【公开课】探究培养液中酵母菌种群数量的变化（课件）

探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化探究培养液中酵母菌种群数量的变化探究·实践自然条件下，任何生物的种群都与环境中其他生物密切联系。严格地说，探究单个种群数量的变化只有在实验室才有可能实现。思考：1.如何在实际操作中设置该实验的时间变量？2.怎样培养酵母菌？3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？（1）血细胞计数板的介绍（2）计数过程中的注意事项4.该实验是否需要对照和重复实验？5.如何记录和处理实验结果？6.据实验结果绘制的曲线图接近哪种增长模型，为什么？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化问题：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？预实验：确定接种量、培养条件和时间实验：培养基的配制与灭菌→接种酵母菌→培养→不同时间取样→计数、记录探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化探究培养液中酵母菌种群数量的变化-参考视频1d2d3d4d5d6d7d7只试管在不同时间取样（自变量）和对照组之间形成对比注意：非振荡培养时，酵母菌通常沉于试管底部，需要振荡摇匀后再取样计数。说明：每只试管只取样一次。全班分组实验时，自己组做实验不需要重复，可以把全班其它的组实验视作重复实验（类似模拟pH稳态调节的实验）。计数室计数室模拟题提示：计数采用抽样检测的方法，即从培养液中取出部分（抽样），通过血球计数板计数，然后计算出培养液中酵母菌的数量。个人认为抽样检测的实质就是抽样调查（即样方法），但模拟题一定要回答成“抽样检测”。计数室（16×25）1×1×0.1mm3大方格中方格小方格25×1616×25根据计数室规格不同选择不同的中方格进行计数。待酵母菌在计数室中沉降再进行计数。问题：图示中方格中有多少个酵母菌？说明：边角上的个体一般只计数中方格线左边、上边和左上角的个体。问题：若计数室中酵母菌数量过多，难以计数，应该怎么办？种群密度=计数室中的种群密度×稀释倍数一般是0.1mm3，即1×104mL用计数的中方格中的个体数估算计数室中的个体数计数室中的种群密度=计数室中的种群数量÷计数室体积思考讨论：1.如何在实际操作中设置该实验的时间变量？2.怎样培养酵母菌？3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？（1）血细胞计数板的介绍（2）计数过程中的注意事项4.该实验是否需要对照和重复实验？5.如何记录和处理实验结果？6.据实验结果绘制的曲线图接近哪种增长模型，为什么？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化活化纯化扩大培养同时接种8瓶同时接种，培养基体积相同，接种量相同，28℃、150rpm/min，分别培养图示小时后，取出依次放在4℃冰箱中保存，学生分小组同时计数。1.如何在实际操作中设置该实验的时间变量？培养时间/h:036912151821酵母菌探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化2.怎样培养酵母菌？为什么？培养瓶用微孔封口膜封口，28℃恒温、振荡培养。微孔封口膜封口既能避免杂菌污染培养液，又能保证培养过程中的气体流通。28℃是酵母菌出芽生殖比较适宜的温度。振荡有利于促进溶氧，利于酵母菌有氧呼吸供能；促进培养液中营养成分与酵母菌菌体充分接触，有利于酵母菌出芽生殖。探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化导流凹槽两个计数室所在区域血细胞计数板3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化血细胞计数板侧面观盖上盖玻片的示意图3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化血细胞计数板1个计数室放大示意图每个计数室上各刻有一方格网，每个方格网共分九个大格，中央大方格为酵母菌计数区。3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化血细胞计数板1个大方格放大大方格放大每个大方格含25个中方格，每个中方格有16个小方格，共400个小方格。每个大方格面积为1×1mm2，每小方格面积为1/400mm2。3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化血细胞计数板1个大方格放大大方格放大每个大方格的容积为0.1mm3，即0.1μL。3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化先盖盖玻片，再将培养液滴加于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。盖盖玻片和滴加培养液，哪个步骤在前？3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化为什么要待酵母菌全部沉降到计数室底部再计数？吸取培养液之前为什么要将培养液摇匀？使菌体分散开来、混和均匀，减少实验误差。酵母菌全部沉降到计数室底部，减少实验误差。3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化用无菌水稀释至每小格细胞数目为5~10个如果小方格内酵母菌过多，怎么办？稀释100倍3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化计数的包括活菌和死菌。可以用亚甲基蓝对菌体进行染色，被染成蓝色的是死菌，没有染色的是活菌。计数的酵母菌都是活的吗？3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化对于压在中方格界线上的酵母菌和酵母菌芽体，应当怎样计数？压线的菌体，计上不计下，计左不计右。离开母体的芽体，无论大小均算一个。如果正在出芽，芽体大小达到或超过母细胞一半时，芽体可算1个。3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化如果每一个中格（一个计数室共25个中格）平均有酵母菌40个，用来计数的培养液稀释了100倍，请估算每1mL原始酵母菌培养液有酵母菌多少个？任务1：算一算40×25÷0.1×1000×100=1×109（个/mL）3.如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数？探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化本实验有前后对照，可以不单设对照组。如果担心培养过程中有污染，则需要单设不接种酵母菌的空白对照组。4.本实验需要设置对照和重复吗？本实验需要设置重复以减少实验误差。如果全班同学所测量的酵母菌来自同一培养样品，可以取全班同学计数的平均值作为实验结果，或者每名同学计数3个或3个以上计数室求平均值。探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化5.如何记录和处理实验结果？全班同学分成若干组，每组计数一个培养时段。每人计数一个计数室，以小组计数平均值作该时段估值。0h9h12h18h15h21h6h3h探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化学生姓名左上中格右上中格正中中格左下中格右下中格计数室估算值（个/0.1μL）个人记录表格培养时间学生1学生2学生3学生4学生5小组估算值（个/mL）小组统计表格探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化全班汇总表格：单位（109

