黑穗醋栗果实多糖提取纯化条件探究

黑穗醋栗果实多糖提取纯化条件探究摘要：黑穗醋栗俗称黑加仑，是一种在黑龙江广泛栽培的小浆果，果实富含以多糖为主的多种活性物质。本研究以黑穗醋栗果实为原料，探究黑穗醋栗果实多糖提取和降解条件，为黑穗醋栗多糖产品开发提供参考依据。利用热水浸渍法提取黑穗醋栗多糖，以多糖降解程度为指标，考察降解温度，降解压强对提取率的影响，利用D4006大孔树脂对黑穗醋栗多糖进行初步分离纯化，纯化后的多糖经真空冻干为灰白色絮状固体，对比纯化之前的深紫色固体，可知纯化效果很好。降解果胶类多糖可用一种或几种酶选择性地切断α-1，4糖苷键，从而得到低分子的糖[1,2]。此方法反应条件温和，工艺易控制，不发生副反应，对分子结构几乎没有破坏，能够克服化学降解产物分子量分布宽、均一性差的缺点，是一种较为理想的降解方法。但是，由于天然产物来源的果胶类多糖结构通常很复杂，单纯酶解难以有效降低分子量。为了克服这一弊端，采用高压辅助酶解的方法降解果胶多糖。有大量研究表明，高压处理不会对果胶类多糖主链结构造成破坏，但可以提高多糖溶液的粘度，原因可能是高压处理使果胶分子中的疏水基团暴露，进而改变了分子间的疏水作用和相互作用[3]。关键词：黑穗醋栗；多糖；提取；纯化；酶法；StudyonextractionandPurificationconditionsofPolysaccharidefromBlackcurrantfruitAbstract:Blackcurrant,commonlyknownasblackcurrant,isasmallberrywidelycultivatedinHeilongjiangprovince.Thefruitisrichinmanyactivesubstances,mainlypolysaccharides.Inthisstudy,theextractionanddegradationconditionsofblackcurrantpolysaccharidewereinvestigatedusingblackcurrantfruitasrawmaterial,soastoprovidereferencebasisfortheproductdevelopmentofblackcurrantpolysaccharide.Hotwaterimmersionmethodisutilizedtoextractblackcurrantpolysaccharide,polysaccharidedegradationdegreeastheindex,studythedegradationtemperature,thedegradationofthepressureeffectontheextractionyield,usingD4006macroporousresintoconductapreliminarypurificationofblackcurrantpolysaccharide,polysaccharidepurifiedbyvacuumfreeze-driedflocculentforgraysolid,contrastbeforepurificationpurplesolid,thepurificationeffectisverygood.Keywords:Blackcurrant;Polysaccharides;Extraction;Purification;1．黑穗醋栗果实多糖的制备1.1热水浸渍法提取黑穗醋栗果实多糖：在1000ml的烧杯中加入20.00g的黑穗醋栗果实匀浆和600ml去离子水（料液比为1:30）。在温度80℃下，使用电动搅拌器搅拌2h，转速为200转/分。抽滤，旋蒸至40ml，用75%的无水乙醇醇沉，4℃冰箱静置过夜，用微孔滤膜抽滤后干燥，复溶即得到红色的黑穗醋栗果实多糖溶液。1.2大孔树脂D4006纯化黑穗醋栗果实多糖：2.黑穗醋栗果实多糖的降解2.1温度对降解效果的影响：2.2压力对降解效果的影响：3.黑穗醋栗果实降解多糖理化指标及活性的测定3.1黑穗醋栗果实多糖降解产物分子量的测定3.2还原糖含量的测定3.3总糖含量的测定采用苯酚-硫酸法测定总糖含量。向试管中移取浓度为0.02~0.10mg/ml的葡萄糖溶液各1.0ml，去离子水作为空白对照，依次加入去离子水和苯酚溶液（5%，w/v）各1.0ml，振荡混匀后加入浓硫酸5.0ml，摇匀。待反应体系冷却至室温后，于490nm处测定反应液的吸光度。标准溶液的浓度和吸光度A490nm分别为横、纵坐标，绘制标准曲线。黑穗醋栗多糖提取液中总糖含量测定：配制适当稀释倍数的多糖提取液，按照上述步骤操作，将数据代入标准曲线求得总糖含量。致谢从选题到实验均得到导师和师兄师姐莫大的帮助，向我尊敬的导师和亲爱的师兄师姐表示由衷的感谢5.参考文献[1]周惠,李飞,夏文静.植物细胞壁多糖降解中相关辅酶的研究[J