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文档简介

DNA的粗提取和物理性状的观察情景导入DNA的粗提取和物理性状的观察目的要求一、原理1）不同浓度NaCl中DNA溶解度不同。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2）DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同，DNA不溶于酒精，细胞中某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3）DNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。4）DNA与甲基绿结合呈蓝色进行鉴定;DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。,二、方法首先：释放核DNA.方法：机械粉碎的方法破坏细胞壁和细胞膜其次：把DNA和蛋白质分离方法：根据二者的化学性质不同三、实验材料洋葱（或结球甘蓝、香蕉等）四、仪器粉碎机、天平、试管、漏斗、滴管、玻璃棒、滤纸、玻璃片、显微镜五、试剂食盐、95%乙醇、洗涤剂（1:5稀释液）、蒸馏水、甲基绿溶液、班氏试剂、双缩脲试剂六、方法步骤1）称取

g洋葱鳞叶。

原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。(一)实验材料的选取1.破碎：加入

ml洗涤剂稀释液、2g

和50ml蒸馏水，用粉碎机打碎洋葱鳞叶呈浆状。

如果是动物细胞怎么处理？请同学们想一想。2.过滤：用滤纸过滤浆液于试管中，获得

。(二)破碎细胞，获取含DNA的滤液（三）DNA的析出与鉴定1.DNA的析出DNA的析出用的是与滤液体积相等的

（体积分数为95％），静置2-3min，溶液中会出现白色

，这就是粗提取DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水。冷却的酒精溶液絮状物2.观察DNA的形态（三）DNA的析出与鉴定3.DNA的鉴定1）取少许絮状物置载玻片上加1滴

，显微镜下观察絮状物颜色和形态，将结果记录在实验报告上。甲基绿2）鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一只加入DNA丝状物，各加入4ml

试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否有

。二苯胺蓝色（三）DNA的析出与鉴定3）用

和

进一步检验粗提取液中的化学成分，将结果纪录在实验报告上.班氏试剂双缩脲试剂3.DNA的鉴定（三）DNA的析出与鉴定分析和讨论1）提取洋葱鳞叶中的DNA，为什么要用洗涤剂和NaCl进行处理？2）实验所获得的提取液是否纯净？并分析原因。3）在实验中，你观察到DNA具有哪些物理性状？4）尝试用猪肝或其他动物材料做这个实验，注意比较动物材料和植物材料在处理上的差别。分析和讨论小结1.DNA的粗提取与鉴定的方法2.原理3.实验设计的步骤，原则

与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（多选）A操作时缓慢滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整C加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋

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