小课讨论乙肝疫苗

乙型肝炎发病机理

乙肝病毒感染人体后，病毒本身并不直接引发肝细胞病变，只是在肝细胞内生存、复制，其所复制抗原表示在肝细胞膜上，激发人体免疫系统来识别，并发生反应。假如机体免疫功效健全，免疫系统被激活后识别乙肝病毒，攻击已感染病毒肝细胞并去除之

急性乙肝假如机体免疫功效被激活，但处于低下状态，机体对已感染病毒肝细胞重复攻击，不过又不能完全去除之，造成肝组织慢性炎症

慢性乙肝假如机体免疫功效处于耐受状态，不能识别乙肝病毒，所以不攻击已感染病毒肝细胞，病毒与人体“和平共处”

乙肝病毒携带者小课讨论乙肝疫苗第1页保护性应答天然免疫特异性免疫免疫耐受免疫损伤机体对乙肝V/乙肝疫苗免疫应答小课讨论乙肝疫苗第2页天然免疫

IFN

抗病毒（IFN-,),激活NK(IFN-）

NKcell

杀伤病毒感染细胞特异性免疫细胞免疫:CD8+CTL

杀伤病毒感染细胞体液免疫:Ab

中和作用，调理作用机体对乙肝V/乙肝疫苗保护性免疫应答小课讨论乙肝疫苗第3页小课讨论乙肝疫苗第4页MenuFB小课讨论乙肝疫苗第5页小课讨论乙肝疫苗第6页TheadaptiveimmuneresponsetoHBVCD4+ThcellCD8+CTLHepatocyteTNF-aIFN-gLysisIFN-gAPCYYBcellYTh2>Th1cytokinesa-HBea-HBca-HBs小课讨论乙肝疫苗第7页

抗原递呈外源性抗原：可溶性病毒抗原，或完整Virus衣壳蛋白被APC摄取处理，以MHCII类分子递呈给CD4+T细胞；内源性抗原：肝炎病毒感染宿主细胞后合成蛋白，以MHCI类分子递呈给CD8+Th细胞识别；小课讨论乙肝疫苗第8页活化增殖分化CD4T细胞活化增殖分化为Th1和Th2Th2辅助B细胞活化增殖分化Th1辅助CD8T细胞活化增殖和分化小课讨论乙肝疫苗第9页效应阶段体液免疫应答效应CTL效应Th1效应小课讨论乙肝疫苗第10页Mechanismsofactionofanti-HBs?LiverYYYYRapidclearanceofinfectionImproveantigenpresentationImproveTcellresponseYmFTPreventcellentryHBVAnti-HBsUptakeviaFcR小课讨论乙肝疫苗第11页小课讨论乙肝疫苗第12页小课讨论乙肝疫苗第13页保护性应答天然免疫特异性免疫免疫耐受免疫损伤机体对乙肝V/乙肝疫苗免疫应答小课讨论乙肝疫苗第14页免疫耐受大多见于母胎传输病人，因胎儿期感染，故发生免疫耐受。病人表现病毒抗原阳性，极难治疗。但病人无抗体、无肝功效损伤如有外因，可诱导发病。小课讨论乙肝疫苗第15页保护性应答天然免疫特异性免疫免疫耐受免疫损伤机体对乙肝V/乙肝疫苗免疫应答小课讨论乙肝疫苗第16页*II型超敏反应造成肝组织损伤（ADCC，CDC，NK）*HBsAg+anti-HBSimmunecomplexesⅢHypersensitivity

血管炎，关节炎，皮疹及肾脏损伤.*CTL杀伤作用乙肝病毒所致超敏反应小课讨论乙肝疫苗第17页Hostfactorsdetermining

responsetoHBvaccinesGenderAgeConcomitantillnessGeneticfactor-MHC小课讨论乙肝疫苗第18页ResponsetoHBvaccine:

multipleHLAgenesareinvolved

GOODRESPONSEisassociatedwith DRB1*010- DR5 DPB1*040- DQB1*0301 DQB1*0501NON/POORRESPONSEisassociatedwith

DRB1*07 DPB1*1101 DQB1*020-Desombereetal.TissueAntigens1998;51:593-604小课讨论乙肝疫苗第19页第八章MHC分子1.概念：主要组织相容性抗原、主要组织相容性复合体、人类白细胞抗原2.HLA复合体结构及遗传学特点（多态性、单元型、连锁不平衡）3.MHCI类抗原和II类抗原分子结构、结构功效和组织分布4.HLA生物学功效小课讨论乙肝疫苗第20页

