破卵泡移植在黄体侧iD冋侧或对侧有大黄体和大卵泡5不移植iE小黄体6不移植iF注：①大黄体是指颜色鲜红，突出卵巢表面部分直径4mm以上的黄体;小黄体是指直径小于4mm的小黄体；小卵泡指直径在2mm以下的卵泡；大卵泡指直径在2mm以上的卵泡；“1”表示黄体，A、B、C、D、E、F分别表示黄体级别。六、检胚室的操作要求1、Holding液及冷冻液的灭菌：使用前用0.22um的滤器，过滤时应弃取开始2—3滴，然后使用。2、移植针的消毒程序：第一次使用之前用Holding液清洗，移植针使用过程消毒时，其消毒程序：先用75%酒精棉擦洗，在用0.9%生理盐水棉擦洗，最后在用Holding液清洗。3、检胚针的清洗：第一次使用之前用Holding液清洗清洗，每检一只羊的胚胎时，用Holding液清洗一次。4、解冻胚胎时，胚胎细管的消毒，用灭菌布擦干。5、冷冻胚胎标记：胚胎细管：按照品种、耳号、胚胎类型、胚胎个数标记，具体表示方法如下：道塞特(Dorset):红色标记，用“D”表示；萨福克(Suffolk):黑色标记，用“S”表示；杜泊(Dorper):蓝色标记，用“P”表示；德美(Merino):绿色标记，用“M”表示。拇指管：按照胚胎类型、冷冻日期装管，编号，具体表示方法：1号管用“1”表示，2号管用“2”表示，依次类推，胚胎类型的表示方法：在拇指管上分别标注“M”、“B”、“EXB”，最后标注冷冻胚胎的日期；提漏：按照胚胎冷冻日期装管，在提漏上标注冷冻日期。七、定期讨论总结每完成一次胚胎移植工作，都要及时总