第19章副粘病毒科(Paramyxoviridae)

,.第十九章 副粘病毒科(Paramyxoviridae)一、概述二、基因组结构与功能三、病毒蛋白及其功能四、病毒的感染周期与分子感染机理主要参考文献一、概述本科病毒具有下述特性：病毒粒子呈多形性，基本上呈圆形，直径150～250nm，有时看到感谢阅读更大的畸形粒子和长达数微米的长丝。病毒粒子有一个比较坚硬的核衣壳，呈螺旋状对称，卷曲精品文档放心下载在脂质囊膜内。囊膜上有纤突，或称囊膜突起。病毒的基因组是单股RNA,长约16～20kb，分子感谢阅读量为5～7MDa。病毒RNA由聚合酶转录成互补的mRNA。副粘病毒主要在细胞浆内复制，并从谢谢阅读细胞膜出芽成熟。国际病毒分类委员会第6次分类报告有关副粘病毒科的分类，有较大调整：将感谢阅读副粘病毒科分为副粘病毒亚科和肺病毒亚科；新增腮腺炎病毒属，代表种为腮腺炎病毒；原属于感谢阅读副粘病毒属的新城疫病毒、禽副粘病毒2～9型及猴副流感病毒等，包括在腮腺炎病毒属内。本章感谢阅读照顾我国分类习惯，暂不做调整，副粘病毒科仍分为三个属，各属主要特征及主要成员见表19-1。精品文档放心下载表19-1.副粘病毒科各属的主要特征及主要成员属 主要特征 主要成员副粘病毒属所有成员均具有神经氨酸酶 新城疫病毒(Paramyxovirus)腮腺炎病毒副流感病毒精品文档放心下载,.1～5型Ontario火鸡副流感病毒鹦鹉副粘病毒燕雀副流感病毒Yucaipa病毒鼠Nariva病毒麻疹感谢阅读病毒属所有成员缺乏神经氨酸酶，可引起麻疹病毒(Morbollivirus)胞浆和核内包涵体，后者含病谢谢阅读毒牛瘟病毒RNP。所有抗原交叉。在核衣壳犬瘟热病毒大小和结构上不同于肺病毒属。感谢阅读肺病毒属 缺乏神经氨酸酶，核衣壳大小与人呼吸道合胞体病毒(Pneumovirus)结构不同于谢谢阅读其它病毒属。牛呼吸道合胞体病毒小鼠肺炎病毒副粘病毒粒子中RNA占0.5%，蛋白质70%，脂质20%～25%，糖6%。RNA不分节段，谢谢阅读其碱基组成为G24%～25%，A20%～26%，C24%～27%，U22%～31%。副粘病毒RNA不具谢谢阅读有感染性，未发现遗传重组。副粘病毒科病毒一般具有11种蛋白质，病毒粒子中含有转录酶、多谢谢阅读A转移酶、mRNA甲基转移酶、神经氨酸酶等。副粘病毒一般对热不稳定，在无蛋白质的溶液中,4℃或室温放置2～4小时，其感染力可降至10%或几乎无感染力。在酸性或碱性溶液中易破坏，在中性溶液中较稳定，对乙醚敏感。副粘病毒的复制不受放线菌素D的影响。谢谢阅读1．形态结构病毒核衣壳就是病毒粒子的核蛋白核心，由不分节的RNA以及许多蛋白亚单位组成，呈螺精品文档放心下载旋样对称的螺卷状结构，与烟草花叶病病毒的结构相似，但两者的长度明显不同，烟草花叶病病感谢阅读毒长300nm，副粘病毒可达1000nm以上。副粘病毒的螺旋数目为200～220个，螺旋直径14～感谢阅读18nm，螺旋中孔的直径为5～12nm，螺距为5～6.5nm，螺旋方向呈左转。蛋白亚单位(单体)感谢阅读的分子量为60kDa，每个病毒粒子的亚单位数为1600～2000个，每转螺旋的亚单位数为9～感谢阅读个。核衣壳盘绕成团，外被脂蛋白囊膜。副粘病毒的基因组为单股RNA。精品文档放心下载副粘病毒RNA的主要特征是它本身不能作为mRNA，不带译制病毒蛋白质的信息。因此必精品文档放心下载须通过病毒自己的RNA聚合酶转录一股互补链作为mRNA。根据惯例，带有病毒译制信息的RNA谢谢阅读称为正股。这样，副粘病毒的互补链称为“正股”，病毒原来的RNA就是负股，故称为负股RNA精品文档放心下载,.病毒。图19-1.副粘病毒（自李成等）A.新城疫病毒；B.牛副粘病毒核衣壳2.基因组结构各种副粘病毒都有一个螺旋对称的单一核衣壳，其中的RNA含一组串连的6个或更多的基谢谢阅读因。RNA是单分子单链RNA，16～20kb长，主要是负链，有时毒粒中也含有少量正链RNA。感谢阅读副粘病毒科中的鸡新城疫病毒、仙台病毒和麻疹病毒的全部核苷酸序列已明了，并绘制出基因图精品文档放心下载谱。