复方丹参片检验方法验证方案

复方丹参片检验方法确认方案文件编号：起草人批准人

部门 签名 日期xxxxxxx概述：复方丹参片质量标准为已验证的法定标准，含量测定方法为HPLC法，其它项目为试验室日常测试步骤。依据2023年版《药品质量治理标准》的要求，需要对含量测定检验方法进展确认，包括专属性、周密度、准确度三个方面。目的：确认复方丹参片含量测定检验方法在我公司质量把握试验室的适用性。适用范围：复方丹参片含量测定检验方法条件：检验操作规程齐全设备相关标准操作规程齐全检验、检测仪器均已校验含量测定含丹参以丹参酮IIA计检测方法确认确认要求及标准〔〕硅胶为填充剂；以甲醇-水-〔73∶27〕为流淌相；检测波长为270nm。理论板数以丹IIA20231.5。专属性空白样品溶液在与丹参酮IIA积小于比照品峰面积的3%。周密度RSD应不得超过2.0%准确度丹参酮IIA的加样回收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。材料和分析方法试剂：IIA来源：复方丹参片复方丹参片来源：试剂名称：甲醇来源：仪器：高效液相色谱仪型号：型号：6.2.3．溶液配置：

6.2.3.1.比照品溶液配置取丹参酮IIA比照品适量，周密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含40微克的溶液即得。6.2.3.2供试品溶液 取复方丹参片20片，除去糖衣片，周密称定，研细，取约1g，周密称定后置具塞棕色瓶中，周密参与甲醇25ml，密塞称定重量，超声处理15空白物溶液取空白物20片，除去糖衣片，周密称定，研细，取约1g，周密25ml15分钟，放冷，贮存液A周密称取丹参酮IIA醇制成每1ml含120微克的溶液即得。6.2.4分析方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-〔7327〕为流淌相；检测波长为270nm10ul。检验方法确实认专属性-水-〔73∶27〕为流淌相；检测波长为270nm。理论丹参酮IIA峰计算应不低于2023，分别1.5。测定分别周密吸取比照品溶液与空白样品溶液各1，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图IIA3%。周密度重复性6针〔10ul〕，记录色谱图。确认合格标准6针比照品溶液、供试品溶液峰面积的RSD应不得超过2.0%。中间周密度在不同的日期和不同的仪器，不同检验员〔3人〕按6.2.3.2的方法重制备样液，分别计算含量。RSD2.0%，3RSD应不得超过2.0%。溶液编号容量瓶〔溶液编号容量瓶〔参与贮存液〔ml〕A参与空白比照物〔g〕ml〕进样浓度〔／ml〕ug16.012528.827.012533.636.00.8203648.012538.457.00.8204269.012543.2710.012548811.012552.899.00.82054溶液1～9:将表2中规定量的贮存液A25ml15分钟，放冷，再称定重量并补足，摇匀滤过取续滤液置棕色瓶中即得。周密吸取9份样液各10ul，注入液相色谱仪，测定，计算回收率计算公式：计算公式：测得值100%回收率〔%〕6.3.3.3．确认合格标准RSD2.0%。=参与的比照品量丹参酮IIA的加样回收率收率98.0%～102%，回收率含量测定含丹参以丹酚酸B计检测方法确认确认要求及标准〔〕硅胶为填充剂；以乙腈－甲醇－甲酸－水〔10：30：1：59〕为流淌相；检测波长为286nmB4000。B3%。周密度RSD应不得超过2.0%IIA98.0%～102%RSD小于2.0%。材料和分析方法试剂：IIA复方丹参片来源：来源：来源：

空白比照物：按复方丹参片质量标准制法自制〔缺丹参〕仪器：高效液相色谱仪型号： 编号： 色谱柱编号：溶液配置：B比照品

编号：适量，周密称定，加水制成每1ml含60微克的溶液即得。7.2.3.2供试品溶液取复方丹参片200.15g，周密称定后置50ml具塞量瓶中，加水适量，超声处理30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀离心取上清夜即得。7.2.3.3.空白物溶液取空白比照物20片，除去糖衣片，周密称定，研细，取约0.15g，周密称定后置50ml具塞量瓶中，加水适量，超声处理30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀离心取上清夜即得。7.2.4分析方法：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－甲醇－甲酸－水〔10：30：1：59〕为流淌相；检测波长为286nm；进样量为10ul。检验方法确实认专属性醇－甲酸－水〔10：30：1：59〕为流淌相；检测波长为286nm。理论板数以丹酚酸B4000。测定分别周密吸取比照品溶液与空白样品溶液各1，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。B3%。周密度重复性6针〔10ul〕，记录色谱图确认合格标准6针比照品溶液、供试品溶液峰面积的RSD应不得超过2.0%。中间周密度在不同的日期和不同的仪器，不同检验员〔2人〕按7.2.3.2的方法重制备样液，分别计算含量。RSD2.0%，3RSD应不得超过2.0%。准确度取丹酚酸B比照品适量，周密称定，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含60微克的溶液。取上述〔7.2.3.2〕研细的复方丹参片样品0.09g，周密称定10份，分别置于50ml具塞量瓶中，并分别参与比照品溶液0、10、10、10、20、20、20、30、30、30ml，参与适量水超声处理30分钟，放冷后用水补足至刻度，摇匀离心取上清夜即得。周密吸取10份样液各10ul，注入液相色谱仪，测定，计算回收率。计算公式：

回收率〔%〕

参与的比照品量

100%7.3.3.3B98.0%～102%RSD小于2.0%。含量测定含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷R1、人参皂苷Re计检测方法确认确认要求及标准〔〕AB1波长为203nm。理论板数以人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000，人参皂苷Rg1与人参Re1.8.2时间〔分钟〕流淌相A〔％〕流淌相B〔％〕0～3535～551919～298181～7155～70297170～10029～4071～603%。周密度RSD应不得超过2.0%Rg1Rb1R1Re率大于收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。材料和分析方法试剂：

编号：号：比照品：丹参酮IIA样品： 试剂名称：乙腈

编号：

试剂名称：甲醇 批号：空白比照物：按复方丹参片质量标准制法自制〔缺三七〕溶液配置：

来源：Rg1Rb1参皂苷R1Re比照品适量，加70%甲醇制成每1ml含参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1各0.2mg、人参皂苷R1及人参皂苷Re各0.05mg的混合溶液即得。8.2.3.2供试品溶液取复方丹参片10片，除去糖衣片，周密称定，研细，1g50ml70%50ml3070%8.2.3.3.101g，周密50ml70%50ml30分钟，放70%8.2.4分析方法：AB120ul。检验方法确实认专属性AB2203nm。理论板数以人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的分别度应大于1.8.测定分别周密吸取比照品溶液与空白样品溶液各2，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。3%。周密度重复性6图。确认合格标准6针比照品溶液、供试品溶液峰面积的RSD应不得超过2.0%。中间周密度在不同的日期和不同的仪器，不同检验员〔3人〕按8.2.3.2的方法重制备样液，分别计算含量。RSD2.0%，3RSD应不得超过2.0%。准确度周密称取人参皂苷Rg1比照品、人参皂苷Rb1比照品、人参皂苷R1对照品、人参皂苷Re比照品适量，加70%甲醇制成每1ml含参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1各0.2mg、人参皂苷R1及人参皂苷Re各0.05mg的比照品溶液。取上述〔8.2.3.2〕细的复方丹参片样品0.6g，周密称定10份，分别置于具塞量瓶中，并分别参与比照品溶液0、10、10、10、20、20、20、30、30、30ml，超声处理30分