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文档简介
细胞工程复习课件1细胞工程是指应用____________和_____________方法,通过___水平或______水平上的操作,按照人们的意愿来改变细胞内的________或获得________的一门综合科学技术。根据操作对象的不同,分为___________和________细胞生物学细胞细胞器分子生物学遗传物质细胞产品植物细胞工程动物细胞工程细胞工程细胞生物学细胞细胞器分子生物学遗传物质细胞产品植物细2细胞工程复习课件3若要快速的培育大量的君子兰,可采用________
技术植物组织培养技术若要快速的培育大量的君子兰,可采植物组织培养技术4细胞工程复习课件5什么叫植物的组织培养?其原理是什么?判断:1、由紫色糯性玉米种子培育出植株。2、用菊花的花瓣培育出菊花植株。一、植物的组织培养什么叫植物的组织培养?其原理是什么?判断:一、植物的组织培养61、什么叫全能性?(what?)
为什么有全能性?(why?即全能性的原因是什么?)2、动物细胞有全能性吗?所有的植物细胞都有全能性吗?3、既然细胞有全能性,为什么在生物体内,细胞并没有表现出全能性呢?要怎样才能表现出全能性呢?(how?即全能性表现的条件)4、所有细胞的全能性都一样吗?一、对全能性的理解:高等植物成熟的筛管?花粉呢?离体、一定的营养和激素、适宜的外界环境条件1、什么叫全能性?(what?)一、对全能性的理解:高等7全能性的高低排序_______________受精卵生殖细胞(如卵细胞,精子)体细胞细胞全能性的高低:______________受精卵>生殖细胞>体细胞同样是体细胞,分化程度越高,全能性越低。全能性的高低排序_______________细胞全能性的高8植物组织培养的过程是:离体的器官、组织或细胞A愈伤组织B根芽植株A、B分别表示______________。A和B阶段主要进行的细胞分裂方式是__________,B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞的_______等。A阶段要遮光,这样做的目的是______________;B阶段需要光照,原因是_________脱分化和再分化有丝分裂分化有利于诱导细胞的脱分化叶绿素的合成需要光,光合作用需要光什么叫愈伤组织?有何特点?脱分化和再分化的条件一样吗?整个组织培养过程有哪些注意事项?植物组织培养的过程是:离体的器官、组织或细胞A愈伤组织B根芽9组织培养时应注意的事项:1、成功的关键是避免微生物的污染。所有实验用具都必须严格灭菌,接种过程要进行严格的无菌操作。2、离体的细胞、组织和器官称为外植体,外植体一般选择分裂能力强的细胞。(为什么?)3、培养基为固体培养基。配制的培养基中要有植物生长发育所需的全部营养,其中____________激素的用量比例对器官发生起决定作用。4、脱分化要避光,再分化要有光照。(为什么?)5、试管苗移栽到大田之前,还要进行后期培养,形成植株后再移栽。练习连接1、3生长素和细胞分裂素组织培养时应注意的事项:练习连接1、3生长素和细胞分裂素10指出其中的错误:1、花药、胚不能作为组织培养的材料。2、组织培养时为保证营养供应,应加大蔗糖溶液的浓度。3、同一株绿色开花植物不同部位细胞经培养获得愈伤组织的基因型相同。指出其中的错误:11细胞工程复习课件12应用:1、微型繁殖(取材少,繁殖快,且能保持优良品种的遗传特性)2、培育脱毒苗(如何操作?为什么?脱毒苗与抗毒苗一样吗?)3、人工种子应用:134、单倍体育种5、突变体的利用(为什么容易产生突变体?)6、获得一些细胞产物也要用到组织培养技术,但属于_____生殖。用植物组织培养获得个体属于有性生殖还是无性生殖?为什么?植物组织培养获得个体的过程,可能发生的变异来源有_______?4、单倍体育种也要用到组织培养技术,但属于_____生殖。用14二、植物体细胞杂交简述其过程?有何意义?原理是什么?获得杂种植株的过程属于什么变异?二、植物体细胞杂交简述其过程?有何意义?原理是什么?获得杂种15根据图示,分别用哪两种方法获得可育的白菜—甘蓝?根据图示,分别用哪两种方法获得可育的白菜—甘蓝?16偶然在一杂志上,看到“眼镜王蛇毒单克隆抗体”的制备这一标题。当你看到这一标题时,能否根据我们所学知识,请你设计一过程,理论上我们可以如何获得眼镜王蛇毒单克隆抗体?(实验动物为小鼠)偶然在一杂志上,看到“眼镜王蛇毒单克隆抗体”的制备这一标题。17三、单克隆抗体三、单克隆抗体18细胞工程复习课件19单克隆抗体的概念:单个_________,通过____形成细胞群,这样的细胞群产生的___________________的抗体杂交瘤细胞克隆化学性质单一,特异性强单克隆抗体的优点:___________________________________特异性强,灵敏度高,可大量制备.单克隆抗体的概念:杂交瘤细胞克隆化学性质单一,特异性强单克隆201、获取B淋巴细胞之前,注射抗原的目的是什么?2、怎样知道小鼠体内已经产生了相应的B细胞?3、将小鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合后,至少经两次筛选才得到所需的杂交瘤细胞。