在肺病毒属的人呼吸道合胞体病毒的基因组中，除L基因没有完成序列分析外，其它基因序谢谢阅读列及图谱已与其它两属的基因图谱进行比较，见图19-2。由图可以看出肺病毒属的基因组成与其谢谢阅读它两属不尽相同，推断其分子生物学特性也有很大差别。图19-2 副粘病毒代表种的基因图谱副流感病毒3型的基因组排列次序为3'I－NP－P+C－M－F－HN－L5'。在各基因之间有一感谢阅读3'GAA保守序列，每一基因末端含有转录终止序列和mRNA互补的多聚(A)序列，有12个末端精品文档放心下载核苷酸是半保守的：3'UUUAUU/AUUC/UUUUU5'。在基因的起始端有10个核苷酸是半保守的：谢谢阅读3'UCCUA/CA/GUUUC。翻译起始端距5’端的距离，在M蛋白为33～35nt，F基因为194～感谢阅读196nt。猿猴病毒5(SV5)、犬副流感病毒2型，在F和HN之间另有一个基因，编码SH蛋白(Small精品文档放心下载hydrophobicprotein)，分子量为5.012kDa，共44个氨基酸，其功能尚不清楚。有些研究也间感谢阅读接证明新城疫病毒另有一个小基因，但无C蛋白。,.19-3仙台病毒基因组的模式图表明在基因间存在(+)RNA前导序列和转录调节序列。感谢阅读E、I和S分别表示mRNA末端、基因间和起始序列。精品文档放心下载3.病毒蛋白组成(1)核衣壳蛋白A.核衣壳结构蛋白(NP)：副粘病毒属的核衣壳结构蛋白是核衣壳蛋白(N)的主要成分，其结构单位精品文档放心下载有两个主要区域。一是氨基端区域，约占整个结构单位的三分之二，它与RNA直接结合；另一个感谢阅读是羧基端区域，裸露于装配后的核衣壳表面，胰蛋白酶处理后可以由核衣壳上解离下来，表明在精品文档放心下载两区域的结合部位存在有对蛋白酶敏感的结合点。如上所述，在感染负链RNA病毒的细胞中，仅是那些没有被核衣壳蛋白包裹的病毒RNA具谢谢阅读有病毒mRNA作用。另外，无核衣壳的RNA，在无细胞系统中是RNA合成的模板。这些结果说精品文档放心下载明，核衣壳结构单位与负链RNA病毒基因组模板活性有着密切的关系。然而副粘病毒的核衣壳蛋精品文档放心下载白中的NP和N蛋白必须与操纵RNA合成的辅助蛋白相互作用，才能完成RNA的合成。特异性感谢阅读抗辅助蛋白结构单位的抗体对RNA合成的抑制,也充分证明了这一点。感谢阅读B.辅助核衣壳蛋白：是与RNA复制和转录酶促反应过程相关的主要辅助性蛋白质，包括L蛋白和感谢阅读较小的P蛋白，这些辅助蛋白的作用是相互协同才能发挥作用。也就是说，当单一的某蛋白质加感谢阅读入到核衣壳RNA模板时，不具有催化RNA合成的能力。在RNA复制过程中辅助核衣壳蛋白的精品文档放心下载作用是在每一病毒基因的3’末端加上多聚(A)和在5’末端的转录后的修饰。研究表明，L蛋白起精品文档放心下载很重要的作用，致于P蛋白的功能尚不十分明确。(2)囊膜糖蛋白,.A.附着蛋白：所有的副粘病毒都具有一个表面糖蛋白，它介导病毒与细胞的附着。在副粘病毒属精品文档放心下载和麻疹病毒属，这些糖蛋白与细胞的含唾液酸的受体结合，其亲和性很高，具有血凝素和神经感谢阅读氨酸酶活性，因而称为HN(hemagglutinin－neuraminidase)。在没有神经氨酸酶活性的病毒精品文档放心下载属中，如麻疹病毒属，则称为H。在肺病毒属中同源的附着蛋白无血凝素和神经氨酸酶活性，谢谢阅读因而被称为G蛋白。H和HN蛋白其氨基端具有很强的疏水性，这一区域使其固定在病毒囊膜精品文档放心下载的双层脂质膜内，虽然副粘病毒属的HN蛋白的三维结构还没有确证，但可以肯定其结构和功感谢阅读能是相关的。业已明确，许多副粘病毒RNA编码的附着蛋白的核苷酸序列。由序列分析推断的精品文档放心下载氨基酸序列可知，HN和H蛋白约含600个氨基酸。就HN蛋白而言，大约在距每一分子的氨精品文档放心下载基端200个氨基酸处的6个氨基酸是非常保守的，基于与流感病毒神经氨酸酶活性位点的比较，谢谢阅读间接说明这一保守区与神经氨酸酶活性有关。另一个距氨基端约400个氨基酸的区域，与流感感谢阅读病毒血凝素的唾液酸结合位点具有部分同源性，表明部分HN附着位点的存在。