饲料中添加乳酸菌对克氏原螯虾生长、氨基酸沉积率及消化酶活性的影响

饲料中添加乳酸菌对克氏原螯虾生长、氨基酸沉积率及消化酶活性的影响

由于微生态制剂具有提高身体免疫功能、调节身体代谢、有效改善微生态系统平衡等特点，广泛应用于水产养殖。1材料和方法1.1克氏原螯虾生长试验试验虾购自江苏省江都区汤桥家庭农场，挑选初始体重（4.39±0.01)g克氏原螯虾，用5%盐水浸泡5min，放入温室水泥池暂养7d后，开始进行生长试验。参照前期试验及相关文献1.2油脂、预混料及添加剂的添加量以进口鱼粉、豆粕、菜粕、面粉等为原料配制基础饲料，原料经粉碎、称重后按照配方要求准确添加油脂、预混料及各种添加剂，经仪器混匀后，用F26颗粒饲料挤条机制成直径为1.5mm条状物后自然风干，将风干饲料破碎、过筛，保存在-20℃冰箱。饲料配方及营养水平见表1。1.3样本采集与指标测量1.3.1投喂量及生化指标的测定养殖试验结束后，计数，称重，计算成活率、增重率、饲料系数、特定生长率、蛋白质效率、肥满度和肝体指数。成活率（%）=试验结束尾数（尾）/初始尾数（尾）×100平均增重（g）=结束均重（g）-初始均重（g)增重率（%）=平均增重（g）/初始均重（g）×100饲料系数=投饵量（g）/平均增重（g)特定生长率（%/d)=(ln结束均重-ln初始均重）/天数×100蛋白质效率=平均增重（g）/[投饲量（g）×饲料蛋白质含量（%）]肥满度（g/cm肝体指数（%）=肝重（g）/体重（g）×1001.3.2氨基酸沉积率每个重复随机取3尾虾肌肉样，用以氨基酸含量的测定。氨基酸含量的测定采用酸水解结合高效液相色谱法（Agilent1220InfinityLC，德国），氨基酸沉积率的计算参照伍代勇等1.3.3数据处理及分析方法每个重复随机取3尾虾，分离肠道，液氮速冻。准确称取待测组织重量，按重量（g）:体积（mL)=1:9的比例加入9倍组织重量的生理盐水，并在冰水浴条件下机械匀浆，离心10min后取上清液制成10%浓度的组织匀浆，-20℃保存备用。酶活性测定指标包括胃蛋白酶、胰蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶等，具体测定方法参照南京建成生物工程研究所相关试剂盒说明书。1.4数据处理用Excel软件记录数据，SPSS16.0进行单因素方差分析（one-wayANOVA）。多重比较采用Duncan’s法，显著水平设定为P<0.05，试验数据以“平均值±标准差（Mean±SD）”表示。2结果与分析2.1各组虾末重、增重、增重率、特定生长率、特定生长率比较各组间克氏原螯虾初重、饲料系数、肥满度、成活率均没有显著差异（P>0.05）；第Ⅱ组虾末重、增重、增重率、特定生长率显著高于其他组（P<0.05），蛋白质效率第Ⅱ组最高，其次是第Ⅰ组，且显著高于其他两组（P<0.05）；肝体指数以第Ⅱ组最高，Ⅲ组和Ⅳ组肝体指数显著低于对照组（P<0.05）。2.2、两组天冬氨酸沉积率的比较由表3可知，克氏原螯虾对氨基酸的沉积率总体不高，不同氨基酸间存在较大差异。Ⅰ、Ⅳ组天冬氨酸沉积率均为最高，谷氨酸次之，精氨酸居第三；Ⅱ组天冬氨酸沉积率最高，其次为甲硫氨酸；Ⅲ组则是天冬氨酸沉积率最高，甲硫氨酸居第二，谷氨酸为第三。Ⅱ、Ⅲ两组天冬氨酸沉积率显著高于其他两组（P<0.05）；Ⅱ组组氨酸沉积率显著高于其他三组（P<0.05），Ⅲ、Ⅳ组间无显著差异（P>0.05）；除这二种氨基酸外，其余所有氨基酸、总氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸的沉积率Ⅱ组最高，且显著高于其他各组(P<0.05)，而其他三组均无显著差异（P>0.05）。2.3、组消化酶活性的比较由表4可知，Ⅱ组各消化酶活性均为最高，且显著高于其他三组（P<0.05）；与对照组相比，Ⅲ、Ⅳ组胃蛋白酶、α-淀粉酶活性没有显著差异（P>0.05）；Ⅰ组胰蛋白酶活性显著低于其他三组（P<0.05）；Ⅰ、Ⅲ组脂肪酶活性均显著低于Ⅳ组（P<0.05）。3讨论3.1小分子肽和游离氨基酸水产动物的生长三丁酸甘油酯分解释放丁酸，可维持肠道完整性，促进消化酶的分泌，抑制肠道有害菌，促进肠道消化吸收，进而提高动物生产性能乳酸菌可将部分蛋白质大分子降解为小分子肽和游离氨基酸水产动物的生长主要是机体蛋白质积累的过程，蛋白质的积累又是通过氨基酸的合成来实现的3.2消化酶活性与饲料营养水平动物生长与饲料利用率密切相关，而饲料利用率受到消化吸收能力的影响，消化能力又与肠道消化酶活性密切相关饲料营养水平可通过影响肠道形态发育和消化酶活性进而影响生长性能3.3乳酸菌添加量结果本试验中各组成活率普遍较低，这可能与试验空间狭小导致密度过大有关。与单独添加三丁酸甘油酯组相比，混合添加乳酸菌后，增重率、肠道胃蛋白酶、胰蛋白酶及脂肪酶活性有所提高，但依然远小于乳酸菌单独添加组。同样地，同时添加乳酸菌和三丁酸甘油酯组生长性能与肌肉氨基酸沉积率没有显著提升。三丁酸甘油酯水解通过氢离子沉积降低消化道的pH4乳酸菌或三丁酸甘油酯饲料中添加乳酸菌可显著提高克氏原螯虾生长性能，促进饲料氨基酸在虾体内的沉