两次筛选的目的是什么?最后得到的杂交瘤细胞具有什么特点?4、从哪里获得单克隆抗体?1、获取B淋巴细胞之前,注射抗原的目的是什么?21单克隆抗体制备的过程:将抗原注入小鼠体内,目的获得_______________能产生特异性抗体的B淋巴细胞(=__细胞)将鼠的骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合,在___________________上筛选出___________特定的选择性培养基杂交瘤细胞杂交瘤细胞进行____________________,经多次筛选,获得___________________________________克隆化培养和抗体检测足够数量能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞浆杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养,或注射到小鼠腹腔内增殖,从___________或________中提取大量单克隆抗体.细胞培养液小鼠腹水单克隆抗体制备的过程:将抗原注入小鼠体内,目的获得_____221、单克隆抗体制备的过程中,需要使用到的动物细胞工程技术手段_________________________依据的原理分别是_____________________动物细胞融合和动物细胞培养2、制备单克隆抗体的原理是:___________________每种效应B细胞只能产生一种特异性抗体,瘤细胞能无限增殖3、应用:什么叫生物导弹?如何制成?有什么优点?其利用了单抗的什么特点?1、单克隆抗体制备的过程中,需要使用到的动物细胞工程技术手段23四、动物细胞培养1、动物细胞培养的过程?原理?2、概念辨析:细胞株与细胞系原代培养与传代培养3、动物细胞培养的培养液相当于生物体内的什么液体?四、动物细胞培养1、动物细胞培养的过程?原理?24细胞工程复习课件25动物细胞培养的过程:取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养液中进行原代培养贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理分散成单个细胞,制成细胞悬液转入培养液中进行传代培养.贴壁生长和接触抑制现象动物细胞培养的过程:取动物组织块剪碎组织用胰蛋白酶或胶原蛋白26细胞工程复习课件27传代培养先用___________处理贴满瓶壁的细胞,然后再分瓶培养;10代以内的细胞保持正常的_________细胞传到10—50代左右时,大多数细胞增殖会_________,以至于完全停止,最终___________;但少数细胞遗传物质会发生改变,克服细胞寿命的自然极限,获得__________。胰蛋白酶等二倍体核型逐渐缓慢衰老死亡不死性传代培养胰蛋白酶等二倍体核型逐渐缓慢衰老死亡不死性282、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10以内的细胞,为什么?1、细胞株与细胞系区别?能保持正常的二倍体核型2、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10以内的细胞,为什29动物细胞培养的条件(模拟体内内环境)如何?与植物组织培养进行比较动物细胞培养的条件(模拟体内内环境)如何?与植物组织培养进行30(2011安徽卷)Ⅱ.(9分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_______和_______之间。(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_______和________。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以__________________________增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。胰蛋白(或胶原蛋白)启动子终止子Taq酶对干扰素基因特异的DNA引物对扩大细胞贴壁生长的附着面积(2011安徽卷)Ⅱ.(9分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能31植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较:比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合的方法诱导方法结果生物膜流动性植物细胞的全能性生物膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合诱导细胞融合物理,化学物理,化学,灭活的病毒获得杂种植株
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