在研究仙台病谢谢阅读毒温度敏感变异株的条件性吸附缺陷时，在羧基端区域也发现有HN结合位点的部分序列，说感谢阅读明活性位点在氨基酸一级结构中分开，在折叠分子中结合才能发挥作用。人呼吸道合胞体病毒感谢阅读的附着蛋白G的编码基因，由298个氨基酸组成。精品文档放心下载B.融合蛋白：也称F蛋白。副粘病毒粒子附着于宿主细胞后，下一步就是核衣壳释放到胞浆内，精品文档放心下载这一过程是借助于第二种表面糖蛋白的作用，是囊膜与宿主细胞表面脂蛋白膜融合的主要因子。精品文档放心下载F蛋白的合成先以无活性的F0前体存在，由540～580个氨基酸组成，前体F0由蛋白酶水解精品文档放心下载后才发挥其融合作用。水解位点位于距F0蛋白氨基端大约100个氨基酸处，且有两个特点：位精品文档放心下载点的氨基端存在一个由赖氨酸和精氨酸组成的短序列；在羧基端存在有约为30个氨基酸的疏水精品文档放心下载性长序列。不同种属的副粘病毒，甚至同种内的不同毒株，在F0蛋白水解位点的氨基端的精、谢谢阅读赖氨酸的数量和距离都各不相同，两氨基酸成对则标志着易于水解，致病性增强。水解后，形精品文档放心下载成一个较大的疏水亚单位F1，具有嵌入宿主细胞膜的融合机能。水解后较小的约100个氨基酸精品文档放心下载,.的产物称为F2。两个亚单位均在N位点糖基化，进一步增加其稳定性。谢谢阅读C.非糖基化囊膜蛋白:副粘病毒一般都具有一种相对较小的非糖基化蛋白，即膜蛋白或M蛋白，精品文档放心下载它存在于病毒囊膜的内层，被认为在病毒粒子装配过程中参与囊膜形成，介导核衣壳与囊膜之感谢阅读间的识别，以维持病毒粒子结构的完整性。其它囊膜蛋白：呼吸道合胞体病毒22K基因编码一个小的蛋白质，参与囊膜形成，但其具体功能尚不清楚。犬副流感病毒2型和腮腺炎病毒，在F和HN基因之间有一小基因，编码一小疏水性蛋白质，称为SH蛋白(smallhydrophobicprotein)，尽管其功能不详，但由于其具有疏水性，表明对双层脂膜有亲和性。谢谢阅读(3)非结构蛋白质：有一个或多个功能尚不清楚的小蛋白质，编码于副粘病毒属病毒基因组中，一感谢阅读般以文字数字命名，这些小蛋白质在不同病毒中其编码方式不尽相同。谢谢阅读4.复制吸附与进入副粘病毒的HN或H和G蛋白参与病毒与细胞的吸附。如上所述，感染性的核衣壳，在具有转录活性的辅助性蛋白组份参与下，由F蛋白介导的细胞表面与病毒囊膜之间发生融合，而使其进入到细胞质中。谢谢阅读转录和翻译在研究鸡新城疫病毒(NDV)感染细胞后的RNA合成时，发现了病毒复制的负股RNA的复制机制。相继的研究证明，其它副粘病毒也遵循这一机制。在感染过程中，副粘病毒的每一基因均有其相对应的不同的mRNA，这些分开的mRNA是由整个基因组的多考贝转录后加工获得，还是各基因分别转录后的产物，仍未完全清楚。下一个重要步聚就是病毒负股RNA复制成正股RNA，参与转录过程，与此同时，由正股RNA复制大量完整的病毒基因组，参与病毒的装配。换句话说，负链RNA一方面转录成mRNA，合成相应的病毒蛋白成份，另一方面转录成其互补链，再合成病毒RNA链，参与病毒包装。精品文档放心下载(3),.图19-4 副粘病毒基因组复制的主要步骤(3)病毒粒子的包装与释放副粘病毒核衣壳的装配发生在胞浆内，其过程分两步进行：首先是NP谢谢阅读和N蛋白结构单位与病毒基因组结合。病毒粒子囊膜的形成是在细胞表面。病毒糖蛋白在运输过谢谢阅读程中，经过内质网和高尔基体而被糖基化，替代脂质层中许多内源的细胞蛋白质，而存在于宿主谢谢阅读细胞膜表面，当核衣壳到达细胞膜表面，以尚不明了的形式，从细胞表面芽生，形成病毒粒子。感谢阅读在病毒粒子芽生的同时，细胞膜表面也具有病毒糖蛋白纤突，如果有类似胰蛋白酶的蛋白酶存在精品文档放心下载时，在细胞膜表面的F0蛋白将被激活，致使细胞与细胞之间接触融合，这样病毒介导的融合被称精品文档放心下载之为内融合(fusionfromwithin)。这一过程提供了病毒基因组直接从一个细胞进入另一个细胞的谢谢阅读机会，最大限度地逃避宿主体液中循环抗体的监视作用。这种细胞内融合涉及到几个或多个的细感谢阅读胞，形成多核体(polykaryon)，既可以在培养细胞单层中见到，又可在感染病毒的组织内形成。