个/mL）培养时间0h3h6h9h12h15h18h21h菌体浓度探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化全班汇总表格：单位（109

个/mL）培养时间0h3h6h9h12h15h18h21h菌体浓度0.100.472.574.415.956.516.626.54探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化6.根据实验结果绘制出坐标曲线图随培养时间继续延长，培养液的环境容纳量会持续下降，酵母菌种群数量将下降。探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化进一步探究请你对影响酵母菌种群增长的因素做出推测，并设计实验进行验证。提示：实验结果受到菌种、培养温度、pH、通O2量、培养液中营养物质种类及比例、培养液浓度等各种内外因素的影响，可以选择其中的一个或两个为自变量进一步探究。探究·实践探究培养液中酵母菌种群数量的变化【练一练】将样液稀释100倍，采用血细胞计数板(规格为1mm×1mm×0.1mm)计数，观察到的计数室中细胞分布见下图，则培养液中酵母菌的密度是________个/mL，10mL培养液含___________个酵母菌。1×108543441×10920/80=1/4（代表每个小方格中的个数）共25×16=400个小方格计数室溶液体积=1×1×0.1×10-3mL酵母菌种群密度=(20/80)×4×106×100=1×108个酵母菌种群密度=(20/80)×400×104×100=1×108个每个小方格中的个数小方格总数计数室溶液体积稀释倍数【练一练】将样液稀释100倍，采用血细胞计数板(规格为1mm×1mm×0.1mm)计数，观察到的计数室中细胞分布见下图，则培养液中酵母菌的密度是________个/mL，10mL培养液含___________个酵母菌。1×108543441×1095+4+3+4+4=20个（大方格）25个中方格中应是20×5=100个酵母菌种群密度=100÷（1×10-4）÷10-2=1×108个/mL1×108×10mL=1×109个酵母菌种群密度=（大方格中酵母菌总数/溶液体积）×稀释倍数1：该同学用长和宽为2mm，深度为0.1mm的血球计数板，用五点取样法读取酵母菌有40个，其中稀释了1