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文档简介
41I本文件按照GB/T1.1—2020《标准化本文件起草单位：河南省农业科学院畜牧研究所、河南联科物联网科技站、河南省兽药饲料监察所、河南省动物卫生监督所、河南省动物疫病预防控制病预防控制中心、南阳市动物卫生监督所、西峡县动物卫生监督所、邓州市动物动物疫病预防控制中心、南阳宛城区动物卫生监督所、淅川县农业农村局、濮阳县动物卫生监督所、新野县动物疫病预防控制中心、南阳市卧龙区卧龙岗街道办本文件主要起草人：李海利、贾松涛、王春笋、李清永钦、吴亚权、朱进华、王金好、王泽仁、冯东亚、管素2下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包NY/T2664—2014标准化养殖场NY/T5038—2006无公害食品家禽养殖生产管从鸡蛋清或蛋壳膜中提取、精制获得的畜牧业用溶菌酶。由129个氨基酸新鲜或冰冻蛋清250g，用试纸测pH应为8左右，解冻过筛，除去蛋清中的脐带、蛋壳碎片及保持在0℃~5℃,搅拌吸附5h，0℃~5℃静置过夜。3把上层清液渐渐倾出，下层树脂用清水洗去吸附的蛋白质，反复洗4次，注将树脂抽滤除去水分。另取0.15mol/L（pH6.5）磷酸缓冲液1min，每次搅拌后减压抽滤去水分，再用10%硫酸铵200mL分4次洗脱溶菌酶，每次搅拌半小时，过滤抽干，合并洗脱液，按总体积加入32%(质量体积比)固体硫酸铵使含量达到44.1.4透析将粗制品加蒸馏水50mL溶解,装入透析袋,0℃~5℃透析24h～36h,除去大部分硫酸铵得透析液。取蛋壳膜用循环水冲洗后粉碎，加1.5倍量0.5%氯化钠溶液，用2m40℃搅拌提取45min，过滤，滤渣再提取2次，合并前2次滤液，4.2.3精制于沸水浴中迅速升温至80℃,随即搅拌冷却，再用乙酸调pH至4.6，使卵蛋白在等电点沉淀，离倾去上层浑浊液。收取黏附于容器的溶菌酶-聚丙烯酸凝聚物，悬于水中，加碳酸钠溶解凝聚物。再加入聚丙烯酸用量1/25的50%氯化钙溶液使溶菌酶解离，用分离上清液(沉淀用硫酸处理除去硫酸钙，回收聚丙烯酸氢氧化钙，取清液加入氯化钙到5%，静置结晶，粗结晶溶于pH4.6乙酸溶液中，分去不溶物进行再结4精密称取本样品4mg，加磷酸缓冲液取磷酸二氢钠11
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