精品文档放心下载二、副粘病毒属(Paramyxovirus)本病毒属的代表种为新城疫病毒，另外包括人的腮腺炎病毒、禽副粘病毒2型等以及人和动精品文档放心下载物的副流感1～4型病毒与其它副流感病毒。其中禽副粘病毒(PVM)各血清型代表种见表19-谢谢阅读(一)新城疫病毒(Newcastlediseasevirus)感谢阅读同义名：新城鸡瘟病毒，禽肺脑炎病毒，亚洲鸡瘟病毒，伪鸡瘟病毒，禽副粘病毒1型。感谢阅读新城疫(ND)是极易传染的毁灭性疾病，最常侵袭家鸡和珠鸡，也能感染许多其它家禽和野鸟。感谢阅读,.火鸡和孔雀的易感性较低，但常从雉、鸽和野生鹦鹉体内分离到毒力强大的病毒。水禽和海鸟通谢谢阅读常抵抗力甚强，但可作为带毒者。人有易感性，常因接触病禽和病毒乃至活毒疫苗而被感染。本精品文档放心下载病于1926年首先发现于印度尼西亚的巴塔维亚，同年发现于英国新城，故名。本病的死亡率极高，谢谢阅读强毒力毒株引起的感染常达100%，广泛分布于世界许多国家。感谢阅读1.形态特征成熟病毒粒子的直径约为100～250nm，有囊膜的病毒粒子通常呈圆形，但常因囊膜破损而感谢阅读形态不规则，也常见横断面100nm左右的不同长度的细丝，显现出多形性的病毒粒子。囊膜上的感谢阅读纤突约长8nm。病毒粒子的内部为一核心，也就是病毒粒子中卷曲的核衣壳。核衣壳的直径约谢谢阅读17nm。新城疫病毒很不稳定，用乙醚处理时病毒粒子彻底破坏，释出形状不规则的凝絮状物，直谢谢阅读径35～65nm。其外层为脂蛋白，表面有纤突，具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)活性。精品文档放心下载2.理化学特性新城疫病毒(NDV)在55℃经45分钟或在直射阳光下经30分钟灭活。但在4℃经几周，-20℃谢谢阅读经几个月，在-70℃经几年感染力不受影响。总的来看,NDV对理化因素的抵抗力相当强，能在自感谢阅读然界中顽强生存。影响其在宿主体外生存的主要因素，包括病毒的数量、毒株的种类、温度、湿感谢阅读度、干燥速度、阳光照射和贮存条件以及是否存在有机物等等。在新城疫暴发后经2～8周，仍能感谢阅读从鸡舍、产蛋巢、蛋壳、羽毛和其它物质中分离到病毒。在鲜蛋中经几个月，在冻鸡中经2年以精品文档放心下载上仍有病毒生存。将不拔毛的鸡尸贮藏于4℃，经4～6个月仍能在皮肤和骨髓中检出活的病毒。感谢阅读碳酸钠和氢氧化钠的消毒效果不稳定，大多数去垢剂能迅速将其灭活。普通洗衣皂虽无直接消毒精品文档放心下载作用，但其去污能力良好，4%浓度可作清洁和一般消毒用。如果病毒未被组织、分泌物、粪便或感谢阅读其它有机物所保护，煤酚皂、酚、甲酚等配成2%～3%溶液，在5分钟内可将病毒灭活。福尔马谢谢阅读林的效果因温度和浓度的不同，差别甚大，但在37℃孵卵器内0.1%福尔马林维持6小时能有效精品文档放心下载,.地使病毒灭活。新城疫病毒的RNA核苷酸序列长15156bp。基因组编码6种蛋白质：L、HN、感谢阅读F、NP、P、M蛋白。病毒粒子含有约20%～25%(W/W)来自宿主细胞的脂质和约6%的碳水化谢谢阅读合物。3.生物学活性(1)血凝性: NDV能凝集红细胞，是由于其HN蛋白能结合于红细胞表面的受体。这一特性谢谢阅读以及抗血清的特异性抑制作用已成为本病的有效诊断方法。虽然NDV可凝集所有两栖类、爬行类精品文档放心下载和禽类的红细胞，但HA试验常用鸡的红细胞。所有NDV毒株都可凝集人、小鼠和豚鼠红细胞。精品文档放心下载但凝集牛、山羊、绵羊、猪和马红细胞的能力则随毒株或血清型而异。感谢阅读(2)神经氨酸酶活性: 神经氨酸酶(NA)也是HN分子的一部分，存在于副粘病毒属的所有成感谢阅读员。此酶的明显作用是可将病毒逐渐从红细胞上洗脱下来。然而尚不知道NA对病毒复制的确切谢谢阅读功能。NA还作用于受体位点，使F蛋白充分接近而发生病毒与细胞膜的融合。精品文档放心下载(3)细胞融合与溶血: NDV和其它副粘病毒可因同一机制引起红细胞溶解或细胞融合。病毒精品文档放心下载复制时附着于受体位点，继之病毒囊膜与细胞膜融合，也可导致两个或多个细胞融合。红细胞膜感谢阅读常因与病毒之间的膜融合而导致红细胞溶解，产生溶血。