HLA复合体结构HLA复合体位于人第六染色体短臂,有224个基因座(locus)，按其产物结构、分布与功效分为两类。小课讨论乙肝疫苗第21页经典HLA-I/II类抗原1．分子结构

(1)肽结合区

(2)Ig样区

(3)跨膜区

(4)胞浆区2．组织分布小课讨论乙肝疫苗第22页MHC分子生物学功效1．抗原递呈

MHC分子抗原结合凹槽选择性结合抗原肽→形成MHC分子-抗原肽复合物→以MHC限制性方式供T细胞识别→开启特异性免疫应答。

2.参加T细胞限制性识别：

双识别及限制抗原递呈细胞类型

3.由抗原提呈衍生其它功效

*参加T细胞在胸腺发育*诱导同种移植排斥反应*参加免疫应答遗传控制

小课讨论乙肝疫苗第23页1.概念：抗原递呈细胞、抗原处理、抗原递呈、溶酶体路径、胞质溶胶路径2.成熟与未成熟DC生物学特征及DC生物学功效。3.单核/巨噬细胞生物学功效4.MHCII类抗原提呈路径和MHCI类抗原提呈路径

第十章抗原递呈细胞和抗原提呈小课讨论乙肝疫苗第24页组织中未成熟DC-强吞噬和吞饮作用-处理抗原能力强-低水平MHC-缺乏共刺激分子-递呈抗原能力弱淋巴组织中成熟DC-不再有吞噬能力-表示共刺激分子(B7-1,B7-2)-高表示MHC和黏附分子-抗原递呈能力强小课讨论乙肝疫苗第25页

DC生物学功效*强吞饮作用*受体介导内吞(FcR/CR/甘露糖受体）*吞噬作用*表面捕捉(FDC)FcR和C3bR抗原提呈免疫调整*

激活初始T细胞，开启免疫应答*分泌细胞因子，调整免疫细胞分化发育*分泌趋化性细胞因子，趋化T/B细胞*利用未成熟DC诱导免疫耐受小课讨论乙肝疫苗第26页

MPS主要生物学功效吞噬作用：吞噬颗粒抗原、受体（FcR和C3bR)介导内吞、吞饮；

杀伤：氧依赖和非依赖机制杀伤和消化病原体；抗肿瘤：直接杀伤、ADCC、激发抗瘤免疫；参加免疫应答：

-加工和递呈抗原，提供第二活化信号；

-参加Th1细胞介导细胞免疫效应阶段。参加免疫调整:-正调：产生IL-1/12，TNF-a-负调：前列腺素、TGF-b介导炎症反应:吞噬杀伤；分泌各种炎症介质。小课讨论乙肝疫苗第27页MenuFB小课讨论乙肝疫苗第28页溶酶体途径外源性抗原新合成MHC-II类分子（内质网中）吞噬小体li占据抗原结合槽溶酶体蛋白酶MIIC吞噬溶酶体liCLIP

蛋白酶作用DM降解成1318AA小肽+CLIP脱落,暴露抗原结合槽抗原肽/MHCII类分子复合物转运至APC表面,供CD4+T细胞识别吞噬、内吞、吞饮小课讨论乙肝疫苗第29页MenuFB小课讨论乙肝疫苗第30页内源性抗原递呈路径

内源性抗原（如病毒抗原、肿瘤抗原)

胞质↓被蛋白酶体酶解抗原肽（含8-13个AA）↓经TAP转运至内质网形成抗原肽/MHC-I类分子复合物↓转运至APC表面递呈给CD8+T细胞识别小课讨论乙肝疫苗第31页1.概念：免疫应答、免疫反应、细胞免疫应答、体液免疫应答2.Th1细胞免疫应答3.CD8T细胞介导免疫应答

第十一章T细胞免疫应答小课讨论乙肝疫苗第32页T细胞介导免疫应答一、识别阶段：抗原摄取：吞噬、吞饮及受体介导内吞反抗原加工、处理和提呈:外源性抗原:APC/MHCIICD4+T细胞内源性抗原:靶细胞/MHCICD8+T细胞反抗原识别:

双识别:TCR-肽，TCR-MHC

共受体:CD4-MHCII,CD8-MHCI小课讨论乙肝疫苗第33页TCRMHC限制性识别产生T细胞活化所需第一信号（抗原特异性信号）T细胞活化还需第二信号（协同刺激信号小课讨论乙肝疫苗第34页二、活化、增殖和分化阶段：CD4T细胞1.CD4T细胞活化信号要求：

