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文档简介

配制培养基的基本原则

1.明确微生物特点和培养目的培养自养型微生物的培养基完全由简单的无机物组成。异养型微生物的培养基中至少要有一种有机物,通常是葡萄糖。

1.明确微生物特点和培养目的培养细菌常用肉汤蛋白胨培养基;培养放线菌常用高氏一号培养基;培养酵母菌常用麦芽汁培养基;培养霉菌常用察氏培养基。

2.营养物质的浓度和配比要合适培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好。培养基中各营养物质之间的配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,特别是碳氮比(C/N)。

2.营养物质的浓度和配比要合适细菌和酵母菌培养基中C/N约为5:1

霉菌培养基中C/N约为10:1

3.控制合适的pH值

要想满足不同类型微生物的生长繁殖或代谢的需要就必须控制合适的pH值。一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7~7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6范围内生长。为了尽可能减缓培养过程中pH的变化,在配制培养基时,需要加入一定的缓冲物质,如磷酸盐类、碳酸钙等。

3.原料的选择

在实验研究中可以选择成分清晰,纯度较高的培养基。但在发酵工业中,应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,因为培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。

如微生物单细胞蛋白的工业生产常用糖蜜、乳清等作为培养基的原料。

培养基的类型

1.按营养成分的来源分天然培养基:天然动植物器官和抽提物实验室常用的牛肉膏蛋白胨培养基优点:取材广泛、营养全面丰富,制备方便,价格低廉,适用于大规模培养微生物;缺点:成分复杂,每批成分不稳定

1.按营养成分的来源分合成培养基:用化学成分完全了解的物质配制而成实验室常用的高氏1号培养基优点:成分精确、重复性强缺点:配制复杂,生长缓慢,价格较贵,不宜用于大规模生产

1.按营养成分的来源分半合成培养基:一部分天然物质,补充少量无机盐类实验室常用的马铃薯蔗糖培养基应用最广,能使绝大多数微生物良好生长

2.按物理状态分

液体培养基:溶解混合调pH值利于生长和积累代谢产物,常用于大规模工业化生产

2.按物理状态分

固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(约2%的琼脂或5%~12%的明胶)

2.按物理状态分

半固体培养基:在液体培养基中加入少量凝固剂(如0.2%~0.5%的琼脂)而制成

特殊用途:穿刺培养观察细菌的运动能力、厌氧菌培养

2.按培养基的用途分

基础培养基:基本营养物质牛肉膏蛋白胨培养基

2.按培养基的用途分

选择培养基:用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基加入特殊的营养物质或化学物质,抑制不需要微生物的生长利用以纤维素或石蜡油为唯一碳源的选择培养基,从混杂微生物群体分离出能分解纤维素或石蜡油的微生物

S.S培养基

用于沙门菌和志贺菌的筛选,在SS培养基上形成不分解乳糖的无色菌落,大肠杆菌等不致病的肠道细菌多为分解乳糖的粉红色菌落

2.按培养基的用途分

加富培养基:在基础培养基中加入某些特殊营养物质(血液、血清、酵母浸膏)制成的一类营养丰富的培养基

用来富集或分离某种微生物增加所要分离的微生物的数量,使其形成生长优势,达到分离该种微生物的目的

2.按培养基的用途分

鉴别培养基:用于鉴别不同类型微生物的培养基加入特殊化学物质,使微生物的代谢产物与此特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化微生物的快速分类鉴定配制培养基的基本原则

1.明确微生物特点和培养目的培养自养型微生物的培养基完全由简单的无机物组成。异养型微生物的培养基中至少要有一种有机物,通常是葡萄糖。

1.明确微生物特点和培养目的培养细菌常用肉汤蛋白胨培养基;培养放线菌常用高氏一号培养基;培养酵母菌常用麦芽汁培养基;培养霉菌常用察氏培养基。

2.营养物质的浓度和配比要合适培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好。培养基中各营养物质之间的配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,特别是碳氮比(C/N)。

2.营养物质的浓度和配比要合适细菌和酵母菌培养基中C/N约为5:1

霉菌培养基中C/N约为10:1

3.控制合适的pH值

要想满足不同类型微生物的生长繁殖或代谢的需要就必须控制合适的pH值。一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7~7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6范围内生长。为了尽可能减缓培养过程中pH的变化,在配制培养基时,需要加入一定的缓冲物质,如磷酸盐类、碳酸钙等。

3.原料的选择

在实验研究中可以选择成分清晰,纯度较高的培养基。但在发酵工业中,应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,因为培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。

如微生物单细胞蛋白的工业生产常用糖蜜、乳清等作为培养基的原料。

培养基的类型

1.按营养成分的来源分天然培养基:天然动植物器官和抽提物实验室常用的牛肉膏蛋白胨培养基优点:取材广泛、营养全面丰富,制备方便,价格低廉,适用于大规模培养微生物;缺点:成分复杂,每批成分不稳定

1.按营养成分的来源分合成培养基:用化学成分完全了解的物质配制而成实验室常用的高氏1号培养基优点:成分精确、重复性强缺点:配制复杂,生长缓慢,价格较贵,不宜用于大规模生产

1.按营养成分的来源分半合成培养基:一部分天然物质,补充少量无机盐类实验室常用的马铃薯蔗糖培养基应用最广,能使绝大多数微生物良好生长

2.按物理状态分

液体培养基:溶解混合调pH值利于生长和积累代谢产物,常用于大规模工业化生产

2.按物理状态分

固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(约2%的琼脂或5%~12%的明胶)

2.按物理状态分

半固体培养基:在液体培养基中加入少量凝固剂(如0.2%~0.5%的琼脂)而制成

特殊用途:穿刺培养观察细菌的运动能力、厌氧菌培养

2.按培养基的用途分

基础培养基:基本营养物质牛肉膏蛋白胨培养基

2.按培养基的用途分

选择培养基:用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基加入特殊的营养物质或化学物质,抑制不需要微生物的生长利用以纤维素或石蜡油为唯一碳源的选择培养基,从混杂微生物群体分离出能分解纤维素或石蜡油的微生物

S.S培养基

用于沙门菌和志贺菌的筛选,在SS培养基上形成不分解乳糖的无色菌落,大肠杆菌等不致病的肠道细菌多为分解乳糖的粉红色菌落

2.按培养基的用途分

加富培养基:在基础培养基中加入某些特殊营养物质(血液、血清、酵母浸膏)制成

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