（三）禽副粘病毒2型(Avianparamyxovirustype2)精品文档放心下载同义名：尤凯帕病毒(Yucaipavirus)。1960年美国加利福尼亚州尤凯帕的一个养禽场暴发了一次严重的传染性喉气管炎。从3周龄感谢阅读的病鸡气管中分离到一株副粘病毒，称为尤凯帕病毒(PMV－2)。它在血清学上与NDV有差别。感谢阅读后来的血清学普查表明，此病毒分布广泛。将此病毒以气管内途径接种雏鸡，能产生轻微的呼吸感谢阅读道症状。乳鼠不易感。本病毒的抗原性不但与正粘病毒的流感病毒不同，而且与副粘病毒的新城精品文档放心下载,.疫病毒、副流感病毒和流行性腮腺炎病毒等也不同。副粘病毒2型能凝集鸡、豚鼠红细胞和人“O”精品文档放心下载型红细胞，在牛肾和猪肾细胞和HeLa细胞中产生细胞病变。禽的副粘病毒还包括禽副粘病毒3～谢谢阅读型。（四）副流感病毒亚群(Parainfluenzaviruses)谢谢阅读早在1956年，Chanock等从肺炎病孩的咽喉洗液中分离出一株新病毒，当时称为CA病毒感谢阅读(croupassociatedvirus)。次年，该氏从类似流感病孩的咽喉洗液中又分离出38株过去未知的感谢阅读新病毒，由于病毒的存在是用红细胞吸咐现象来判定的，所以，新分离的病毒，根据抗原性的不谢谢阅读同，分别称为红细胞吸咐病毒第1型和第2型(HA1、HA2)。1959年Andrewes等鉴于这些新病感谢阅读毒的生物学性质，以及这些新病毒能引起人类类似流感样症状的疾病等特点，将其定名为副流感谢谢阅读病毒，与流感病毒同属粘病毒。1962年Waterson鉴于这类新病毒具有与流感病毒不同的理化及精品文档放心下载生物学性质，将它们列为第二类粘病毒，而原来的流感病毒列为第一类粘病毒。直至1982年第4谢谢阅读次国际病毒命名会议上，才将这类病毒定名为副粘病毒属。在副流感病毒中能引起人类疾病的有：谢谢阅读HA1病毒(3型)、HA2病毒(1型)、仙台病毒(1型)、CA病毒(2型)和M25病毒(4型)。副流感病感谢阅读毒在我国世界上许多国家，包括美国、法国、前苏联、日本、丹麦、加拿大、澳大利亚、巴拿马精品文档放心下载和意大利等，都有广泛流行。副流感病毒引起人和动物的上呼吸道感染，在幼年动物急性呼吸道精品文档放心下载感染中特别重要。这些病毒的形态与其它副粘病毒没有区别。它们对理化学因素的抵抗力不强，谢谢阅读将其悬浮于无蛋白质基质中，在室温或4℃经2～4小时，感染力丧失90%以上。在pH3和37℃精品文档放心下载迅速灭活，即使在0℃以下，活力也易下降。大多数毒株能凝集家禽和某些哺乳动物的红细胞，并感谢阅读有神经氨酸酶活性。对鸡红细胞的最高血凝滴度发生在4℃(副流感病毒1型和2型)，对豚鼠红细谢谢阅读胞发生在25℃。副流感病毒与新城疫病毒一样，还有一种溶血素，可被型特异的抗血清所抑制。感谢阅读,.新分离毒株在细胞培养物中引起的细胞病变甚为轻微，但是可用豚鼠红细胞作血细胞吸咐试验。感谢阅读连续传代后可以形成病灶性合胞体和胞浆内包涵体。1型和3型病毒的某些毒株，在多种细胞培谢谢阅读养物中产生嗜酸性核内包涵体。荧光抗体试验证明副流感病毒主要在细胞浆内复制。大多数新分感谢阅读离毒株不能在鸡胚中良好增殖，这与新城疫病毒和流感病毒不同，但经连续传代以后，大多数能精品文档放心下载适应7～9日龄鸡胚的羊膜腔。孵育4～6天，病毒滴度达最高峰。此后能在尿囊腔中增殖，但4谢谢阅读型病毒不能在鸡胚中增殖。将副流感病毒滴鼻接种乳豚鼠和乳仓鼠，可以引起感染，在2～3天内谢谢阅读肺部病毒达很高滴度，但看不到病变。每一种副流感病毒具有3种不同的抗原，决定着它们的型谢谢阅读特异性。HN、F是表面抗原，NP是核衣壳抗原。中和抗体是针对HN的。在中和试验和血凝抑谢谢阅读制试验中至少存在4个抗原决定簇，神经氨酸酶也存在不同的抗原决定簇。这说明神经氨酸酶和谢谢阅读血凝素的功能是与HN糖蛋白的独特区相关的。副流感病毒在免疫学上与流感病毒没有关系。副感谢阅读流感病毒的实验诊断，主要是用血凝抑制试验或补体结合试验测定血清抗体的滴度上升情况。也谢谢阅读可应用适宜的原代细胞分离病毒，并用血细胞吸咐试验和血细胞吸咐抑制试验加以证实和鉴定。