(1)活化信号1（抗原特异性信号） *双识别:TCR-肽

TCR-MHCII*共受体:CD4-MHCII,*CD3传递特异性抗原识别信号

(2)活化信号2(协同刺激信号) *如B7-CD28分子等黏附分子结合

(3)细胞因子(IL-1、IL-12等)2、CD4T细胞增殖和分化

T细胞活化→表示各种细胞因子及受体(IL-2及IL-2R)→T细胞克隆增殖→分化为效应T细胞(效应Th１、Th2及效应Tc细胞)

小课讨论乙肝疫苗第35页APC与T细胞间协同刺激分子及对应配体相互作用产生第二信号小课讨论乙肝疫苗第36页细胞增殖和分化TTeTeTeTm小课讨论乙肝疫苗第37页Th细胞增殖分化成Th1细胞小课讨论乙肝疫苗第38页二、活化、增殖和分化阶段：CD8+T细胞1.T细胞活化信号要求：

(1)活化信号1（抗原特异性信号） *双识别:TCR-肽

TCR-MHCI*共受体:CD8-MHCI,*CD3传递特异性抗原识别信号

(2)活化信号2(协同刺激信号)*如B7-CD28分子等黏附分子结合（直接激活）*Th促进APC表示B7，向CD8T提供共刺激信号（间接激活）

(3)细胞因子（IL-1等）

2.T细胞增殖和分化

T细胞活化→表示各种细胞因子受体如IL-2R，接收自分泌IL-2或Th细胞产生IL-2（间接激活）→T细胞克隆增殖→分化为效应T细胞(效应Th１、Th2及效应Tc细胞)

小课讨论乙肝疫苗第39页A：病毒感染DC细胞连续性高表示B7分子，从而提供活化信号1、2，激活CTL并使其分泌IL-2直接激活机制B：IL-2与IL-2R相互作用使CTL克隆扩增AB小课讨论乙肝疫苗第40页间接激活机制（一）A：经活化信号1、2激活Th细胞分泌IL-2ABB：经活化信号1激活CTL细胞B表示IL-2RIL-2与IL-2R相互作用使CTL克隆扩增小课讨论乙肝疫苗第41页间接激活机制（二）A：经活化信号1激活Th细胞促使APC表示协同刺激分子ABB：表示协同刺激分子APC提供活化信号1、2激活CTL分泌IL-2IL-2与IL-2R相互作用使CTL克隆扩增小课讨论乙肝疫苗第42页小课讨论乙肝疫苗第43页

活化CD4+Th1释放各种淋巴因子,引发单个核细胞向炎症部位浸润。1.促使炎症细胞从血管向局部渗出因子：*TNF、LT:促进血管内皮细胞及白细胞表示黏附分子；

*趋化因子：MCF、LCF等；2.作用巨噬细胞因子：

MCF、MAF、MIF等；3.作用淋巴细胞因子：LCF、IL-2、IL-3等；4.效应因子：IFN-γ、TNF、LT等.三、效应阶段：Th1细胞效应机制小课讨论乙肝疫苗第44页Th1细胞活化后产生各种淋巴因子作用于各种细胞小课讨论乙肝疫苗第45页（1）特异性识别与结合阶段：

*黏附分子非特异结合

*

(CTL)TCR-肽/MHCI(靶细胞）特异结合

(2)细胞极化：*细胞骨架蛋白、细胞器、分泌颗粒向与靶细胞接触方向重新排列和分布。（3）致死性打击阶段：

脱颗粒机制

*释放穿孔素(perforin)→靶细胞坏死

*释放颗粒酶→靶细胞凋亡(apoptosis)

死亡受体介导杀伤机制

*

Fas-FasL；*

TNF-TNFR→靶细胞凋亡三、效应阶段：CTL胞毒效应小课讨论乙肝疫苗第46页脱颗粒(颗粒酶)及死亡受体介导

靶细胞凋亡小课讨论乙肝疫苗第47页细胞免疫参加主要免疫学效应

1.抗感染:杀伤胞内寄生微生物

2.抗肿瘤:Tc杀伤、NK、巨噬细胞及CK杀伤作用3.参加病理过程:

