肉制品中总糖-总糖测定的技能要求

总糖的测定的技能要求

——直接滴定法试剂一仪器二样品检测三目录页结果计算四说明及注意事项五一、试剂

1.菲林试剂甲液（碱性酒石酸铜甲液）：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基兰，用蒸馏水溶解。移入1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容。2.菲林试剂乙液（碱性酒石酸铜乙液）：称取50g酒石酸钾钠，75g氢氧化钠及4g亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，移入1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容。

直接滴定法一、试剂3.乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加入3ml冰乙酸，加水溶解并稀释至100ml。容。4.亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。5.甲基红指示剂：称取0.1g甲基红，用少量95%的乙醇溶解后，并稀释至100ml。6.氢氧化钠溶液：称取200g固体氢氧化钠，用水溶解并稀释至1000ml。直接滴定法一、试剂7.葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经过96℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5ml盐酸，并以水定容至1000ml。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖。8.盐酸溶液（1+1）直接滴定法二、仪器1.酸式滴定管2.电子分析天平：感量0.0001g3.可调电炉4.恒温水浴锅直接滴定法样品检测三1.样品预处理2.菲林试剂的标定3.试样预测4.试样测定直接滴定法三、样品检测（一）样品预处理

1.称取混匀后的试样约5-10g（精确至0.001g）于250ml容量瓶中，加入50ml水，在45℃±1℃的水浴上加热1h，并时时振揺。2.水浴结束后，慢慢加入5ml乙酸锌及5ml亚铁氰化钾溶液，冷却至室温，加水至刻度，混匀，静置30min，充分沉淀。3.用滤纸进行过滤，弃去初滤液，准确吸取50ml滤液于100ml容量瓶中，加入5ml盐酸溶液，在68℃-70℃的水浴中加热15min，取出冷却。

直接滴定法三、样品检测

4.冷却后加两滴甲基红指示剂，用氢氧化钠溶液中和至中性，加水至刻度，混匀，作为试样溶液。

直接滴定法三、样品检测（二）菲林试剂的标定准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5mL，置于250mL锥形瓶中，加水10mL，加玻璃珠3粒。从滴定管预加约9mL葡萄糖标准溶液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒，趁热以每2秒一滴的速度滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点（若滴定体积小于0.5ml或者大于1ml，则需要调整预加入葡萄糖标准溶液的量）。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值，进行计算。

直接滴定法三、样品检测公式：

F=c•V式中：F—10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mg;c—葡萄糖标准溶液的浓度，mg/mL；

V—标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL。直接滴定法三、样品检测（三）试样预测

吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00mL，置于250mL锥形瓶中，加水10mL。加玻璃珠3粒，加热使其在2分钟内至沸，准确沸腾30秒钟，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加试样溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时，以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录试样溶液消耗的体积。直接滴定法三、样品检测（四）试样测定

吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00mL，置于250mL锥形瓶中，加玻璃珠3粒，从滴定管中加入比预测时试样溶液消耗总体积少1mL的试样溶液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾30秒钟，趁热以每2秒1滴的速度继续滴加试样溶液，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗试样溶液的总体积。同法平行操作3份，取平均值。。直接滴定法四、结果计算式中：X—试样中总糖的含量（以葡萄糖计）单位为g/100g；m—样品质量，g；

F—10mL碱性酒石酸铜相当于葡萄糖的质量，mgV0—试样经前处理后定容的体积，mL；V1—测定时平均消耗试样溶液体积，mL；

2—测定水解时稀释倍数。注：两次独立测定结果的绝对差值不超过1%

取平行试验的算术平均值表示精确到0.1%。直接滴定法五、说明及注意事项1.碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。2.在称取样品之前要先把样品制备成混匀的试样，试样的制备方法参考国标GB/T9695.19—2008。3.影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度、煮沸时间和滴定速度。直接滴定法五、说明及注意事项4.滴定必须在沸腾条件下进行，一是可以加快还原糖与的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。直接滴定法五、说明及注意事项

5.试样预测时，当试样中还原糖浓度过高时应当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗试样溶液的体积控制在与标定菲林试剂时所消耗的葡萄糖标准溶液的体积相近，约在10ml左右。当溶