精品文档放心下载根据血凝抑制试验和血清中和试验，可将副流感病毒区分为1、2、3和4型，但4型之间具有轻精品文档放心下载微的交叉反应。1.副流感病毒1型(Parainfluenzavirus,type1)精品文档放心下载同义名：仙台病毒(Sendaivirus)；日本血凝病毒(HaemagglutinatingvirusofJapan)；血谢谢阅读细胞吸附病毒2型(Haemadsorptionvirus,type2)。谢谢阅读副流感病毒1型的原始分离毒株称为血红细胞吸附病毒第2型，简称HA2病毒。它是1957谢谢阅读年Chanock等从华盛顿1名患有急性喉气管支气管炎的婴儿的咽拭子中，用恒河猴肾原代细胞培谢谢阅读养分离出来的。我国于1962年在北京从急性下呼吸道感染患儿的咽拭子中分离出3株HA2病毒，谢谢阅读从急性上呼吸道感染的患儿中分离出2株HA2病毒。HA2病毒也在世界其它地方分离出来过，谢谢阅读包括美国、澳大利亚、加拿大、前苏联、英国、丹麦、日本、法国和西印度群岛。感谢阅读,.(1)理化学特性副流感病毒1型经电镜测得的大小为100～180nm。毒粒内含单股RNA，核谢谢阅读衣壳体螺旋对称，有包膜，上有糖蛋白纤突。病毒粒子的感染力在50℃2小时或36℃80小时内感谢阅读全部丧失；在无血清的营养液中25℃2小时，其感染力损失99%。如将病毒保存在-60℃含蛋白谢谢阅读质的营养液中，其感染力可保持数年。病毒在pH5.7～8.7时，感染力稳定。用超声波处理可以导感谢阅读致血凝素解离，而不增加其感染力。20%乙醚4℃过夜或氯仿4℃10分钟可使其感染力完全丧失。谢谢阅读乙醚或氯仿以及Tween80处理，可以导致表面抗原包括血凝素和神经氨酸酶的释放。0.5μg/ml精品文档放心下载的胰酶在37℃孵育1小时可使其感染力下降99.99%，但血凝素滴度不下降；孵育5小时，则血感谢阅读凝素滴度下降。病毒经乙醚处理后，用血凝或补体结合试验可区分出两种抗原成分：一种是可溶精品文档放心下载性抗原(S)，它在20000r/min不沉淀，也不凝集血细胞，用经鼻腔感染豚鼠制备的免疫血清可与谢谢阅读之发生补体结合反应；第二种是特异性血凝抗原(V)，它可与特异性豚鼠免疫血清发生血凝抑制反谢谢阅读应。另有一种溶血素，在补体存在时可使鸡红细胞溶解。副流感病毒1型能凝集鸡、豚鼠、人、谢谢阅读绵羊、家兔和猴的红细胞。鸡红细胞在4℃，豚鼠红细胞在25℃，能获得最高的血凝滴度。在偏精品文档放心下载酸或偏碱的pH中，血凝素比感染性病毒粒子更为稳定。该病毒用乙醚处理可以提高血凝滴度。精品文档放心下载在不同动物血清中存在1型病毒血凝反应的非特异性抑制物，在家兔的正常和免疫血清的19S和谢谢阅读4S部分含有1和3型病毒血凝反应的抑制物，而特异性抗体是在7S部分，可用凝胶过滤进行纯谢谢阅读化。血清中存在的非特异性血凝抑制物质，可以用霍乱孤菌滤液的受体破坏酶(RDE)处理或白陶土精品文档放心下载处理法去除，如用过碘酸钾处理，非特异性抑制固然可以去除，但特异性抗体也遭到部分破坏。感谢阅读将仙台病毒与HA2病毒归属于副流感病毒1型的主要根据是，其可溶性抗原具有交叉反应。精品文档放心下载(2)培养某些副流感病毒1型能在鸡胚中生长，仙台病毒株生长更佳。羊膜腔接种最敏感，但传感谢阅读代后可用尿囊腔和卵黄囊接种。培养适宜温度为35.5℃，鸡胚不死亡。HA2株能在人、猴、鸡胚精品文档放心下载和猪的肾细胞培养物中生长，仙台病毒株的适应范围更广。初次分离时，细胞病变不明显，用血精品文档放心下载细胞吸附试验易于检出病毒，也可将细胞培养物染色后检查胞浆内的包涵体。仙台病毒株可形成感谢阅读,.蚀斑。将接种物用胰酶处理，常可增加蚀斑数。仙台病毒株能使培养细胞发生融合，即使灭活后精品文档放心下载也有这种作用，因此在哺乳动物杂交细胞的研究中，广泛应用仙台病毒株作为细胞融合剂。感谢阅读(3)病原性实验感染时，仙台病毒株可使小鼠发生隐性感染，但在鼠群中几经传递后，毒力可增精品文档放心下载强而导致致死性肺炎。在过去无此病的鼠群中死亡率很高。偶而可以感染大鼠、豚鼠和猪。过去谢谢阅读认为仙台病毒株一般不感染人类，现在已有许多实验证明它也是人类呼吸道疾病的病原之一。