*迟发型超敏反应

*移植排斥反应

*本身免疫病小课讨论乙肝疫苗第48页第十二章B细胞介导体液免疫应答一、识别阶段：APC-Th1.抗原摄取：吞噬、吞饮及受体介导内吞作用2.抗原加工、处理和提呈:MHCII路径3.抗原识别:

双识别:TCR-肽/MHCII

共受体:CD4-MHCII(二)活化、增殖和分化阶段1.Th细胞活化、增殖和分化：（1）Th细胞活化：双信号和细胞因子（IL-1等）（2）Th细胞增殖和分化：活化Th细胞表示IL-2及IL-2RTh细胞增殖、分化成效应Th细胞（部分成为Tm)小课讨论乙肝疫苗第49页2.B细胞活化、增殖和分化：

（1）B细胞活化

活化信号1BCR单识别抗原B细胞决定基CD19/CD21/CD81辅助受体提升B细胞反抗原刺激敏感性Igα和Igβ传递特异性识别信号

活化信号2B细胞经过BCR摄入抗原，加工、处理

以抗原肽/MHCII复合物提呈给Th细胞

Th细胞CD40L与B细胞CD40结合提供活化信号2

细胞因子

活化Th细胞分泌

(IL-4、IL-5、IL-6等)→辅助B细胞活化、增殖和分化（2）B细胞增殖、分化及转归活化B细胞表示各种细胞因子受体→接收Th细胞分泌细胞因子→B细胞增殖、分化→浆细胞→IgM

生发中心

体细胞突变（抗体亲和力成熟）、抗体类别转换

分化成浆细胞

IgG记忆B细胞（再次应答）小课讨论乙肝疫苗第50页CD19/CD21/CD81复合物小课讨论乙肝疫苗第51页小课讨论乙肝疫苗第52页促进B细胞活化、增殖和分化细胞因子小课讨论乙肝疫苗第53页（三）效应阶段中和毒素激活补体→CDC调理作用ADCC参加机体局部免疫小课讨论乙肝疫苗第54页小课讨论乙肝疫苗第55页抗体依赖细胞介导细胞毒小课讨论乙肝疫苗第56页DC、M

首次应答特性再次应答B细胞APC抗原浓度抗体生成

潜伏期

高峰浓度

维持时间Ig类别

亲和力无关抗体

高

低

5-10天

较低

短

主要为IgM

低

多

2-5天

较高

长

IgG、A

高

少

首次应答和再次应答异同小课讨论乙肝疫苗第57页保护性应答天然免疫特异性免疫免疫耐受免疫损伤机体对乙肝V/乙肝疫苗免疫应答小课讨论乙肝疫苗第58页（一）中枢免疫耐受机制

克隆丢失学说（免疫细胞在中枢器官阴性选择）

（二）外周耐受

1.本身反应性淋巴细胞克隆去除:

AICD

2.本身反应性淋巴细胞克隆失能

*缺乏第二活化信号,如非专职APC缺乏协同刺激分子；

*缺乏Th细胞辅助；

3.本身反应性淋巴细胞克隆忽略：

*缺乏第一活化信号：不识别抗原、信号转导通路关闭；

4.本身反应性淋巴细胞克隆抑制

*

Ts细胞作用

→释放抑制性细胞因子

→关闭相关细胞信号转导通路

*抑制性细胞因子（TGF-b,IL-10)抑制作用

*独特型与抗独特型

免疫耐受机制小课讨论乙肝疫苗第59页

胚胎期免疫系统接触特定抗原后，针对该抗原特异性细胞克隆即被去除或被“禁闭”，机体将该抗原视为本身成份，出生后将不对此抗原产生应答。1957年Burnet克隆丢失学说（clonaldeletiontheory）小课讨论乙肝疫苗第60页活化诱导细胞死亡(AICD)小课讨论乙肝疫苗第61页体液免疫

Bcell

识别乙肝V(衣壳蛋白）/疫苗（HBsAg)(TDAg),需Th2辅助。

Bcell与Th2相互作用：初始Th识别DC递呈抗原肽-MHCII复合物效应Th效应Th识别B细胞表面抗原肽-MHCII复合物（BcellBCR将v抗原降解，形成B细胞表面抗原肽-MHCII复合物，供Th2识别，二者识别不一样表位）诱导表示CD40L提供Bcell激活信号2。细胞免疫小课讨论乙肝疫苗第62页

体液免疫

Bcell识别乙肝V(衣壳蛋白，TDAg),需Th2辅助

提供信号2，及细胞因子（IL-4)