血谢谢阅读细胞吸附病毒2型只分离自人类，引起儿童急性喉气管炎。近来应用细胞融合技术，曾从多发性感谢阅读硬化症病人的脑细胞中分离到本病毒。2.副流感病毒2型(Paraimfluenzavirus,type2)感谢阅读副流感病毒2型原始分离物称为CA病毒,系1955年11月从美国俄亥俄州一名患有急性喉气感谢阅读管支气管炎的婴儿咽拭子，在猴肾细胞培养上分离到的。患者血清的中和抗体、血凝抑制抗体和感谢阅读补体结合抗体对分离的病毒均呈4倍以上的增长。在加拿大、美国、澳大利亚、前苏联和美国等感谢阅读不同地区都分离到该病毒。我国没有该病毒分离的报道，但血清学证明有该病毒抗体的存在。本感谢阅读病毒最初认为是人类的病原体，但与之非常接近的一些毒株，如来自猴和人的SV－5、SV－41、精品文档放心下载SHV、SA、DA等，都包括在本型内。副流感病毒2型可自然感染家兔、豚鼠和猴。精品文档放心下载理化学特性用电镜测得的病毒粒子直径为150～250nm，具有含血凝素的外膜，核衣壳呈螺感谢阅读旋对称，直径15～18nm。粒内含单股负链RNA，特异性脂蛋白外膜含有血凝素和神经氨酸酶。感谢阅读神经氨酸酶活性发挥的适宜pH为4.5～5.5。在含0.5%水解乳蛋白、0.5%牛血清的Hanks液中，谢谢阅读4℃24小时，病毒的感染性不变，于-70℃5个月内保持稳定；75℃10分钟神经氨酸酶活性破坏。精品文档放心下载病毒在中性溶液中稳定，在pH3.0不稳定，其它物理性质和其它副流感病毒相同。病毒用氯仿处谢谢阅读10分钟，或20%乙醚4℃过夜处理，可导致其感染力完全丧失。病毒的感染力和血凝素对胰酶均有抵抗力。CA病毒具有血凝素、溶血素和神经氨酸酶活性。采用鸡红细胞在4℃反应，血凝滴度最高。对豚鼠和人“O”型红细胞也有良好的凝集性。某些动物血清中含有本病毒血凝反应的非谢谢阅读,.特异性抑制物，但用RDE处理可以去除。3.副流感病毒3型(Parainfluenzavirus,type3)精品文档放心下载同义名：血细胞吸附病毒1型(Haemadsorptionvirus，type1)；运输热病毒(Shippingfever精品文档放心下载virus)。副流感病毒3型原始分离物称为血红细胞吸附病毒第1型，简称HA1病毒。它是1957年精品文档放心下载Chanock等从华盛顿1名患有急性呼吸道疾病的2岁患儿的咽拭子中，用猴肾细胞培养，根据红精品文档放心下载细胞吸附现象分离出来的。患者血清对新分离病毒有4倍以上抗体增长。我国于1962年从急性谢谢阅读呼吸道疾病的患儿咽喉拭子中用猴肾也分离到2株HA1病毒，在法国、英国、澳大利亚、加拿大精品文档放心下载和美国等也有地方分离获得本病毒的报道。(1)理化学特性病毒粒子的直径为120～180nm，含单链RNA，核衣壳呈螺旋对称，有外膜，感谢阅读含血凝素和神经氨酸酶。病毒的感染力和神经氨酸酶活性，在50℃30分钟可降低约90%～99%。在无血清的营感谢阅读养液中，37℃24小时，99%以上的病毒被灭活，在5%血清中病毒较稳定。在4℃1天或几天病感谢阅读毒感染力可保持不变，在-70℃可保持数月。相对湿度20%比80%更为稳定。用20%乙醚在4℃精品文档放心下载处理16小时可使病毒完全灭活，与等量氯仿在22℃处理10分钟也可使其完全灭活。本病毒对热谢谢阅读的稳定性较其它副粘病毒为低，感染力在室温中迅速降低，几天后丧失殆尽。55℃30分钟灭活，精品文档放心下载在-25℃能良好活存。血清对其具有保护作用，可以降低灭活速度。谢谢阅读(2)血凝性所有副流感3型病毒都能凝集人“O”型、豚鼠和鸡的红细胞。新分离的牛株比人感谢阅读株更易产生血凝作用。马株凝集人和豚鼠的红细胞，但对鸡红细胞的活性较差。根据对不同红细感谢阅读胞的凝集作用和对热的敏感性，牛株又可分为2～3个亚型。牛株尚能溶解鸡或豚鼠的红细胞。欲精品文档放心下载从细胞培养物中检出新分离的毒株，以红细胞吸附试验最为敏感。谢谢阅读4.副流感病毒4型(Parainfluenzavirus,type4)谢谢阅读,.副流感病毒4型原始分离物为M－25，系1958年从美国一名无热性上呼吸道疾病患者的咽感谢阅读拭子，在猴肾细胞培养物上以红细胞吸附现象为指标分离的。患者双份血清对新分离病毒有4倍感谢阅读以上抗体增长。我国于1962年也分离到该病毒。病毒在4℃或室温凝集豚鼠红细胞，但不能在谢谢阅读37℃发生凝集。对猴红细胞也能发生明显凝集，但人“O”型红细胞的凝集很差，对鸡或大鼠的感谢阅读红细胞完全不凝集。吐温－乙醚处理可以增强血凝滴度。病毒很不稳定。它与流行性腮腺炎病毒谢谢阅读有交叉反应。研究证明，本病毒尚可分为两个亚型(A和B)。病毒在鸡胚中很难生长，在HeLa和谢谢阅读其它传代细胞中也不生长。在猴肾细胞培养物中传代后，虽不引起细胞病变，但病毒滴度很高。谢谢阅读在感染的细胞培养物中，几乎不能测出血凝活性，但以豚鼠红细胞作血细胞吸附试验，却易检出感谢阅读病毒。本病毒对实验动物无致病力，接种豚鼠可使其抗体滴度显著升高。精品文档放心下载三、麻疹病毒属(Morbillivirus)（一）犬瘟热病毒(Caninedistempervirus)感谢阅读（一）牛瘟病毒(Rinderpestvirus)主要参考文献丁铲等。1991。新城疫病毒的分子生物学研究。中国兽医杂志，17(6):52～53谢谢阅读高福，刘文军主译。1991。禽病学(第9版)。北京：北京农业大学出版社谢谢阅读侯云德著。1990。分子病毒学。北京：学苑出版社韩志辉等。1994。鸡新城疫病毒检测技术研究进展。中国动物检疫,11(5):30～31精品文档放心下载王树双等。1994。鸡新城疫病毒分子生物学致病性分析。中国动物检疫,11(5):8～10感谢阅读AppelM.J.G,etal.,1994.Caninedistemperepizooticinlions,tigersandleopardsinNorth感谢阅读,.America.J.Vet.Diagno.Invest.,6:277～288感谢阅读BarrettT,etal.,1985.Nucleotidesequenceoftheentireproteincodingregionofcanine感谢阅读distemperviruspolymerase－associated(P)proteinmRNA.VirusRes.,3:367～372谢谢阅读ChambersP,etal.,1986.Nucleotidesequenceofthegeneencodingthefusion谢谢阅读glycoproteinofNewcastlediseasevirus.J.Gen.Virol.,67:2685～2694感谢阅读ChambersP,etal.,1986.MolecularcloningofcomplementaryDNAtoNewcastle精品文档放心下载diseasevirusandnucleotidesequenceanalysisofthejunctionbetweenthegenes谢谢阅读encoding the haemagglutinin－neuraminidase and the large protein.J. Gen.谢谢阅读Virol.,67:475～486Fields,B.N.Kmipe,D.M.etal.,1990.Virulogy.SecondEdution,RavenPress.Ltd..感谢阅读HsuD,etal.,1988.Cloningofthefusiongeneofrinderpestvirus:comparativesequence感谢阅读analysiswithothermorbilliviruses.Virology,166:149～153精品文档放心下载McGinnesLW,etal.,1987.NucleotidesequenceofthegeneencodingtheNewcastle谢谢阅读diseasevirushemagglutinin－neuraminidaseproteinandcomparisonsofparamyxovirus谢谢阅读hemagglutinin－neuraminidaseproteinsequences.VirusRes.,7:187～202谢谢阅读MohinderjitSS,