Ab中和作用；（大多数疫苗效应）调理作用(Ab+complement)ADCC

小课讨论乙肝疫苗第63页Acquiredimmunity:thekeyplayers小课讨论乙肝疫苗第64页B细胞对TD-Ag识别*BCR直接识别抗原B细胞表位；*BCR特异性结合抗原，经过内化将其摄入，并将抗原降解为肽段，形成T细胞表位-MHC-II类分子复合物；*T、B细胞分别识别同一抗原T细胞表位和B细胞表位，才能相互作用。小课讨论乙肝疫苗第65页BCR直接识别抗原B细胞表位小课讨论乙肝疫苗第66页B细胞和T细胞识别同一抗原不一样表位小课讨论乙肝疫苗第67页一、B细胞活化

（一）活化信号1(抗原识别信号)

*BCR特异性结合抗原B细胞表位，开启第一信号，并由Igα/Igβ将信号传递到B细胞内； *共受体：CD21/CD19/CD81

（二）活化信号2(共刺激信号)

*T、B细胞分别识别TD-AgT细胞表位和B细胞表位，使Th2细胞反抗原特异性B细胞给予辅助；

*活化Th2与B细胞间共刺激分子相互作用(如CD40L/CD40)；

（三）细胞因子(IL-1、IL-4等)发生部位：外周淋巴组织T细胞区小课讨论乙肝疫苗第68页Th细胞辅助B细胞活化、增殖、分化小课讨论乙肝疫苗第69页Th2细胞极化并分泌IL-4作用于B细胞小课讨论乙肝疫苗第70页BidirectionalT-Bcellinteraction小课讨论乙肝疫苗第71页（一）活化B细胞转归*部分B细胞迁移至髓质，增殖分化为可产生抗体浆细胞；*部分B细胞迁移至初级淋巴滤泡，继续增殖并形成生发中心。

二、B细胞增殖、分化小课讨论乙肝疫苗第72页*体细胞高频突变与Ig亲和力成熟*抗原受体编辑*抗体类别转换

（二）B细胞在生发中心分化成熟小课讨论乙肝疫苗第73页小课讨论乙肝疫苗第74页Germinalcenterreaction小课讨论乙肝疫苗第75页*B细胞增殖分化→浆细胞→骨髓→分泌抗体*B细胞增殖分化→记忆B细胞→淋巴细胞再循环

（三）生发中心发育成熟B细胞转归小课讨论乙肝疫苗第76页Phaseofthehumoral

immuneresponse小课讨论乙肝疫苗第77页*B细胞对TD抗原识别*B细胞活化、增殖和分化*体液免疫应答普通规律*B细胞应答效应B细胞对TD-Ag应答小课讨论乙肝疫苗第78页

特定抗原首次刺激机体所引发应答。*须经一定潜伏期才能在血液中出现抗体；*产生抗体以IgM类为主；*抗体亲和力较低。

首次免疫应答（Primaryimmuneresponse）小课讨论乙肝疫苗第79页

同一抗原再次侵入机体，记忆性淋巴细胞可快速、高效、特异地产生应答，此即再次免疫应答。*记忆性B细胞作为APC；*潜伏期显著缩短；*抗体产量高,维持时间长；*抗体以IgG为主，亲和力高。再次免疫应答（secondaryimmuneresponse）小课讨论乙肝疫苗第80页Primaryandsecondaryhumoralimmuneresponses小课讨论乙肝疫苗第81页首次应答和再次应答抗体浓度时间（天）103总抗体量潜伏期IgGIgM首次抗原刺激再次抗原刺激潜伏期小课讨论乙肝疫苗第82页*中和作用*免疫调理作用*激活补体*ADCC*局部抗感染*免疫损伤作用B细胞应答效应小课讨论乙肝疫苗第83页NeutralizationByAntiviralAntibodies小课讨论乙肝疫苗第84页

细胞免疫Virus

多为胞内寄生，胞内合成病毒蛋白（利用宿主细胞成份）为内源性抗原，可与MHCI分子结合，递呈给CD8+T;

CD8+T增殖分化为CTL杀伤靶细胞胞内寄生乙肝病毒抗体无法作用，此时主要由细胞免疫发挥作用。小课讨论乙肝疫苗第85页Virusinfectedcells“Endogenousantigen”Virusinfectedcell小课讨论乙肝疫苗第86页ViralproteinVirusinfectedcells“Endogenousantigen”小课讨论乙肝疫苗第87页Recognizecellswhichexpressendogenousantig